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Procedimento Operacional Padro DOSAGEM DA ALBUMINA

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ALBUMINA-PP
FUNDAMENTO A albumina presente na amostra reage com o verde de bromocresol em meio cido, formando um complexo colorido que quantificado espectrofotometricamente. A absorbncia do complexo formado, medida entre 600 e 640 nm, diretamente proporcional concentrao da albumina na amostra analisada. APLICAO CLNICA A dosagem de Albumina no soro muito empregada para avaliar o estado nutricional da pessoa e tambm para acompanhar doenas renais com proteinria, enfermidades hepticas avanadas e casos de desidratao. AMOSTRA Preparo do Paciente Colher sangue pela manh aps jejum 8 horas, salvo orientaes mdicas. Amostras utilizadas Soro. No usar plasma. Estabilidade e armazenamento da amostra No soro, o analito estvel por 3 dias entre 2-8 C. Volume ideal utilizado para anlise (Definir o volume ideal a ser encaminhado para anlise). Volume mnimo utilizado para anlise (Definir o volume mnimo a ser encaminhado para anlise). Critrios para rejeio da amostra No usar plasma. Fazer referncia ao manual ou POP de coleta, separao e distribuio de material. REAGENTE UTILIZADO ALBUMINA PP CAT. 419 GOLD ANALISA DIAGNSTICA LTDA CNPJ 03.142.794/0001-16 Av. Nossa Senhora de Ftima, 2363 Belo Horizonte MG Brasil Farmacutico Responsvel: Homero Jackson de Jesus Lopes CRF MG - 2010 Componentes do kit Conservar entre 2-8C. 1. Padro Contm 3,8 g/dL de albumina bovina e azida sdica 15,4 mmol/L. Armazenar bem vedado para evitar evaporao. O Padro rastrevel ao Material de Referncia Certificado CRM (BCR) 470 do Institute for Reference Materials and Mesurements/International Federation of Clinical Chemistry IRMM/IFCC. 2. Reagente de Cor - Contm tampo 60 mmol/L, verde de bromocresol 0,3 mmol/L e Brij- 35 6 mmol/L. Estabilidade Os reagentes so estveis at o vencimento da data de validade impressa no rtulo e na caixa quando conservados na temperatura recomendada, bem vedados e se evite a contaminao durante o uso. Sinais de Deteriorao dos Reagentes 1Presena de partculas e turbidez indicam deteriorao dos reagentes. 2- A absorbncia do Reagente de Cor (2), lida contra gua em 630 nm, dever ser inferior a 0,300 durante toda a sua utilizao ou at a expirao da data de validade do mesmo. Precaues e Cuidados Especiais 1- Aplicar os cuidados habituais de segurana na manipulao dos reagentes e amostra biolgica. 2- Recomendamos o uso das Boas Prticas de Laboratrios Clnicos para a execuo do teste. 3- De acordo com as instrues de biossegurana, todas as amostras devem ser manuseadas como materiais potencialmente infectantes. MS 80022230077

