PRCTICA No.

12 COMPROBACION EXPERIMENTAL DE LA LEY DE LAMBERT-BEER

OBJETIVOS 1. Construir la grafica de la curva de calibracin de la absorbancia contra la concentracin de un sistema colorido, en la cual se verifica la ley de Lamber-Beer. 2. Determinar la concentracin de una solucin desconocida.

FUNDAMENTO La ley de Beer fue descubierta independientemente (y de distintas maneras) por Pierre Bouguer en 1729, Johann Heinrich Lambert en 1760 y August Beer en 1852. Ellos propusieron que la absorbancia de una muestra a determinada longitud de onda depende de la cantidad de especie absorbente con la que se encuentra la luz al pasar por la muestra. Explica de forma matemtica cmo la luz es absorbida por la materia. La ley dice que tres fenmenos son responsables de disminuir la cantidad de luz despus que esta pasa por algn medio que absorba: 1. La cantidad (concentracin) de material que absorbe en el medio. 2. La distancia que la luz tiene que viajar a travs de la muestra (trayecto ptico) 3. Probabilidad de que el fotn de cierta longitud de onda sea absorbido por el material (coeficiente de absorcin o de extincin molar del material). PRELABORATORIO 1. Cul es el enunciado de la ley de Lamber-Beer? 2. Investiga el fundamento de la espectrofotometra de absorcin. 3. Investiga el diagrama ptico de los elementos que constituyen un espectrofotmetro. MATERIAL Y EQUIPO REACTIVOS

Espectrofotmetro Solucin de KMnO4 de 1 mg/mL 2 Cubetas o celdas de lectura| Agua destilada 9 tubos de ensaye de 18 x 25 mm Muestra problema 2 buretas (una mbar y otra incolora) 1 gradilla TIEMPO DE ELABORACIN DE LA PRCTICA

Dos horas PROCEDIMIENTO Elaboracin de la curva de calibracin 1. A partir de una solucin estndar de KMnO4 cuya concentracin es de 1 mg MnO4-/mL se preparan por dilucin con agua destilada, una serie de soluciones cuyas concentraciones sean las siguientes: No 1 2 3 4 5 6 7 8 Concentracin de KMnO4 .3 mg % .6 mg % .9 mg % 1.2 mg % 1.5 mg % 1.8 mg % 2.1 mg % 2.4 mg % mL de sol. STD 9.7 9.4 9.1 8.8 8.5 8.2 7.9 7.6

2. Las soluciones se preparan depositando en tubos de ensaye de 18 x 25 mm -cuidadosamente etiquetados con la concentracin correspondiente-; la cantidad necesaria de la solucin estndar de permanganato para preparar cada una de las diluciones indicadas, utilizando para ello una bureta; se completa posteriormente con agua destilada a un volumen de 10 mL y se agitan perfectamente. 3. Se guardan al abrigo de la luz 4. y en la otra se coloca agua destilada. 5. Se enciende el equipo y se deja calentar por 15 minutos para estabilizar los sistemas electrnicos y se elije el modo de lecturas de absorbancia. 6. Se selecciona la longitud de onda de 540 nm 7. Se vaca a una de las celdas el agua destilada.

8. Se limpia la celda con papel absorbente suave y se procura no tocar las paredes transparentes de la misma. 9. Se introduce en el equipo y se pulsa la tecla CAL para llevar a cero la lectura de absorbancia. 10. Se vaca una porcin de la solucin en la otra celda del espectrofotmetro ms diluda de KMnO 4

11. Se introduce la celda con la solucin colorida tomando la precaucin sealada en el punto 8 y se anota la lectura de absorbancia que muestra el espectrofotmetro 12. Se repiten las acciones sealadas en los puntos 10 y 11, cambiando cada vez a la solucin ms concentrada, procurando enjuagar la celda con una pequea porcin de la solucin que se va a leer, desechndola en el contenedor. 13. Antes de cada lectura se introduce la celda con el agua destilada, para verificar que la absorbancia registra una lectura de 0000; en caso de haber variacin se puede pulsar de nuevo el botn CAL para ajustarlo a cero. 14. Despus de leer todos los tubos de la serie, se elabora la curva de calibracin del KMnO4 graficando las concentraciones de los tubos contra las absorbancias obtenidas. 15. Se analiza la grfica para determinar por su linealidad, el lmite de la proporcionalidad de la relacin de la concentracin y la absorbancia indicada en la Ley de Lambert-Beer. Determinacin de la concentracin de la muestra problema 1. Se afora a 100 mL el matraz volumtrico donde se recibi la muestra problema. 2. Se agita perfectamente el matraz, sosteniendo la tapa del mismo e invirtindolo varias veces. 3. A continuacin se coloca una porcin de la solucin de la muestra problema en la celda del espectrofotmetro, se calibra a cero con otra celda con agua destilada y se lee la absorbancia de la muestra colorida. 4. Se busca en la curva de calibracin la concentracin que corresponde a la lectura de absorbancia obtenida. 5. Si la lectura del problema se sale de los valores lineales de la grfica, esta no puede prolongarse ya que no seguira la ley de Lamber-Beer, por lo que no seria un valor correcto. Para corregir este problema deben de realizarse diluciones hasta que la lectura de alguna quede dentro de la parte lineal de la curva.

MANEJO DE RESIDUOS Y SUBPRODUCTOS Colocar los residuos de las celdas en un recipiente sealado como: Residuos de KMnO4