La Viande de Culture Ou La Viande Sans Animaux, Réalité Ou Fiction?

La viande de culture ou la viande sans animaux, ralit ou fiction ?
Jean-Franois Hocquette, Isabelle Cassar-Malek, Brigitte Picard, Dominique Bauchart INRA, Unit de Recherches sur les Herbivores
ALIMENTATION AGRICULTURE ENVIRONNEMENT
Comment aborder ce sujet ?

1. Les enjeux et pourquoi cette question ? 2. Ltat de lart 3. Les verrous techniques qui restent lever 4. Les questions conomiques, environnementales et sociales 5. Conclusion
Contexte et Enjeux mondiaux

Ncessit de nourrir une population humaine croissante (pays en voie de dveloppement). Accroissement dmographique (6 9 Milliards en 2050) Rpondre aux dfis associs au changement climatique (la temprature va augmenter de 2 4C dici 2050). Rduire les rejets (azote, mthane, etc). Adaptation des espces (robustesse des animaux dlevage) Ncessit de rpondre aux attentes socitales (pays dvelopps vs pays en voie de dveloppement). Bien-tre animal, protection de lenvironnement (biodiversit des prairies), gestion des paysages, etc.
La population mondiale va augmenter de 6 9 Milliards (jusquen 2050)
ALIMENTATION
www.bbc.co.uk, 2009.
AGRICULTURE ENVIRONNEMENT
Projections de la consommation de viande dans les pays dvelopps et en dveloppement (kg/personne/an)
Source: World Agriculture: Towards 2030/2050 (adapted from Garnett 2009)

Production de gaz effet de serre (kg CO2e/kg produit) par les animaux dlevage
Viande bovine Viande ovine Viande porcine Volaille Lait

ALIMENTATION
12.98 17.4 6.35 4.57 1.32

Foster et al (2006)
Source : N Scollan
Les gaz effet de serre associs la production daliments pour lhomme
missions de gaz effet de serre (en kg quivalent carbone) lis la production d'un kg de nourriture. Source : Jancovici, 2000
ALIMENTATION
http://www.manicore.com/documentation/articles/annales_mines.html
ENVIRONNEMENT
AGRICULTURE
levage et GES selon les pays
Pays en voie de dveloppement
Pays dvelopps
Pitesky, Stackhouse, and Mitloehner, 2009. Advances in Agronomy, Volume 103

Production de C02 par les animaux dlevage ?
La vache qui pollue
http://hommelibre.blog.tdg.ch/media/01/00/766612908.jpg
ALIMENTATION
http://www.satoriz.fr/PHOTO/83_JPG/SAT83_pict_29_0001.jpg ENVIRONNEMENT
AGRICULTURE
Le steak ou la plante ? Il faut choisir
Les proccupations du consommateur

salmonelles salmonelles dans les oeufs dans les oeufs
Grippe Grippe Ers uEColi dans te lesColi dans a lesviandes viandes aviaire m aviaire som ux con ima n des s afivre Vache follece duit fivre Vache nfian ro folle aphteuse aphteuse o sp c le de ur rise po C
Viande rouge Viande rouge et cancer et cancer
ALIMENTATION
Source : N Scollan
Facteurs de risques des maladies non transmissibles

cancer cancer
Obsit Obsit
diabte diabte
Maladies Maladies cardiovasculaires cardiovasculaires
ALIMENTATION
Source : N Scollan

cancer cancer
Obsit Obsit
diabte diabte
Fumer
Source : N Scollan
Manque dexercice

cancer cancer
Obeist Obeist
diabte diabte
Fumer
Alimentation riche en MG Manque dexercice

Source : N Scollan
Composition en AG des produits de ruminants Apports Nutritionnels Conseills

AGMI 60% AGt AGPI 15% AGt AGS 25% AGt AGPI 6% AGt
AGMI 40-45 % AGt
VIANDE BOVINE
Source : D Bauchart
AGS 50% AGt
Les solutions ?
Manger moins de viande Produire de la viande en laboratoire ?
Une publication dans un journal scientifique srieux
The First In Vitro Meat workshop, June 15, 2007 First international symposium April 9-11, 2008
The symposium was held at the Norwegian Food Research Institute (Matforsk), Aas, Norway, hosted by the Norwegian University of Life Sciences (UMB) and the Norwegian Food Research Institute (Matforsk). http://invitromeat.org/
First international symposium April 9-11, 2008
Le Consortium
The original steering committee was expanded to include Jason Matheny (New Harvest & Johns Hopkins Univ., USA) and Henk Haagsman (University of Utrecht, Netherlands), in addition to Stig W. Omholt (Chairman, Norwegian University of Life Sciences, Norway), Willem van Eelen (Vitro Meat BV, Netherlands), Bernard Roelen (University of Utrecht, Netherlands), Gunnar Kleppe (Norwegian Bioindustry Association, Norway), and Jose Teixeira (University of Minho, Portugal).
Ce quon trouve aussi sur le site Register to become a Consortium member Do you want to make financial contributions to the mission?

