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Procedimento operacional padro POP Elaborado em: 18 de novembro de 2011 Revisado em: 18 de novembro de 2011 Folha (s): 1/3

3 Referente a Elementos Anormais de Sedimentoscopia (EAS) Este POP descreve, padroniza, define e estabelece os requisitos necessrios para a realizao de Urinalise Exame de Urina pela necessidade de padronizao e controle de qualidades Especificao O exame de urina um pratico e preciso meio de avaliao da funo renal do organismo humano, sendo portanto, um elemento de diagnostico no estudo das patologias renais e afins, atravs da coleta da urina. Materiais e Equipamentos Laminas Lamnulas Recipientes contendo hipoclorito a 1% Luvas de Procedimento Pincel Gaze Estante para tubos Tubos de ensaio Tubos para centrifugao Centrifuga Microscpio Kits para analise devidamente registrados pelos rgos competentes e Ministrio da Sade

Recursos Humanos Tcnico de laboratrio Tcnico de Patologia Clinica Responsvel Bioqumico

Cuidados com a sade e segurana no trabalho Obrigatrio a utilizao de Equipamentos de Proteo Individual EPI:

Jaleco Luva de procedimento Mascara descartvel Gorro Sapato fechado

Procedimento e execuo Preparo da amostra Homogeneizar a urina e separar uma alquota. Caso a urina apresente turbidez devido a uratos, dissolve los por aquecimento. Transferir 10 ml da urina para tubo de ensaio cnico graduado e centrifug-lo, a 2000 r.p.m. por 5 minutos, evitar centrifugao demorada para no causar compactao dos elementos, nem deformao dos cilindros. Desprezar o sobrenadante de modo que o sedimento permanea com 1ml de volume final. Homogeneizar bem o sedimento de forma e passar uma gota na lamina de vidro. Espalhar o sedimento de forma uniforme e cobri-lo com uma lamnula de vidro evitando formao de bolhas. Levar ao microscpio e percorrer toda a lamina, com a objetiva de 10X e com condensador baixo. Verificar a distribuio dos elementos e a presena de cilindros, muco e tricomonas. Os cilindros costumam ficar nas bordas da lamnula. Passar para objetiva de 40X, aumentar a intensidade da luz no condensador, levantar um pouco o condensador e efetuar a contagem por campo microscpico, anotando a media. Procedimento: Deve obedecer a norma brasileira para exame de urina Contar os elementos figurados em campos microscpios e calcular a media e expressar os resultados vistos. As clulas epiteliais e cilindros devem ser observados com o aumento de 100X, e a mdia dos resultados expressas como raras, algumas, numerosas e macias Raras at 3 elementos por campo Algumas 4 a 10 por campo Numerosas acima de 10 por campo Macia valores nos quais o campo esta tomado por elementos figurados, impedindo a visualizao dos elementos.

Os leuccitos e as hemcias devem ser observadas com aumento na 100X e mdia dos resultados expressos como por campo microscpico. Por campo microscpico observar 10 campos, calcular a media e expressar o numero de elementos por campo microscpico.

Pira macia quando o campo estiver tomado por um dos elementos figurados, impedindo a visualizao dos outros elementos. Hematria macia quando o campo estiver tomado por um dos elementos figurados, impedindo a visualizao dos outros elementos. Por mililitro observar no mnimo 10 campos microscpicos, calcular a mdia e expressar o numero de elementos por mililitro, multiplicando pelo fator de 5040.

Outros elementos, como muco, leveduras, cristais, espermatozides e trichomonas seguir o mesmo critrio das clulas epiteliais. Para bactrias adotar para valores acima de 99 por campo a (400x) bacteriria aumentada; para valores moderados entre 11 a 99 por campo a (400x) bacteriria moderada; para valores de 1 a 10 por campo (400x) raras; ausente para valores se bacteriria. Descarte de Material O material no deve ser descartado na pia, deve-se obedecer ao descarte definido pelo PGRSS Plano de Gerenciamento de Resduos em Servio de Sade. O descarte dos EPIs em local apropriado, desligar, limpar e guardar equipamentos e matrias aps a concluso do procedimento. O local e trabalho deve estar sempre limpo durante e aps as atividade, com auxilio de desinfetantes e produtos para desinfeco da banca e vidrarias autoclavadas. Todo o material biolgico deve ser descartado em vaso sanitrio separado escrito descarte de material, e produtos como reagente e kits de urinalise devem ser descartados separadamente para posterior tratamento como incinerao. Controle de Revises Reviso Numero 01 Elaborado Bioqumico

Data 18/11/2011 Verificado Farmacutico Responsvel Aprovado Responsvel tcnico

Procedimento operacional padro POP Elaborado em: 18 de novembro de 2011 Revisado em: 18 de novembro de 2011 Folha (s): 1/5 REFERENTE A EXAMES PARASITOLGICOS Este POP descreve, padroniza, define e estabelece os requisitos necessrios para a realizao de Parasitolgico Exame de fezes pela necessidade de padronizao e controle de qualidades Especificao O exame de urina um pratico e preciso meio de avaliao da funo renal do organismo humano, sendo portanto, um elemento de diagnostico no estudo das patologias renais e afins, atravs da coleta do material. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS Laminas Lamnulas Recipientes contendo hipoclorito a 1% Luvas de Procedimento Pincel Gaze Estante para tubos Tubos de ensaio Tubos para centrifugao Centrifuga Microscpio Kits para analise devidamente registrados pelos rgos competentes e Ministrio da Sade Lugol

