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Rev Dent Chile Vol 96 N3

Revista Dental de Chile 2005; 96 (3): 26-29

Trabajo de Investigacin

Autores:
Dr. Christian Amerise1 Dra. Ana M. Delgado2 Dr. Hctor Meheris3 Dra. Mirta Santana4 Dr. Francisco V. Domnguez5 1. Odontlogo. Becario de Perfeccionamiento del Consejo de Investigacin de la Universidad Nacional de Tucumn (CIUNT) (1996-2001), Argentina. e-mail: jujuy1972@hotmail.com 2. Odontloga. Prof. Adjunta a Cargo de la Ctedra de Farmacologa y Teraputica y Odontologa Preventiva de la Fac. de Odontologa de la Universidad Nacional de Tucumn (FOUNT). 3. Odontlogo. Prof. Titular Ctedra de Histologa Normal Dentaria y Embriologa. FOUNT. Miembro de SAIO y IADR. 4. Doctora en Bioestadstica. Profesora Titular Ctedra de Bioestadstica. Fac. de Medicina, Universidad Nacional de Tucumn. 5. Doctor en Odontologa. Profesor Ctedra de Anatoma Patolgica. Fac. de Odontologa. Universidad del Salvador. Argentina.

Anlisis Cualitativo y Cuantitativo de las Laminillas del Esmalte Dentario Humano


Qualitative and Quantitative Analysis of the Human Dental Enamel Lamellae
Trabajo recibido el 16/05/2005. Aprobado para su publicacin el 26/07/2005.

Resumen

El objetivo del presente trabajo fue estudiar la localizacin, direccin, recorrido, frecuencia, distribucin y extensin de las Laminillas del Esmalte (LE) en premolares y molares humanos. En 29 unidades experimentales, se realizaron cortes longitudinales que fueron desgastados para Microscopa ptica y se descalcificaron suavemente para las tcnicas histoqumicas. Se encontraron LE en el 100% de los casos. De trayecto rectilneo, ondulado y/o dicotomizado del total de laminillas observadas, el Test de Friedman mostr que la distribucin fue significativamente mayor en las caras libres, luego en cspides y fosas (p<0,001). El Test de Wilcoxon determin que en las fosas oclusales las LE parten con mayor frecuencia desde las bases que de las paredes (p<0,001). En cuanto a su extensin, el 72,28% llegan hasta la conexin amelo dentinaria (CAD), el 26,91% hasta los 2/3 del esmalte y slo 3 LE (0,81%) llegan hasta dentina, siendo estas diferencias significativas (Test Friedman p<0,001). La mayor distribucin de LE correspondi a superficies libres, existiendo una elevada frecuencia de laminillas que llegan hasta la CAD. En las fosas oclusales las laminillas parten con mayor frecuencia desde su base. Palabras claves: Laminillas del esmalte, esmalte, histologa.

Summary
The aim of this study was to study location direction, course, distribution, frequency and extension of the enamel lamellae (EL) in human bicuspids and molars. 29 experimental teeth without fillings and caries were extracted for orthodontics and surgical reasons, Tooth sections were softly decalcified and subject to histochemical techniques to differentiate EL from cracks. PAS reaction and Alcian Blue pH 5,6 were found in the 100 % of the cases. Their course was rectilinear, wavy and/our dichotomized. From all LE observed the Fridman test for multiple comparisons showed more distribution in buccolingual surfaces than is cusps and pits. The median was 6; 3,5 and 1,5 respectively (p < 0,001). The Wilcoxon test pared showed that in oclusal pits the EL started more frequently from the base to the wall of the pit (p < 0,001). Extension ended 72,28 % in the dentine enamel junctions . 26,91 % reached 2/3 of the enamel and only 3 LE (0,81 %) reached the dentin (T. Fridman p<0,001). The highest distribution of EL was found in buccolingual surfaces. There is a high frequency of lamella that reached dentine enamel junctions. Lamellae starts more frequently from the base of occlusal pits Key words: Enamel lamellae, enamel, and histology.

Introduccin
La estructura histolgica del tejido adamantino est constituida por la denominada unidad estructural bsica: el prisma del esmalte, y por unidades estructurales secundarias. Tales estructuras surgen como resultado del diferente grado de mineralizacin, formando las estras de Retzius, las laminillas o fisuras del esmalte y los penachos de Linderer. Bdecker (1906) describi un defecto en el desarrollo del esmalte, al que llam laminilla, y sostuvo que consistan en ha26

ces de sustancia orgnica extendida desde la superficie del esmalte hacia la Conexin Amelodentinaria (CAD). A Bdecker le siguieron otros investigadores y la mayora coinciden en que las laminillas del esmalte (LE) responden a matriz orgnica no calcificada, con un patrn de curso lineal a veces serpenteante y con ramificaciones (Gottlieb B, 1944; Hodson JJ, 1953; Zersosi C, 1982). Gottlieb (1944) enunci que las laminillas

y penachos estn agrupadas ms densamente en la superficie interproximal que en otras superficies. Este descubrimiento es de gran importancia en el desarrollo de caries, ya que logr diferenciar las Laminillas del Esmalte verdaderas de las grietas o Pseudolaminillas. Diversos estudios pretenden definir el rol de las LE en la cariognesis, desde los primeros trabajos de Bdecker, hasta el ltimo trabajo publicado sobre el tema, por B. Walker (1998),