Les progrs scientifiques sur les cultures de tissus
Moreno-Borchart A. Building organs piece by piece EMBO reports 2004, 9, 1025-1028
Number of publications related to tissue engineering over the last decade. PubMed was ALIMENT TION searched for publications containing the phrase tissue Aengineering. European numbers AGRICULTURE refer to papers published in the 15 countries of theN EU Nbefore the expansion E VIRO NEMENT
Un nouveau journal scientifique

Stem cell research has progressed to the clinic and has enormous potential for treating incurable diseases such as Parkinsons disease and Alzheimers disease, and potential for alleviating suffering in chronic conditions such as diabetes and osteoarthritis. Tuesday Mar 16, 2010
La formation du tissu musculaire

PROLIFERATION DIFFERENCIATION
Alignement Reconnaissance
Cellules musculaires
Chez le ftus Et en cas de rgnration musculaire
Fusion
Myotube
Acquisition des caractristiques adultes

AGRICULTURE
Fibre musculaire
ALIMENTATION ENVIRONNEMENT
Rgnration musculaire
ALIMENTATION
Source : G Carnac, CNRS
Protocole de mise en culture en conditions striles

Un morceau de muscle (post-natal) des explants des cellules qui se multiplient un tapis de cellules Incubation des Fin Sortie explants des cellules de la culture
Dissection
ALIMENTATION
Source : B Picard, I Cassar-Malek
Dissection
Aprs prlvement labattoir ou sur animal vivant (biopsie), le muscle est dcoup en petits morceaux dans une bote de Ptri recouverte de collagne avec un milieu nutritif contenant des additifs, des facteurs de croissance, des nutriments nergtiques, des acides amins, des hormones, etc.
DMEM/M-199 medium (3:1) with 10% fetal bovine serum (FBS), 10 g/ml insulin, 4 mM glutamine, 25 ng/ml fibroblast growth factor, and 10 ng/ml epidermal growth factor, Raymond et al. BMC Genomics 2010, 11:125
ALIMENTATION
Incubation des explants
Les botes de Ptri contenant les morceaux de muscles ou explants, sont mises dans un incubateur o sont contrls:
- la temprature ( 37C )
- lhygromtrie ( 90 % ) - le taux de CO2 ( 5 % )
ALIMENTATION
Sortie des cellules

Explant
Aprs une semaine, les cellules commencent prolifrer et sortent de lexplant.

ALIMENTATION
LES DIFFERENTES ETAPES DE LA VIE DE LA CELLULE - prolifration - confluence - diffrenciation

ALIMENTATION
LA PROLIFERATION
Cest la phase de multiplication des cellules.

LA CONFLUENCE
C est la phase o les cellules sont au contact les unes des autres.
LA DIFFERENCIATION
noyau
Myotude (prcurseur de cellule musculaire)
C est la phase o les cellules ont fusionn et sont en train dacqurir les caractristiques des fibres musculaires.
Culture primaire de myoblastes

Prolifration
J3 Giemsa
Diffrenciation
J6 J12
MyoD et Myf5
Myognine
Desmine
ALIMENTATION
Source : B Picard
Myoblastes ftaux de bovins culards et non culards en culture primaire Non culard
J2
Culard
J6
J8
Prolifration cellulaire suprieure Retard de fusion et de diffrenciation

ALIMENTATION
Source : B Picard
CULTURE DE CELLULES MUSCULAIRES
myotubes
fibres musculaires
ALIMENTATION
On se rapproche de ce qui se passe in vivo mais on ny est pas encore !
Prolifration cellulaire
Second tiers
Premier tiers de vie foetale
Diffrenciation musculaire
Source : B Picard
Troisime tiers
ALIMENTATION
AGRICULTURE
Adulte
ENVIRONNEMENT
Mais des cellules de fibres musculaires, ce nest pas du muscle !