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4- Recomendamos o uso de equipamentos de proteo individual (EPI) como avental, culos de segurana, luvas descartveis e outros que se fizerem necessrios para a realizao do teste. 5- O Padro contm azida sdica como conservante. Evitar contato com os olhos, pele e mucosa. No aspirar ou ingerir. 6- No pipetar diretamente do frasco do Reagente de Cor (2), para evitar contaminao. 7- Descartar os reagentes e as amostras de acordo com as resolues normativas locais, estaduais e federais de preservao do meio ambiente. EQUIPAMENTOS Procedimento Tcnico Manual Espectrofotmetro (leitura entre 600 a 640 nm); Tubos e Pipetas; Cronmetro. Procedimento Tcnico Automatizado Citar nome, modelo e o local onde se encontra o equipamento; Fazer referncia ao manual ou POP para utilizao do mesmo. Procedimento Tcnico Alternativo Citar o equipamento alternativo e os procedimentos para medio dos ensaios. Indicar as possveis diferenas quando os procedimentos manuais substiturem os procedimentos automatizados. Procedimento em Analisadores Automticos Mencionar o manual ou POP para utilizao do equipamento analtico. Anexar o guia de aplicao dos reagentes para o sistema automtico. Influncias Pr-Analticas Em pacientes com depresso e em pessoas obesas, o valor de albumina tende a ser mais baixo. O uso de torniquete por mais de 3 minutos provoca aumento no valor da albumina. Interferncias A hemlise (hemoglobina at 180 mg/dL), a bilirrubina at 38 mg/dL e a lipemia (triglicrides at 250 mg/dL) no produzem interferncias significativas. Amostras com valores de triglicrides acima de 250 mg/dL produzem interferncias positivas que podem ser minimizadas com emprego do Branco da amostra. Ateno Para minimizar a ao de interferncias fotomtricas na dosagem, utilizar o Branco de Amostra. Branco de Amostra Misturar 10 L do soro com 1000 L de soluo de NaCL 150 mmol/L (0,85%). Medir a absorbncia da mistura em 630nm, acertando o zero de absorbncia com gua deionizada ou destilada. Subtrair a absorbncia obtida do Branco de Amostra da absorbncia do Teste e calcular o resultado final. PROCEDIMENTO Procedimento Manual A-Condies de Reao Leitura: Comprimento de onda 630 nm (600 a 640 nm) Temperatura: ambiente (15-30C) Medida: Contra o tubo Branco Tipo de Reao: Ponto final

B-Tcnica de Anlise 1- Identificar 3 tubos de ensaio com "Branco", "Teste" e "Padro" e proceder: Tubos Branco Teste Padro Padro (1) 10 L Amostra 10 L

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Reagente de Cor (2) 1000 L 1000 L 1000 L 2-Misturar e deixar os tubos durante 2 minutos temperatura ambiente. 3-Ler a absorbncia do Padro (Ap) e do Teste (At), zerando o aparelho com o Branco em 630 nm ou filtro vermelho (600 a 640 nm). A cor estvel por 10 minutos. CLCULOS Ver Linearidade. Como a metodologia obedece a Lei de Lambert-Beer, pode-se efetuar os clculos atravs do Fator de Calibrao (FC). Concentrao do Padro = Cp Concentrao do Teste = Ct Absorbncia do Padro = Ap Absorbncia do Teste = At FC = Cp Ap Exemplo: Cp = 3,8 g/dL Ap = 0,320 FC = 3,8 = 11,87 0,320 Ct = FC x At = 11,87 x 0,420 = 5,0 g/dL Ateno Esta Tcnica de dosagem adequada para fotmetros cujo volume mnimo de soluo para a leitura igual ou menor do que 1000 L. O analista sempre deve fazer uma verificao da necessidade de ajuste do volume para fotmetro empregado no seu laboratrio. Os volumes de amostra e de reagente podem ser modificados proporcionalmente, sem alterar o desempenho do teste e os clculos. Em caso de reduo dos volumes necessrio observar o volume mnimo de leitura fotomtrica. Volumes da amostra menores do que 10 L so crticos em aplicaes manuais e devem ser usados com cautela porque aumentam a impreciso da medio. RESULTADOS Fator de Converso de Unidades Unidade convencional (g/dL) 144,9 = Unidade SI (mol/L). CONTROLE DA QUALIDADE Materiais Identificar os materiais de controle interno e externo da qualidade, citando fabricante e nmero de catlogo. Referenciar POP para limpeza e secagem dos materiais utilizados. Controle Interno Descrever a calibrao peridica de pipetas, equipamentos utilizados, controle de temperatura ambiente e geladeiras para armazenamento dos kits. Citar a utilizao de soros controles (nvel normal cdigo --------- e patolgico cdigo -------) nas anlises realizadas juntamente com a freqncia da utilizao dos mesmos. Descrever o procedimento de verificao de novos lotes de controles e reagentes. Citar POP para controle interno.

At = 0,420

Controle Externo Descrever os procedimentos utilizados nas avaliaes de qualidade feitas por programas de comparao entre laboratrios ou outros controles de qualidade: PNCQ-SBAC e/ou PELM-SBPC Gerenciamento dos dados obtidos no Controle Interno e Externo Definir como os dados de controle so arquivados e gerenciados.