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planteando as una verdadera discusin. La susceptibilidad a caries en fosas y fisuras se debe en parte a su morfologa (naturaleza fsica) (Awazawa Y,

1969; Kning K, 1963; Juhl M, 1983) y a su conexin con las laminillas que son consideradas un camino para la caries (Ando 1981).

El objetivo de este trabajo fue estudiar la localizacin, distribucin y frecuencia de las LE en premolares y molares humanos permanentes.

Material y Mtodo
Se utilizaron 29 unidades experimentales, piezas dentarias humanas, sin obturaciones ni evidencias macroscpicas de caries, extrados por razones ortodncicas y quirrgicas, y fijadas en formol bufferado al 10%. Preparacin de los cortes Las piezas fueron cortadas, con refrigeracin asistida, longitudinalmente en sentido vestbulo palatino y paralelos al eje axial del diente, con disco de acero delgado de 0,004 pulgadas de espesor y 0,75 pulgadas de dimetro, montadas en un mandril en micromotor. Individualizados los cortes, el mtodo de desgaste fue realizado de acuerdo a la tcnica de Frost para microscopa ptica. Identificacin de las laminillas Con el objeto de diferenciar a las LE de grietas o pseudolaminillas, se procedi de la siguiente manera:
1) Los cortes fueron sometidos a una suave descalcificacin con cido ortofosfrico al 37% durante 40 segundos. 2) Lavados con abundante agua corriente. 3) Se realizaron tcnicas histoqumicas de reaccin de PAS, azul de toluidina, Alcian Blue PH 2, 5. Estas tcnicas se realizaron por separado o combinadas.

fiesto por la reaccin de PAS (Bhaskar S, 1983), ratificando una LE, mientras que a la pseudolaminilla se la encontraba vaca. Anlisis de los especmenes Para determinar la presencia, direccin y recorrido de las LE, se realiz el anlisis de los especmenes con aumentos de 4, 10 y 40 X, mediante un microscopio binocular Olympus. Para establecer la frecuencia en la distribucin de las LE, se realiz una divisin esquemtica de los preparados en 5 zonas (Figura 1). Los datos obtenidos fueron procesados y analizados por diversas pruebas estadsticas, considerando como niveles de significacin una probabilidad (p) menor o igual a 0.001.

El diagnstico diferencial se evidenci por la presencia de sustancia orgnica en la hendidura, puesta de mani-

Resultados
El anlisis topogrfico de los cortes evidenci LE en todos los casos. La microscopa de luz transmitida revel que su trayecto fue rectilneo, serpenteante y/o dicotomizado. La PAS, positividad de las LE, fue de intensidad variable. El Azul de Toluidina evidenci una metacromasia de tipo B, principalmente en las laminillas de la zona cuspdea, permitiendo adems, observar las ramificaciones de la misma que altera la unin entre los prismas (Foto 1). Se observaron 368 LE, y se encontr diferencias significativas entre la distribucin de las mismas, mediante el test de comparacin mltiples basado en los rangos de Friedman, siendo la distribucin significativamente mayor en las caras libres (Foto 2), seguida de la zona de cspides y por ltimo en las fosas (p<0,001) (Figura 1). El Test de Wilcoxon para muestras pareadas determin que en las fosas oclusales las LE parten con mayor frecuencia desde las bases (Foto 3) que de las paredes de la fosa (p< 0,001) (Figura 2).

Figura 1. Divisin de los cortes en 5 zonas. Zona 1 y 2: Superficies libres. Zona 3 y 4: Cspides. Zona 5: Fosa. Foto 1. Metacromasia de tipo ! en las laminillas de la zona cuspdea. Premolar superior. 4 X. Foto 2. Laminillas del esmalte en superficie libre (Alcian blue pH 2,5) (4 X). Figura 1 Foto 1 Foto 2

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Christian Amerise y cols.

El anlisis de la extensin del total de LE observadas determin que el mayor porcentaje de laminillas, llegan hasta la conexin

amelo dentinaria (72,28%) (Foto 4), mientras que el 26,91% llega hasta los 2/3 del esmalte y solo 3 LE (0,81%), llegan hasta

la dentina. El test de. Friedman mostr que estas diferencias fueron significativas con p< 0,001) (Figura 3).