Fibres musculaires
(nombre, taille, type)
Adipocytes
Capillaires sanguins Trame conjonctive

COULEUR FLAVEUR
ALIMENTATION
JUTOSITE Qualits nutritionnelles TENDRETE
Diffrentes populations cellulaires sont ncessaires pour faire du muscle

pre-myoblaste
Stem cells (cellules souches)

pre-adipocyte
Fibroblasts
myoblaste
Connective tissue Fibres

ADIPOCYTE
myotube
Adipocytes
ALIMENTATION ENVIRONNEMENT
AGRICULTURE
FIBRE
Isolation and cloning of porcine preadipocytes.

Crossbred fetuses 85 days gestation 0.1% collagenase digestion: 37C, 30 min Filtration through a stainless steel mesh (75m) Centrifuge: 1,100 rpm, 7 min Pellet fraction mince
Dissection of dorsal subcutaneous tissue

A B
C D
E F
G
2~4 weeks
Cloning by limited dilution (1 cell/well) 96-well plate
24-well plate
ALIMENTATION
clones
Source : Ikuyo Nakajima, Japon
Hormones et facteurs de croissance contrlent la prolifration de ces diffrentes cellules

pre-myoblaste
Mesenchymal Multipotent cells

pre-adipocyte
+ -
Myostatin
myoblaste
AntiMyostatin
myotube
Artaza et al., 2005. Endocrinology, 146, 3547-3557
ADIPOCYTE
FIBRE

Les questions rsoudre sur lesquelles travaillent les chercheurs

Choisir les bonnes cellules de dpart Bien dfinir les conditions de culture et coculture de ces diffrentes populations cellulaires Bien dfinir la matrice sur laquelle les cellules vont crotre Bien dfinir la composition du milieu de cultures (nutriments, hormones, etc)
Les questions techniques qui sont aussi rsoudre

Passer de cultures plates au fond dune bote du muscle en trois dimensions Reproduire linflux nerveux Reproduire la tension du muscle (fixation sur les os, contraction, relaxation) Reproduire la finesse de lirrigation sanguine (rseaux de capillaire, dbit, etc)
La vascularisation : un dfi majeur
Moreno-Borchart A. , Building organs piece by piece. EMBO reports 2004, 9, 1025-1028

Les questions rsoudre pour une production de muscle grande chelle

Produire des cellules souches en grande quantit Produire des hormones, des nutriments (acides amins, glucose, acide gras, etc) et des antibiotiques en grande quantit Avoir des incubateurs gants Tension, influx nerveux, dbit sanguin, etc Augmenter les rendements
Le principe de prcaution
Lorganisation des gnes peut changer en rponse des modifications de lenvironnement = modifications pigntiques Sans mutations gntiques
Mthylation = fixation de mthyl (CH3) sur C et G
Modifications des protines autour de lADN
Autres mcanismes trs peu connus
Rle probable dans le cancer

Est-ce que les conditions de culture du muscle induisent des modifications pigntiques ? Si oui, lesquelles ? Et avec quelles consquences sur le muscle ? Pour celui qui mange le muscle ?
Mais produire du muscle, ce nest pas produire de la viande

Duret Rigor mortis Maturation
Enzymes qui dgradent les protines : - Calpaines (plusieurs) et son inhibiteur calpastatine - protosomes (plusieurs) - cathepsines - autres ??? elles agissent squentiellement en fonction de lvolution du pH de la viande et de la temprature de refroidissement de la carcasse
Duret de base (collagne)

Abattage
Temps post-mortem
Reproduire la biochimie de la maturation de la viande nest pas ais

Maturation
Activit de la -calpane
Duret
Activit de la m-calpane
Temps post-mortem
ALIMENTATION
Review from Dransfield, 1995
Modlisation de lactivit des calpanes

Ca l pai ne CO MP LEX
Calpastatine
pH pH le v
INACTIVATION de la CALPASTATINE
faib le
Calpaine Calpaine ACTIVATION
INACTIVATION de la CALPAINE
Ca2+
Et les autres enzymes ?
Myofibrilles
ATTENDRISSAGE
ALIMENTATION
Dransfield et al., 1993 Meat Science, 34, 217-234
Il existe aussi un trs grande variabilit naturelle de ce phnomne

45
Rsistance des fibres musculaires Rsistance des fibres (N/cm2)
40 35 30 25 20 15 10 5 0 0 2 4 6 8
ALIMENTATION
musculaires (N/cm)
10
12
14
T emps p o s t - m o r t e m ( Jours )
Source : J Lepetit
La viande = un aliment vari et aux nombreuses proprits nutritionnelles

Comment matriser la composition en acides amins de la viande (bien quilibre naturellement in vivo) ? Comment matriser la composition en acides gras de la viande (cest dj difficile par lalimentation des bovins) ? Comment matriser la teneur en fer assimilable ?