RECURSOS HUMANOS Tcnico de laboratrio Tcnico de Patologia Clinica Responsvel Bioqumico

CUIDADOS COM A SADE E SEGURANA NO TRABALHO

Obrigatrio a utilizao de Equipamentos de Proteo Individual EPI: Jaleco Luva de procedimento Mascara descartvel Gorro Sapato fechado

Cuidados adicionais: Nunca utilizar vidrarias danificadas (rachadas, lascadas ou estilhaadas), cobrir qualquer leso com curativos que impeam contado desta superfcie corporal com possveis materiais que contenham agentes contaminantes. Utilizar jaleco de manga longa, evitando rea cutnea do brao descoberta. Empregar pipetas automticas ou peras de aspirao, nunca pipetar com a boca, em caso de contaminao da pele com sangue, por corte ou contato superficial, logo aps o acidente lave a rea vrias vezes com gua e sabo neutro, caso ocorra contato de sangue com o globo ocular, lave vrias vezes com grandes quantidades de gua. Sempre que ocorrer contaminao com fezes em superfcies do laboratrio, deve ser colocada no local soluo hipoclorito de sdio a 1 % atravs de bomba de esguicho e aps alguns minutos, limpar a rea com gaze embebida na mesma soluo, repetindose a operao se necessrio, incinerar ou colocar em soluo descontaminante as amostras clnicas e resduos fecais de exame, se possvel, implantar sistema de esgoto especfico para laboratrios que manipulam fezes. Introduzir cuidadosamente em recipientes, um para cada tipo de material, contendo soluo de hipoclorito de sdio a 1 %, ou formaldedo a 5 %, lminas de microscopia, pipetas descartveis e vidrarias contendo as amostras clnicas. PESQUISA COPROPARASITOLGICA COLETA DO MATERIAL FECAL Para obteno de melhores resultados, devem ser sempre que possvel utilizadas fezes recentemente emitidas ou preservadas por conservadores apropriados isentas de contaminantes tais como urina, terra, enemas e outros. O fornecedor da amostra fecal deve ser instrudo coletar o material ou diretamente no recipiente, ou no caso de impossibilidade, para utilizar plstico ou papel, isento de impurezas para tal coleta e posterior transferncia da amostra fecal par o mesmo, com o auxlio de esptulas. ACONDICIONAMENTO

Dependendo da disponibilidade de material, objetivos e outras peculiaridades da pesquisa tais como distncia e transporte, poderemos utilizar vrios tipos de acondicionantes que variam desde embalagens plsticas de filmes fotogrficos, frascos plsticos vendidos para tal fim, potes de boca larga como os de comida industrializada de crianas at sacos plsticos (P.e.trabalhos de campo), os ltimos de enorme utilidade em pesquisa quando o nmero de amostras coletadas for grande, pois eliminam o espao morto entre as diversas amostras. conveniente tambm, o fornecimento de duas esptulas descartveis, para facilitar a colocao da amostra fecal no recipiente. O uso de substncias de ao purgativa como o sulfato de sdio deve se restringir aos casos de suspeita de parasitismo por protozorios intestinais principalmente por Entamoeba histolytica. importante ressaltar que o uso de leos vegetais pode determinar a formao de glbulos de gordura e o bismuto e o magnsio podem acarretar formao de cristais e conseqente alterao da morfologia dos trofozotas nas dejees. Pacientes que tenham sido submetidos utilizao de contrastes para estudos radiolgicos de sistema digestivo at 7 dias aps este procedimento, apresentam fezes imprprias para as tcnicas de coprodiagnstico parasitrio QUANTIDADE MNIMA ACONSELHVEL Como as tcnicas coproparasitologicas se baseiam na anlise de possveis estruturas parasitrias em parte das fezes eliminadas, por isso denominada amostra, deve ser respeitada a quantidade mnima de 20 g que possibilitar a feitura de vrias tcnicas ou em caso de dvida a repetio dos exames o que determinar uma maior margem de segurana diagnostica. IDENTIFICAO Deve ser feita por preenchimento de etiquetas coladas aos recipientes acondicionantes com lpis ou caneta esferogrfica colocando-se o nome, sexo, idade, data, hora da coleta, nmero do pronturio (caso exista) e como complemento, outros possveis dados de importncia. CONSERVAO Quando no for possvel a entrega do material no mximo, algumas horas aps sua eliminao, o mesmo pode ser guardado temporariamente em refrigerador at por 12 h ou ento, podem ser utilizados conservantes qumicos numa proporo de 2 a 3 partes para cada 1 de fezes. Quando o material fecal se apresentar aquoso ou amolecido, existe a possibilidade de serem encontrados trofozoitas de amebdeos que apresentam grande labilidade de conservao, representada pelos seguintes perodos: 2-5 h a 37 C; 6-16 h a 20-25 C e 48-96h a 5 C, o que determina quando o material

