Xenobitico

FASE I

FASE II
Epxido hidrolasas DT-diaforasa Glutation S-transferasas UDP-glucuronil transferasas Sulfato transferasas Metiltransferasas Aciltransferasas

EL SISTEMA DEL CITOCROMO P450: COMPLEJIDAD, MECANISMOS Y EVOLUCIN

Citocromo P450 NADPH-P450 reductasa Flavin-monooxigenasas Alcohol deshidrogenasa Aldehdo deshidrogenasa

detoxificacin

CITOCROMO P450 (Generalidades)

Descubiertas en los aos 40 Oxigenasas de Funcin Mixta Hemoprotenas microsomales Forma reducida (Fe2+) unida a CO: espectro con un Absmx 450 nm Responsables del metabolismo del 60% de frmacos de uso habitual Presentes en todos los tipos celulares

ESPECTRO DE ABSORCIN DEL P450

Absorbancia

Longitud de Onda (nm)

SUSTRATOS Tipo I y Tipo II

Absorbancia

LIGANDOS del Fe en P450

5O Ligando 6O Ligando

Tipo I

Tipo II

Longitud de Onda (nm)

Enlace HEMO-TIOLATO 6O Ligando

DISTRIBUCIN DEL P450 EN HGADO

ESTRUCTURA 3D DEL P450cam

ESTRUCTURA 3D DEL P450BMP

ESTRUCTURA 2D DEL P450BMP

CITOCROMO P450 (Nomenclatura)

Amplia versatilidad cataltica (Baja especificidad) Solapamiento de sustratos Se encuentran a lo largo de toda la escala evolutiva Superfamilia gentica (CYP): 55 genes secuenciados en humanos Familia: homologa en aa. 40 % (vg: 3) Subfamilia: homologa en aa. 55 % (vg: A) Gen: (vg: 4)

Familia P450 1

Subfamilia P450 1A P450 2A P450 2B P450 2C P450 2D P450 2E

Caractersticas representativas
inducibles por hidrocarburos aromticos constitutivos inducibles por fenobarbital sujetos a polimorfismo gentico sujetos a polimorfismo gentico inducibles por etanol

[P450s] microsomales en hgado humano

CONCENTRACIN (n = 60)

P450
P450 total CYP 1A2 CYP 2A6 CYP 2B6 CYP 2C CYP 2D6 CYP 2E1 CYP 3A

Contenido especfico (pmol/mg prot.) 240 100 42 23 14 13 12 60 27 54 22 12 96 51

P450 2

P450 3 P450 4

P450 3A P450 4A

inducibles por esteroides inducibles por proliferadores peroxisomales

CICLO CATALTICO DEL P450

OH
SUSTRATO

CICLO CATALTICO DEL P450

OH
SUSTRATO

H
SUSTRATO

H
SUSTRATO

OH
SUSTRATO

Fe3+ P450 Fe3+

H
SUSTRATO

OH
SUSTRATO

Fe3+ P450 Fe3+ P450

H
SUSTRATO

Fe3+ P450

Fe3+

XH + O2 + NAD(P)H +
H

P450

H+

eH

XOH + H2O +

NAD(P)+

P450 H
SUSTRATO

eH
SUSTRATO

SUSTRATO

(FeO)

3+

SUSTRATO

(FeO)

3+

P450

H2O H
SUSTRATO

Fe2+ P450 H
SUSTRATO

P450

H2O H
SUSTRATO

Fe2+ P450 H
SUSTRATO

H+

FeOOH P450 eH
+

Fe2+

O2

O2

H+

FeOOH P450 eH
+

Fe2+

O2

O2

P450

P450

COMPONENTES DEL SISTEMA P450 microsomal

NADPH ecitoplasma membrana del retculo endoplsmico citocromo P450 reductasa FAD FMN

PRODUCTO (ROH)

SUSTRATO (RH)

eFe citocromo P450 citocromo b5

NADPH-citocromo P450 reductasa Citocromo b5

Reduccin Monoelectrnica Produccin Superxido Produccin de H2O2 Peroxidasa

CITOCROMO P450 (Tipos de Reaccin)

Hidroxilacin de carbonos alifticos o aromticos Epoxidacin de enlaces dobles Oxigenacin de heterotomos (S, N, I) y N-hidroxilacin Desalquilacin de heterotomos (O, S y N) Transferencia oxidativa de grupos Ruptura no hidroltica de steres Deshidrogenacin

TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

Hidroxilacin de carbonos alifticos o aromticos

TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

Epoxidacin de enlaces dobles

TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

Oxigenacin de heterotomos (S, N, I)

TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

Desalquilacin de heterotomos (O, S y N)

TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

Transferencia oxidativa de grupos
Desulfuracin Oxidativa

Desaminacin Oxidativa

TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

Ruptura no hidroltica de steres

TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

Deshidrogenacin

1
TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

2
TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

3
TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

4
TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

5
TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

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TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

7
TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

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TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

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TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

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TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

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TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

12
TIPOS DE REACCIONES OXIDATIVAS

FUERZAS CONDUCTORAS EN LA EVOLUCIN DEL P450

Multicelularidad Sntesis de molculas transductoras de seales y de homeostasis (hormonas, vitaminas, eicosanoides...). Complejidad bioqumica creciente de las especies. Guerra qumica entre animales y plantas Sntesis de toxinas y enzimas destoxificadoras. Sntesis de pigmentos de las flores.

EVOLUCIN DEL P450

Aparicin de las primeras isoformas en procariotas hace 1400 millones de aos.

Perodo evolutivo unitario: 2 4 millones de aos.

Aparicin de las isoformas metabolizadoras de colesterol y cidos grasos (CYP 11 y CYP 4) en los primeros eucariotas.

EVOLUCIN DEL P450

Aparicin hace 900 millones de aos de las isoformas de: biosntesis de esteroides (CYP 17; CYP 19 y CYP 21) biotransformadoras de xenobiticos (CYP 1; CYP 2 y CYP 3).

Expansin de la familia CYP 2 hace 400 millones de aos.

RBOL FILOGENTICO DEL P450

CISTENA (5O Ligando)

EVOLUCIN CONVERGENTE vs DIVERGENTE

convergente

divergente

La vida de la larva de Papilo polyxenes depende de CYP 6B1