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RAAO Vol. XLVIII / m. 1 - Enero - Agosto 2009

Traduccin

Revisin de la hiptesis de la matriz funcional. 2. Rol de una red de clulas seas conectadas
Melvin Moss, New York American Journal of Orthodontics and Dentofacial Orthopedics. Vol. 112 No 2, 221-226, 1997

El espacio intercelular permite a las clulas seas transmitir intercelularmente y subsecuentemente procesar informacin de la matriz funcional periostal, iniciando procesos intracelulares de mecanotransduccin. Adems el espacio intercelular, actuando como medio para la sinapsis elctrica, hace posible la organizacin del tejido seo como una red celular conectada, y el hecho de que todos los procesos de adaptacin sea sean multicelulares. Son definidas las caractersticas estructurales y operacionales de tal red biolgica y son descriptos los atributos especficos de las clulas seas. Especficamente el hueso es sintonizado en la misma frecuencia que la actividad del msculo esqueltico. La inclusin de los conceptos y bases de datos que estn relacionados por los mecanismos de las clulas seas intra e intercelularmente y los procesos de mecanotransduccin y la organizacin del hueso como una red biolgica celular conectada, permiten la revisin de la hiptesis de la matriz funcional (HMF) la cual ofrece una serie de explicaciones extendindose jerrquicamente desde los eventos epigenticos de la contraccin muscular a la regulacin del genoma de las clulas seas.

El primer artculo de esta serie consider las implicancias para la Hiptesis de la Matriz Funcional (FMH) de la capacidad de las clulas seas de llevar a cabo mecanosensacin y mecanotransduccin intracelular y comunicacin intercelular. En este artculo, se considerarn las implicancias para la FMH de la inclusin de la teora conexionista de redes. El hueso como una red celular interconectada (CC ) Todas las clulas seas, excepto los osteoclastos, estn profusamente interconectadas 87-91 por espacios de unin que forman una CCN.7,8,42 En estas uniones, la protena principal es la connexin 43.92 Cada osteocito, aislado por la matriz mineralizada, tiene muchos (n = 80) procesos citoplasmticos (canalicular), 15 m de longitud y organizado tridimensionalmente, que conectan con procesos similares de ms de 12 clulas vecinas. Estos procesos quedan dentro de canales de la matriz sea mineralizada (canaliculi). El pequeo espacio entre la membrana plasmtica del proceso celular y la pared canalicular es ocupada por complejos macromoleculares. Los espacios de unin se hallan donde la membrana plasmtica de un par de procesos canaliculares se renen marcdamente sobrepuestos.93 En el hueso compacto los canalculos atraviesan lneas de cemento, y forman extensas comunicaciones entre regiones seas e intersticiales.94 Los espacios de unin tambin conectan osteocitos superficiales a osteoblastos periostales y endostales.
* Presentado para su publicacin el 30/07/09

Todos los osteoblastos estn en forma similar conectados lateralmente. Verticalmente, los espacios de unin conectan osteoblastos periostales con clulas preosteoblsticas, y stas, a su vez, estn igualmente interconectadas.95 Efectivamente, cada CCN es un verdadero sincicio.87, 91, 93 Las clulas seas son elctricamente activas.57, 58, 85, 95-101 En un sentido real el tejido seo est fuertemente interconectado.7, 8, 96 Adems de permitir la transmisin intercelular de iones y molculas pequeas, los espacios de unin exhiben tanto coloracin por transmisin elctrica como por fluorescencia.63 Los espacios de unin son sinpsis elctricas, a diferencia de las sinpsis interneuronales qumicas y significativamente ellas permiten trfico bidireccional de seales, por Ej. bioqumicas, inicas. Clulas seas activadas mecanotrans-ductivamente, por Ej. osteocitos, pueden iniciar potenciales de accin de membrana capaces de transmitir a travs de los espacios de interconexin. Se sugiere aqu la primaca de seales inicas ms que mensajeros secundarios porque, aunque la transduccin de clulas seas puede tambin producirse por pequeas molculas bioqumicas que pueden pasar a travs de los espacios de unin, el tiempo acotado de procesos mecanosensoriales se cree que son demasiado rpidos como para involucrar a mensajeros secundarios.25,32 (Ver Carvalho et al. 102 para una visin opuesta). Una CCN es operacionalmente anloga a una red neural artificial en la cual ocurre procesamiento de seales paralelas o paralelamente distribuidas.103-105 Este procesa en forma computarizada, en un modo de red de multiproce-