The In Vitro Meat Consortium Preliminary Economics Study - March 2008

Protein : 185 Euro / tonne of media Glucose : 3 Euro / tonne of media Vitamins and minerals : 22 Euro / tonne of media Serum : 147 Euro / tonne of media It has been assumed that about 193 kg of in vitro meat can be made per tonne of media. It will be possible to produce in vitro meat in large quantities for less than Euro 3300 - 3500 / tonne. This compares with the production of chicken meat at about Euro 1800 / tonne
Dautres cots non calculs

Construction des laboratoires de production Production grande chelle dintrants (hormones, etc) Cots nergtiques associs Cots environnementaux associs (gaz effet de serre) Cot du travail (chercheurs, ingnieurs, techniciens de laboratoire, etc)
Quelques considrations de consommateurs

Le consommateur mange aussi pour se faire plaisir. Comment reproduire le got de la viande (arme dans la fraction lipidique) ? Le consommateur refuse le buf aux hormones mais mangerait de la viande in vitro produite avec des hormones ! Le consommateur refuse les OGM mais prendrait le risque de modifications pigntiques non matrises ! Etc
La qualit de la viande est diffrente entre races : Une bonne race viande, cest comme un bon vin !
CONCLUSIONS
La culture de cellule musculaire est une avance scientifique indniable et utile surtout comme cellule modle dans le domaine biomdical et pour la rparation de blessure chez lhomme, la reconstruction du sphincter etc Mais cela reste compltement utopique du point de vue scientifique, social, environnemental et conomique de produire de la viande in vitro

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Judul Asli

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Contexte et Enjeux mondiaux

La population mondiale va augmenter de 6 9 Milliards (jusquen 2050)

Projections de la consommation de viande dans les pays dvelopps et en dveloppement (kg/personne/an)

Source: World Agriculture: Towards 2030/2050 (adapted from Garnett 2009)

ALIMENTATION AGRICULTURE ENVIRONNEMENT

Viande bovine Viande ovine Viande porcine Volaille Lait

12.98 17.4 6.35 4.57 1.32

Les gaz effet de serre associs la production daliments pour lhomme

levage et GES selon les pays

Pays en voie de dveloppement

Pitesky, Stackhouse, and Mitloehner, 2009. Advances in Agronomy, Volume 103

Production de C02 par les animaux dlevage ?

ALIMENTATION AGRICULTURE ENVIRONNEMENT

La vache qui pollue

Le steak ou la plante ? Il faut choisir

ALIMENTATION AGRICULTURE ENVIRONNEMENT

Les proccupations du consommateur

Facteurs de risques des maladies non transmissibles

Facteurs de risques des maladies non transmissibles

Facteurs de risques des maladies non transmissibles

Alimentation riche en MG Manque dexercice

Composition en AG des produits de ruminants Apports Nutritionnels Conseills

AGMI 40-45 % AGt

AGS 50% AGt

ALIMENTATION AGRICULTURE ENVIRONNEMENT

Une publication dans un journal scientifique srieux

ALIMENTATION AGRICULTURE ENVIRONNEMENT

First international symposium April 9-11, 2008

ALIMENTATION AGRICULTURE ENVIRONNEMENT

ALIMENTATION AGRICULTURE ENVIRONNEMENT

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Un nouveau journal scientifique

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La formation du tissu musculaire

Chez le ftus Et en cas de rgnration musculaire

Acquisition des caractristiques adultes

Source : G Carnac, CNRS

Protocole de mise en culture en conditions striles

Source : B Picard, I Cassar-Malek

Source : B Picard, I Cassar-Malek

Incubation des explants

Source : B Picard, I Cassar-Malek

Sortie des cellules

Aprs une semaine, les cellules commencent prolifrer et sortent de lexplant.

Source : B Picard, I Cassar-Malek

LES DIFFERENTES ETAPES DE LA VIE DE LA CELLULE - prolifration - confluence - diffrenciation

Source : B Picard, I Cassar-Malek

Cest la phase de multiplication des cellules.

Culture primaire de myoblastes

Prolifration cellulaire suprieure Retard de fusion et de diffrenciation

CULTURE DE CELLULES MUSCULAIRES

Source : B Picard, I Cassar-Malek

On se rapproche de ce qui se passe in vivo mais on ny est pas encore !

Premier tiers de vie foetale

Mais des cellules de fibres musculaires, ce nest pas du muscle !

Capillaires sanguins Trame conjonctive

JUTOSITE Qualits nutritionnelles TENDRETE

Diffrentes populations cellulaires sont ncessaires pour faire du muscle

Stem cells (cellules souches)