Figura 2

Figura 3

Figura 4

LE1 LE LE2 CAD


Foto 3 Foto 4

Figura 2. Distribucin del nmero de laminillas del esmalte segn zona. Figura 3. Distribucin del origen de las laminillas del esmalte en las fosas oclusales. Figura 4. Distribucin del nmero de laminillas del esmalte segn su extensin. Foto 3. Se observan dos LE que parten desde el fondo de la fosa (Azul de Toluidina. 40X). Foto 4. Laminilla del esmalte que llega hasta la CAD (AB pH 2,5 - PAS).

Discusin
Si bien existen diversos estudios referidos a las LE, desde Bdecker en 1906 hasta el de Walcker et al. en 1998, la mayora de ellos se enfocan en la naturaleza histolgica de estas estructuras. Como consecuencia, se ha reportado un nmero de diferentes patrones de morfologas y distribucin. Orban (1962) refiri que a pesar de que la matriz del esmalte es esencialmente no reactiva al mtodo PAS, las LE se colorean intensamente en cortes por desgaste. En las LE observadas en este trabajo, esa PAS positividad fue de intensidad moderada, debido a que su contenido orgnico se encuentra parcialmente mineralizado, evidenciando glcidos principalmente neutros, pero al combinarla con AB PH 2,5, se pudo evidenciar los grupos cidos (Foto 1).
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En relacin a la distribucin de las LE, Gottlieb (1944) enunci que tanto las Laminillas como los penachos adamantinos estn ms densamente agrupados en las superficies interproximales, que en otras. Adems, la mayora de las investigaciones realizadas en este sentido se hacen sobre las superficies coronarias, es as que Gottlieb (1947) y Hodson (1953) las encontraron densamente distribuidas en el tercio cervical y en algunos casos cervicoclusal. Uribe Echeverra y Fonseca (1987) evidenciaron topogrficamente a los microdefectos en el 1/3 gingival y _ de la cara vestibular; 1/3 gingival de la cara palatina y ademas en 1/3 gingival y _ de las proximales, en premolares y 3eros molares. Orban, postul tres tipos de LE: A, com-

puestas de prismas levemente calcificados, B, de clulas degenerativas y C, las ms comunes, compuestas por mucoprotenas y clulas de la cavidad oral, debido a que eran laminilllas poseruptivas. Las A estn confinadas al esmalte, mientras que las B y C pueden llegar hasta la Dentina. Otros autores (Gottlieb, 1942; Hyatt, 1931; Thoma, 1973; Manly, 1948 y Fish, 1932), tambin postularon que las Laminillas pueden llegar hasta dentina. De las 368 LE observadas en este estudio solo 3 llegaron hasta dentina y la mayor frecuencia en la extensin fue hasta la CAD (p<0,001) (Figura 3). Orban refiere que solo las laminillas formadas por tejido circundante que ha madurado en el interior de la hendidura durante la amelognesis, pueden llegar hasta dentina, mientras que las que tienen

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sustancia pobremente calcificada, pueden o no llegar solo hasta la CAD. Por otro lado, en el trabajo de Walcker, sobre 300 LE observadas, no evidenci ninguna hasta dentina, aduciendo que un defecto en el desarrollo del esmalte no continuara con una falla en el desarrollo de la dentina, la cual es formada por odontoblastos, sino que esta sera provocada por una causa local discreta y persistente. Con respecto a la extensin que presentan las laminillas que parten desde las fosas oclusales, se observ que sobre 49 LE, 37 llegan hasta la CAD. Tal hallazgo reforzara el concepto de las caries ocultas o hidden caries introducido por

Weerheijm (1992). Este concepto surge a partir de la disminucin de la incidencia de caries en alguna rea geogrficas. Las caries ocultas son aquella caries no detectables clnicamente, que se ubican por debajo de superficies dentarias intactas que tienen una entrada prominente. Tambin reciben el nombre de Sndrome de Fluoracin o Bombardeo de Flor (Lewin D, 1985; Ball I, 1986), y representan actualmente una elevada proporcin de la experiencia total de caries (Creanor, 1990; Kidd E, 1992). Weerheijm et al. encontraron en un grupo de 16 a 18 aos de edad, que el 15% de los primeros y segundos molares diag-

nosticados como sanos clnicamente, mostraban radiolucidez en la radiografa bitewing, y estas lesiones ocultas se producan en nios con CPO bajo. Adems se aislaron de este tipo de lesiones Sp. Mutans y Lactobacilos de dentina blanda y con leve cambio de coloracin, categorizndola as como lesin activa de caries. Por otro lado, existen los hallazgos de Hardwick y Manly que afirmaron que en un diente libre de caries clnicamente puede producirse una lesin en dentina por microorganismos que invaden y pasan a travs de las laminillas.

Conclusin
En este estudio la mayor distribucin de LE correspondi a las superficies libres. Existiendo una elevada frecuencia de laminillas que llegan hasta la CAD. Se evidenci que en las fosas oclusales las LE parten con mayor frecuencia desde su base.

Referencias Bibliogrficas
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