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samiento, las seales intercelulares creadas por un tipo elctrico de mecanotransduccin de estmulos de la matriz funcional del periostio. Subsecuentemente las seales de informacin producidas por la red computada se mueve jerrquicamente hacia arriba para regular la adaptacin de la unidad esqueletal a las respuestas de los osteoblastos. Afortunadamente, las bases de la teora del conexionismo son suficientemente seguras para permitir la modelacin de una red celular interconectada biolgicamente.106-110 Consta de un nmero relativamente simple, elementos de procesamiento densamente inter-conectados (clulas seas), con muchas ms interconexiones que clulas. Es til que las clulas seas formen una red porque los receptores individuales no pueden codificar inequvocamente, slo una poblacin de clulas puede hacer esto.103 En la teora de la red, estas clulas estn organizadas en estratos: una entrada inicial, una informacin de salida y uno o ms estratos intermedios o estratos ocultos. Es importante, que tal red no necesita ser numricamente compleja para ser operacionalmente compleja.111 Los procesos operacionales son idnticos, en principio, para todas las clulas seas en todas las capas. Indiferente al actual proceso fisiolgico acordado, cada clula en cualquier estrato puede simultneamente recibir varias entradas de carga (estmulos). Un peso es un atributo cuantitativo. En el estrato inicial, estos representan las cargas. A travs de cada clula independientemente, ...todas las entradas de carga son sumadas.112 Esta suma es luego comparada, dentro de la clula, contra un valor liminal o umbral. Si este valor es excedido, es generada una seal intracelular, es decir, ocurre exitosa mecanotransduccin. Esta seal es luego transmitida idnticamente a todos los estratos celulares ocultos (osteocitos adyacentes) a los cuales cada estrato inicial de clulas est conectado por uniones de conjuncin (y existen muchos estilos de conectividad). Luego, procesos similares de sumatoria de seales de carga, comparacin y transmisin ocurre en estos estratos intermedios hasta que el ltimo estrato de clulas sea alcanzado (osteoblastos). El potencial generado de estas clulas anatmicamente superficiales determinan el sitio, ritmo, direccin, magnitud y duracin de la respuesta especfica adaptativa, es decir, aposicin, reabsorcin y/o mantenimiento de cada cohorte de osteoblastos.113 La informacin no es almacenada discretamente en una red conectada celular, como lo es en el CPU de una simple computadora. Ms bien es distribuida a travs de toda o parte de la red, y varios tipos de informacin puede ser almacenada simultneamente. El estado instantneo de una Red Celular Interconectada (RCI) es una propiedad del estado de todas sus clulas y de todas sus conexiones. Acordadamente, la representacin informtica de la RCI es redundante, asegurando que la red no tenga fallas o