coletado na residncia, a utilizao de fixador/conservador onde se destacam: Soluo de Schaudinn, lcool polivinilico, SAF e soluo de Bouin. Outros conservantes, para estruturas parasitrias que no sejam formas trofozoticas, so tambm utilizados quando tentando aumentar a chance diagnostica, especialmente em fase crnica das infeces, coletando-se de 2 a 4 amostras de preferncia em frascos individuais contendo conservante e uma ltima amostra com fezes frescas (sem conservante) eliminada horas antes da chegada ao laboratrio, totalizando 3 a 5 amostras. Esta estratgia importante, pois tanto protozorios como helmintos podem no serem eliminados regularmente nas fezes, ocorrendo assim perodos de baixa ou no eliminao de estruturas parasitrias, fenmeno que pode determinar negatividade nas pesquisas em alguns dos dias de exame, como o caso das espcies do gnero Taenia que podem ficar at 3 dias sem eliminar proglotes e de E. histolytica onde algumas vezes ocorre pico de eliminao de cistos de 7 em 7 at 10 em 10 dias. A maioria das solues conservantes tem em sua formula o formol, de forma isolada ou associada a outros produtos qumicos. EXAME MICROSCPICO Alm da pesquisa de estruturas parasitrias, o exame microscpico do material fecal deve assinalar a presena de possveis elementos indicadores de anormalidades intestinais como exemplificado pelo achado de clulas epiteliais em grande nmero associadas com hemcias, o que pode indicar processo ulcerativo intestinal.,Outro elemento de relevncia o encontro de numerosos leuccitos que sugere processo infeccioso, possivelmente de origem bacteriana. CUIDADOS QUE DEVE TER O MANIPULADOR Pelo risco potencial da ocorrncia de transmisso de vrios patgenos pela manipulao fecal, fundamental que se use obrigatoriamente luvas para procedimentos durante toda seqncia diagnstica, trocando-a ou o seu par se ocorrer suspeita ou rompimento, grande contaminao da mesma ou quando se for examinar microscopicamente as preparaes em lmina. O uso de recipiente tipo borrifador com lcool iodado a 70 %, lcool a 70 % ou hipoclorito a 1 %, outro elemento fundamental para limpeza do meio ambiente de trabalho em caso de possvel contaminao deste. MTODOS COPRO-PARASITOLGICOS EXAME DIRETO As fezes devem ser coletadas no tempo mais prximo possvel da execuo do exame, sendo conveniente que se faa a coleta no prprio

laboratrio, ou no mximo de 20 a 30 min. aps sua eliminao, para que se possa pesquisar trofozotas de amebdeos, flagelados e ciliados ainda apresentando mobilidade, sendo os primeiros os mais sensveis aos fenmenos post-mortem. Em fezes moldadas este cuidado no se torna necessrio, pois praticamente no so evidenciados trofozotas. FUNDAMENTO: Retirada direta e posterior estudo de pequenas amostras fecais. PROCEDIMENTO TCNICO 01. Coletar com palito pequena quantidade de fezes (aproximadamente 0,5 g), coletadas de pontos diferentes e quando existente, do local que contenha muco, colocando em 2 pontos distintos de uma lmina. Pode-se acrescentar em um dos locais pequena quantidade de soluo fisiolgica aquecida a aproximadamente 370 C, sendo no outro ponto adicionada pequena quantidade de soluo parasitolgica de Lugol ou de azul de metileno tamponada, cobrindo-se em seguida com lamnulas 22 x 22 mm. No caso de fezes moldadas s necessria uma coleta podendo-se utilizar a soluo parasitolgica de Lugol; 02. Examinar em objetiva de pequeno aumento (aproximadamente 10 X) e em caso de campo suspeito utilizar objetiva de mdio aumento (aproximadamente 40 X). Caso sejam encontrados trofozotas de amebdeos, obrigatoriamente deve se proceder a colorao pela hematoxilina frrica, tricrmico ou outras coloraes menos utilizadas. OBS. recomendvel a retirada de material de pontos diferentes da amostra fecal, principalmente nas que apresentarem muco, j que as estruturas parasitrias se concentram desproporcionalmente em diferentes locais nas fezes. O material no deve ser descartado na pia, deve-se obedecer ao descarte definido pelo PGRSS Plano de Gerenciamento de Resduos em Servio de Sade. O descarte dos EPIs em local apropriado, desligar, limpar e guardar equipamentos e matrias aps a concluso do procedimento. O local e trabalho deve estar sempre limpo durante e aps as atividade, com auxilio de desinfetantes e produtos para desinfeco da banca e vidrarias autoclavadas. Todo o material biolgico deve ser descartado em vaso sanitrio separado escrito descarte de material, e produtos como reagente e kits de urinalise devem ser descartados separadamente para posterior tratamento como incinerao. Controle de Revises Reviso Numero 01

Data 18/11/2011

Elaborado Bioqumico

Verificado Farmacutico Responsvel

Aprovado Responsvel tcnico