Biološka ekvivalenca

Definicije
EMEA: Note for guidance on the investigation of bioavailability and bioequivalence
bioequivalence

• Biološka uporabnost
Biovailability means the rate and extent to which the active ingredient
or active moiety is absorbed from a drug product and becomes
available at the site of action.
• Bioekvivalenca
Absence of significant difference in the rate and extent to which the
active ingredient or active moiety in pharmaceutical equivalents or
pharmaceutical alternatives becomes available at the site of drugdrug
action when administered at the same molar dose under similar
study.
conditions in an appropriately designed study.
• Terapevtska ekvivalenca
A medicinal product is therapeutically equivalent with another product
product
if it contains the same active substance or therapeutic moiety and,
and,
clinically, shows the same efficacy and safety as that product, whose
efficacy and safety has been established.

1
Terapevtska ekvivalenca
• EMEA
– A medicinal product is therapeutically equivalent
with another product if it contains the same active
substance or therapeutic moiety and, clinically,
shows the same efficacy and safety as that product,
whose efficacy and safety has been established.

Dokaz bioekvivalence
• Farmakokinetična raziskava
• Farmakodinamična raziskava
• Klinična raziskava
• In Vitro raziskava

2
 Generično zdravilo

Farmacevtska ekvivalenca + Biološka ekvivalenca = Terapevtska ekvivalenca

Enaka učinkovina Enaka biološka Enaka učinkovitost

Enaka jakost uporabnost in varnost
Enak način aplikacije/ Medsebojna
farmacevtska oblika zamenljivost
Primerljivo navodilo

Vloga raziskav biološke ekvivalence

• Nadomesti klinične raziskave učinkovitosti

in varnosti – pridobitev dovoljenja za
promet generičnega zdravila
• Potrditev enake učinkovitosti in varnosti po
spremembi zdravila (SUPAC)

3
Testno in referenčno zdravilo
Referenčno zdravilo
Klinično dokazana učinkovitost in varnost

Protokol
raziskave bioekvivalence
BIOEQUIVALENCE STUDY PROTOCOL
I. Title V. Clinical procedures
A. Principle investigator (study director) A. Dosage and drug administration
B. Project/protocol number and date B. Biological sampling schedule and
II. Study objective handling procedures
III. Study design C. Activity of subjects
A. Design VI. Ethical considerations
B. Drug products A. Basic principles
1. Test product(s) B. Institutional review board
2. Reference product C. Informed consent
C. Dosage regimen D. Indications for subject withdrawal
D. Sample collection schedule E. Adverse reactions and emergency
E. Housing/confinement procedures
F. Fasting/meals schedule VII. Facilities
G. Analytical methods VIII. Data analysis
IV. Study population A. Analytical validation procedure
A. Subjects B. Statistical treatment of data
B. Subject selection IX. Drug accountability
1. Medical history X. Appendix
2. Physical examination
3. Laboratory tests
C. Inclusion/exclusion criteria
1. Inclusion criteria
2. Exclusion criteria
D. Restrictions/prohibitions

4
Načrt raziskave
• Vrsta raziskave
• eno ali več
več testnih zdravil
• en odmerek ali več
več - stacionarno stanje
• na teš
tešče ali s hrano
• Eksperimentalni načrt
• Vzporedni (parallel) ali navzkriž
navzkrižni (crossover)
• Ponovljena navzkriž
navzkrižna raziskava

Vzporedni in navzkrižni
eksperimentalni načrt

RANDOMIZACIJA Testno
Skupina 1 zdravilo
Testne osebe
Skupina 2 Referenčno
zdravilo

Perioda 1 Perioda 2

RANDOMIZACIJA Testno Referenčno

Sekvenca 1 zdravilo zdravilo
Testne osebe
Sekvenca 2 Referenčno Testno
zdravilo zdravilo

5
Navzkrižni eksperimentalni načrt
• Vsak osebek dobi testno in referenčno
zdravilo
• Vsak osebek je sam sebi kontrola -
odstranimo vpliv interindividualne
variabilnosti
• Najboljša ocena za razliko v biološki
uporabosti

Ponovljeni navzkrižni
eksperimentalni načrt
Perioda Perioda
Sekvenca Sekvenca
I II I II III
1 T T 1 T R R
2 R R 2 R T T
3 T R
4 R T