tenga errores tolerables, es decir, una o varias clulas inoperantes causan pequea o no registrable prdida en la operacin de la red,112 una cuestin de til significado clnico. Las RCI muestran oscilacin, es decir, transmisin de seales iterativas recprocas entre estratos (retroalimentacin). Este atributo los habilita a un ajuste por auto-organizacin. Esta conducta est relacionada al hecho que las redes celulares interconectadas biolgicas no estn preprogramadas; ms bien ellas aprenden por entrenamiento no supervisado o epigentico,114 un proceso probablemente relacionado a cambios estructurales o conformacionales en el citoesqueleto.83 El fenmeno de entrenamiento de la red y aprendizaje est relacionado a los sugeridos efectos de la naturaleza oscilatoria de su historia de tensin.115 Acordadamente, los atributos estructuralmente ms complejos de la red y la conducta de una RCI se autoorganizan gradual o epigenticamente y emerge durante la operacin. Estos atributos de la red no son simplificables, es decir, ellos ni estn claros ni son predecibles desde un conocimiento previo de los atributos de las clulas individuales. Los espacios de unin, permitiendo el flujo bidireccional de la informacin, son las bases citolgicas para la conducta oscilatoria de la RCI. Todos los osteoblastos de la cohorte comprometidos en un proceso idntico de adaptacin estn interconectados por uniones de conjuncin abiertas. La presencia de repentinas discontinuidades histolgicas entre cohortes de osteoblastos fenotpicamente diferentes est relacionada a su habilidad para cerrar uniones en los lmites entre tales cohortes, y as prevenir el flujo de la informacin.116,117 La red de informacin tambin puede transmitir seales inhibitorias, una cuestin significativa ms all de las presentes cuestiones.118 Una RCI esqueletal muestra los siguientes atributos: 1) Evolutivamente, es un sistema auto-organizado no entrenado, regulado por auto-adaptacin y epigenticamente. 2) Operacionalmente, es un sistema dinmico, estable, que exhibe una conducta oscilatoria permitiendo retroalimentacin. Opera en un entorno ruidoso, no estacionario y probablemente usa tiles y necesarias entradas inhibitorias. 3) Estructuralmente, una RCI sea no es modular, es decir, las variaciones en su organizacin permiten discreto procesamiento de seales diferentes. Este atributo es el que permite la triada de respuesta histolgica a un evento unitario de carga. En este artculo existen ciertas simplificaciones, como en mucha de la literatura sobre el hueso. Se asume que las clulas seas estn organizadas en slo dos dimensiones, las cargas seas ocurren slo en un sitio discreto y los gradientes de las tensiones no son considerados. Sin embargo, la realidad biolgica es distinta. En un volumen de

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hueso tridimensionalmente cargado gradientes de deformacin deben existir y cada osteocito probablemente siente nicamente diferentes propiedades de tensin. Ms aun, es probable que cada osteocito est potencialmente capacitado para transmitir tres seales adaptacionales diferentes, en tres direcciones diferentes algunas estimulatorias y otras inhibitorias. Sin embargo, estos procesos no han sido aun adecuadamente modelados. El rol de las matrices periostales: la nueva visin. La primaca morfogentica de las matrices funcionales periostales sobre sus unidades esqueletales es aceptada consensuadamente. Como se altera una demanda muscular, por ej miotoma, neurectoma, ejercicio, hipertrofia, hiperplasia, atrofia, aumento o reposicionamiento, la triada de procesos activos de crecimiento seo adapta como corresponde la forma de la unidad esqueletal especficamente relacionada. De inmediato, excluyendo la estimulacin de los aferentes neurales en el msculo, tendn y periostio, cargas fsicas extrnsecas tienden a deformar el tejido seo y apela a los procesos adaptativos de respuesta de la unidad esqueletal (hueso). Un ejemplo clsico es la regulacin de la forma del proceso coronoideo por el msculo temporal.119 La tensin en el tendn de este msculo contrado transmitida a travs de entrelazadas fibras periostales insertadas en el hueso subyacente, deforma la unidad esqueletal traccionada.120 Aunque algunos osteoblastos periostales pueden ser directamente estimulados,121 datos existentes sugieren la primaca osteoctica en los procesos mecano-sensoriales.122 Anatmicamente, las clulas seas son mecanorreceptores competentes. Sus series tridimensionales de amplios procesos celulares canaliculares son arquitectnicamente apropiados para percibir la deformacin de la matriz mineralizada.123 Aunque ningn parmetro mecnico confiable predice todas las respuestas adaptacionales o de remodelacin del hueso,124 la tensin probablemente juega el rol principal 125-128 y es un estmulo competente.51 El atributo tensin puede variar con condiciones especficas.129 Estas incluyen: a) categora sea respondiendo mejor a la carga dinmica de preferencia a la esttica,54 b) frecuencia con que el osteocito puede ser fisiolgicamente armonizado con las frecuencias de la funcin muscular,130-132 con sintona anloga a aquellas clulas sensoras especializadas no seas, 34,35 por ej. clulas pilosas auditivas; y c) magnitud relativa a pequeas microtensiones (e) (sobre 10-6 mm/mm) y magnitud de tensin de 2000 1000 e son morfolgicamente competentes.55,56,129,133 Aunque razonablemente se presume que los procesos mecanosensoriales, tanto de tipo inico como mecnico, involucra los procesos de la membrana plasmtica del