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Fazer referncia ao manual ou POP de garantia da qualidade. VALORES DE REFERNCIA Adultos; 3,5 a 5,5 g/dL Crianas e adolescentes De 1 a 30 dias 2,6 a 4,3 De 31 a 182 dias 2,8 a 4,6 De 183 a 365 dias 2,8 a 4,8 De 1 a 18 anos 2,9 a 4,7 Estes valores devem ser usados como uma orientao. recomendado que cada laboratrio estabelea seus prprios valores de referncia. SIGNIFICADO CLNICO A albumina, principal componente protico de um soro humano normal, uma protena globular produzida pelo fgado. Ela tem diversas funes importantes, como: Transporte de molculas hidrofbicas como a bilirrubina e os cidos graxos. Isto possvel devido zona hidrofbica que existe em sua estrutura, sendo essa propriedade utilizada para dosar a albumina pelo mtodo apresentado. Nutrio Manuteno da presso osmtica sangunea. Variaes nos nveis sricos de albumina no so especficos j que podem ser devido a um grande nmero de alteraes, no entanto til para monitorar o estado do paciente. Havendo leso heptica ou renal teremos distrbios que podem ser resumidos em: Hipoalbuminemia: que ocorre nas doenas hepticas crnicas (cirrose), na sndrome nefrtica e casos de desnutrio grave. Essa reduo est relacionada com a diminuio da sntese heptica ou perda excessiva renal, levando a uma diminuio da presso coloidosmtica do plasma, provocando um aumento de reabsoro de sdio e gua e conseqentemente causando edema, ictercia e anemia dilucional. Outras causas de diminuio da albumina no sangue so: infeces prolongadas, queimaduras graves e aps hemorragia grave. Hiperalbuminemia: Os aumentos anormais de albumina no sangue so raramente observados, exceto, na presena de desidratao ou choque, onde ocorre uma perda excessiva de gua causando uma hemoconcentrao. LINEARIDADE Linearidade A reao linear at 6,0 g/dL. Para valores maiores, diluir a amostra com soluo de NaCL 150 mmol/L (0,85%) e realizar uma nova determinao. Multiplicar o valor obtido pelo fator de diluio empregado. LIMITAES DO MTODO Os resultados devero ser usados em conjunto com informaes disponveis da avaliao clnica e outros procedimentos diagnsticos. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 1- Basques JCA, Cabral GL, Cruz RS. Com II Congr Bras Anal Clin. Janeiro, 1972. 2- Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fundamento de Qumica Clnica, 4a Ed - Guanabara Koogan; 1998. 3- Doumas B T et al. Clin Chim Acta 1971; 31 : 87-96. 4- Inmetro Boas Prticas de Laboratrio Clnico e Listas de Verificao para Avaliao, Qualitymark eds, Rio de Janeiro, 1997. 5- Kaplan A, Szabo LL, Opheim KE. Clinical Chemistry: Interpretation and Techniques. Philadelphia, Lea & Febiger, 1988:149-162. 6- Mendes MQ, Lopes HJJ. Atualizao em Bioqumica Clnica: Tcnicas - Fundamento - Interpretao de Resultados. Belo Horizonte: MAI Ed., 1973:123-125. 7- Motta VT. Bioqumica Clnica: Mtodos e Interpretaes. Porto Alegre: Ed. Mdica Missau, 1989:104-109. 8- Nogueira DM, Strufaldi B, Hirata MH, et al. Mtodos de Bioqumica Clnica: Tcnica e Interpretao. So Paulo: Pancast Editora, 1990:255-258.

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9- Peters T, Biamont GT, Doumas BT. Albumin in serum. Em Faulkner WR. Meites S, eds. Selected Methods of Clinical Chemistry, Volume 9, Washington: AACC Press, 1982:319. 10- Albumina-PP, Instrues de Uso, Gold Analisa Diagnstica. Nome Elaborado por: Aprovado por: Implantado por: Substitui POP: Revisado por: Revisado por: Revisado por: Desativado por: Razo: Nmero Cpias
Reviso 04/11 Liberado Fernanda

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