Perioda
Sekvenca
I II III IV
1 T T R R
2 R R T T
3 T R R T
4 R T T R

6
 Farmakokinetična raziskava
• Zdravi prostovoljci
• Navzkrižni (crossover) eksperimentalni
načrt
• Doba izpiranja (vsaj 5 t1/2)
• 12 – 18 vzorcev krvi (vsaj 3 t1/2)
• Analiza vzorcev (validirana metoda)
• Farmakokinetična analiza (določitev
parametrov biološke uporabnosti)

2.0 2.0
T T
R R
1.8 1.8

1.6 1.6

1.4 1.4
Plazemska koncentracija

Plazemska koncentracija

1.2 1.2

1.0 1.0

0.8 0.8

0.6 0.6

0.4 0.4

0.2 0.2

0.0 0.0
0 1 2 3 4 6 8 12 16 24 0 1 2 3 4 6 8 12 16 24
Èas Èas

7
 2.0 2.0
T T
R R
1.8 1.8

1.6 1.6

1.4 1.4
Plazemska koncentracija

Plazemska koncentracija
1.2 1.2

1.0 1.0

0.8 0.8

0.6 0.6

0.4 0.4

0.2 0.2

0.0 0.0
0 1 2 3 4 6 8 12 16 24 0 1 2 3 4 6 8 12 16 24
Èas Èas

Pilotna raziskava
• Manjše število subjektov
• Preverjanje ustreznosti analizne metode
• Ocena variabilnosti – velikost vzorca
• Optimizacija časov odvzema vzorcev

8
Pristop dokazovanja bioekvivalence

• Bioekvivalenčni kriterij
• Logaritemska transformacija
• statistično sklepanje - Interval zaupanja
(90 %) za razmerje parametrov BU
• Limita bioekvivalence

Logaritemska transformacija

9
Vzroki log transformacije
• FK parametri so običajno porazdeljeni log-
normalno
• FK parametre običajno opisuje
multiplikativni model: produkt pretvorimo v
vsoto
• Test za razmerje parametrov T in R
pretvorimo v test razlike med T in R

Statistično sklepanje

10
 ΘL = 80% ΘU = 125%
T/R (%)
T/R = 80 % R/T = 80 %

Variabilnost FK parametrov
Vplivi:
• Oseba
• Sekvenca
• Perioda
• Zdravilo
• Preneseni učinek

11
Statistični model
Yijk = μ + Gk + Sik + Pj + F( j ,k ) + C( j −1,k ) + eijk
Yijk farmakokinetični parameter pri osebku i, v sekvenci k in
periodi j
μ celokupna aritmetična sredina
Gk vpliv sekvence k (k=1,…,g) ΣGj = 0
Sik vpliv osebka i v sekvenci k (k=1,…,g) - interindividualna
variabilnost: N(0,σs2)
Pj vpliv periode j (j=1,…,p) ΣPj = 0
F(j,k) vpliv zdravila v periodi j in sekvenci k ΣF(j,k) = 0
C(j-1,k) vpliv “carryover” učinka prvega reda za zdravilo v sekvenci
k s periodo j-1 C(0,k) = 0 in ΣC(j-1,k) = 0
eijk nepojasnjena varianca - intraindividualna variabilnost:
N(0,σt2) t = 1,…,l

ANOVA

12
 Perioda
Sekvenca
I II
1 (RT) μ11 = μ + P1 + FR μ21 = μ + P2 + FT + CR
2 (TR) μ12 = μ + P1 + FT μ22 = μ + P2 + FR + CT

( μ11 - μ21 )
-
( μ12 - μ22 )
2 (FR - FT) - (CR - CT)

Obrnjeni ničelna in alternativna

statistična hipoteza

• Dokaz enakosti

• Običajno gre v kliničnih raziskavah za dokaz

različnosti (npr. zdravilo – placebo)

13
 Dvojni Schuirmannov
enostranski t-test

H 01 : μln T − μln R ≤ ln 0.8 H a1 : μln T − μln R > ln 0.8

BUT ni značilno manjša kot BUR (α=0.05)

H 02 : μln T − μln R ≥ ln 1.25 H a 2 : μln T − μln R < ln 1.25

BUT ni značilno večja kot BUR (α=0.05)

Interval zaupanja
90 % interval zaupanja za razmerje aritmetičnih sredin:

σ e2 ⎛ 11⎞ σ e2 ⎛ 1 1 ⎞
(μln T − μln R ) − t0.90,n + n − 2 ⎜⎜ + ⎟⎟ < Δ < (μln T − μln R ) + t0.90 ,n1 + n2 − 2 ⎜ + ⎟
1 2
2 ⎝ n1 n2 ⎠ 2 ⎜⎝ n1 n2 ⎟⎠

Dvojni enostranski t-test (α=5%)

σ e2 ⎛ 1 1⎞
(μln T − μln R ) − t0.90,n + n − 2 ⎜ + ⎟ > ln 0.8
1 2
2 ⎜⎝ n1 n2 ⎟⎠

⎛ 1⎞
(μln T − μln R ) + t0.90,n + n − 2 σ e ⎜⎜ 1
2
+ ⎟ < ln 1.25
1 2
2 ⎝ n1 n2 ⎟⎠

14
 H 01 : μ ln T − μ ln R ≤ Θ L H 02 : μ ln T − μ ln R ≥ ΘU

H 01 : μ ln T − μ ln R ≤ Θ L H 02 : μ ln T − μ ln R ≥ ΘU

ΘL = 80% ΘU = 125%
T/R (%)
T/R = 80 % R/T = 80 %

Razvoj raziskav bioekvivalence

• Zač
Začetek 20. stoletja - prve raziskave biološ
biološke uporabnosti
• Bioekvivalenca
• 1970-
1970-1984 Drugs price competition and patent
term restoration act

• 1984-
1984-1992 Guidance on statistical procedures
for bioequivalence studies using a
standard two-
two-treatment crossover
design

• 1992-
1992- Koncept populacijske in individualne
bioekvivalence
(generič
generično predpisovanje,
predpisovanje, generič
generična
zamenljivost)
zamenljivost)

15
Populacijska in individualna bioekvivalenca
Generično predpisovanje in generična
zamenjava
0.025 0.025

0.02 0.02

0.015 0.015
Probability

Probability
0.01 0.01

0.005 0.005

0 0
0 50 100 150 200 250 0 50 100 150 200 250
AUC AUC

0.025

0.02

?
0.015
Probability

0.01

0.005

0
0 50 100 150 200 250
AUC

Primer
AUC ln(AUC)
Subjekt
Sekvenca Form. T Form. R Form. T Form. R
1 TR 290 210 5,670 5,347
2 RT 201 163 5,303 5,094
3 TR 187 116 5,231 4,754
4 TR 168 77 5,124 4,344
5 RT 200 220 5,298 5,394
6 RT 151 133 5,017 4,890
7 TR 294 140 5,684 4,942
8 RT 97 190 4,575 5,247
9 RT 228 168 5,429 5,124
10 TR 250 161 5,521 5,081
11 TR 293 240 5,680 5,481
12 RT 154 188 5,037 5,236
Mean 209,42 167,17 5,298 5,078
sd 63,34 46,31 0,331 0,315

16
 ANOVA

Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable: LNAUC

Type III Sum
Source of Squares df Mean Square F Sig.
SEQENCE 6.130E-02 1 6.130E-02 .46 .513
SUBJECT(SEQUENCE) 1.332 10 .133 2.96 .051
PERIOD .450 1 .450 10.02 .010
TREATMEN .290 1 .290 6.44 .029
Error .450 10 4.496E-02
Total 2.583 23

⎧ 0.0613 ⎫
preneseni učinek P ⎨ F1,10 > ⎬ = 0.513
⎩ 0.1332 ⎭

ANOVA
Tests of Between-Subjects Effects

Dependent Variable: LNAUC

Type III Sum
Source of Squares df Mean Square F Sig.
SEQENCE 6.130E-02 1 6.130E-02 .46 .513
SUBJECT(SEQUENCE) 1.332 10 .133 2.96 .051
PERIOD .450 1 .450 10.02 .010
TREATMEN .290 1 .290 6.44 .029
Error .450 10 4.496E-02
Total 2.583 23

T = 5.298
σe 2 ⎛ 1 1 ⎞
R = 5.078 (T − R ) ± t 0.90,10 ⎜⎜ + ⎟⎟
2 ⎝ n1 n 2 ⎠
interval zaupanja
σe 2 ⎛ 1 1 ⎞
(0.22 ) ± 1.81 ⎜ + ⎟ = (0.063,0.376) (1.065,1.457)
2 ⎝6 6⎠

17