cuerpo del osteocito o de los procesos canaliculares, la recepcin y la posterior transduccin, no son procesos ni bien entendidos ni existe un acuerdo consensuado. La contraccin del msculo esqueletal es un evento tpico de carga a la matriz funcional periostal,13,14,16,120,134, 135 y la frecuencia es uno de los parmetros crticos. Aunque la frecuencia fundamental de contraccin del msculo est sobre los 2 Hz, existen otras tensiones en frecuencia armnica de 15 a 40 Hz. Estas frecuencias de alto orden, significativamente relacionadas a respuestas adaptativas seas estn ...presentes dentro del espectro de energa tensional (contraccin muscular) sin considerar el animal o actividad e implica la dinmica de la contraccin muscular como la fuente de esta banda de energa (en itlica opinin del autor).68, 132,136 El significado particular de la HMF es la ntima similitud de las frecuencias del estmulo del msculo a la frecuencia del estmulo de respuesta del tejido seo. MECA OTRA SDUCCI : U A S TESIS TE TATIVA Los datos mencionados previamente sugieren que la habilidad de las matrices funcionales periostales para regular la respuesta adaptativa de sus unidades esqueletales por procesos mecanotransducctivos inicos est relacionada a varios factores. Estos son que (a) la funcin muscular normal insertada al tejido seo tensiona intermitentemente; (b) la dinmica de la contraccin muscular se adecua bastante bien con los requerimientos energtico para la sensibilizacin de la clula sea; (c) El rango de los armnicos especficos tensin-frecuencia de la dinmica muscular son tambin aquellos detectados como competentes desde el punto de vista morfogentico (es decir, osteorreguladores); (d) la actividad normal del msculo esqueletal produce campos elctricos intraseos en el orden de los campos extrnsecos encontrados ser morfogenticamente similares; y (e) las clulas seas pueden ser estimuladas directamente por dos mecanismos por tensin que activa la membrana plasmtica y canales e indirectamente por fenmenos electroquinticos. Estos factores sugieren enfticamente ms bien una precisa conjuncin de caractersticas operacionales significativas entre una contraccin al estmulo del msculo esqueletal y la habilidad de la clulas seas cargadas para transducir esto en seales capaces de la regulacin de sus respuestas adaptativas. En una frase, el hueso parece estar cercanamente en consonancia con el msculo esqueletal, es decir, las unidades esqueletales estn en consonancia con sus matrices peristicas funcionales. Cuando ambos, tanto los procesos transductivos inicos y mecnicos (palanca molecular) estn conceptual y opera-

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cionalmente combinados con los datos de los efectos de los campos elctricos y la frecuencia energtica de la contraccin, ellos proveen una base biofsica lgica de soporte suficiente para la hiptesis de la regulacin epigentica de adaptacin del tejido seo.1,13,16-18,38,129,137 En realidad, es probable que los procesos transductivos inicos (elctricos) y mecnicos (palanca molecular) en los osteocitos no son exhaustivos ni mutuamente excluyentes. Mientras usando mecanismos o procesos intemedios de membrana diferentes, ellos comparten una senda comn y un final comn, es decir, ellos eventualmente producen seales regulatorias de la actividad osteoblstica. Ciertamente en los procesos inicos y posiblemente en el mecanismo del sistema de palanca molecular, los procesos transductivos tambin causan un flujo inico a travs de la membrana, creando una seal capaz de transmisin intercelular a clulas seas vecinas a travs de uniones de conjuncin123 y luego subsecuente computacin biolgica en una red celular conectada sea.

CO CLUSI Mientras que la versin original de la HMF ofreci slo descripciones verbales de la funcin de la matriz del periostio y de la respuesta de la unidad esqueletal, la incorporacin a la HMF de los conceptos de mecanotransduccin y de biologa sea computarizada ofrece una cadena explicativa que va desde el hecho epigentico de la contraccin muscular esqueletal, en forma descendente siguiendo las jerarquas., a travs de los niveles celulares y moleculares, hasta el genoma de la clula sea, y luego nuevamente en forma ascendente, a travs de los niveles histolgicos hasta el hecho de los cambios adaptativos de la forma del hueso. El anlisis de los cambios de tamao y forma mediante mtodos de elementos finitos recurriendo a referencia-marco-variacin, produce una descripcin ms comprehensiva e integrada de la totalidad de los procesos de regulacin epigentica de la forma del hueso que la que poda lograrse anteriormente.