Anda di halaman 1dari 6

PENDAHULUAN

IdentiIikasi biakan mikroorganisme seringkali memerlukan pemindahan ke
biakan segar tanpa terjadi pencemaran. Pemindahan mikroorganisme ini dilakukan
dengan teknik aseptik untuk mempertahankan kemurnian biakan selama
pemindahan berulangkali. Mikroorganisme dapat ditumbuhkan dalam biakan cair
atau padat. Kekeruhan dalam kaldu menunjukkan terjadinya pertumbuhan
mikroorganisme. Bila mikroorganisme menumpuk pada dasar tabung maka akan
membentuk sedimen, sedangkan pada permukaan kaldupertumbuhannya terlihat
sebagai pelikel (Lay, 1998).
Dalam teknik biakan murni tidak saja diperlukan bagaimana memperoleh
suatu biakan yang murni, tetapi juga bagaimana memelihara serta mencegah
pencemaran dari luar. Media untuk membiakkan bakteri haruslah steril sebelum
digunakan. Pencemaran terutama berasal dari udara yang mengandung banyak
mikroorganisme. Pemindahan biakan mikroba yang dibiakkan harus sangat hati-
hati dan mematuhi prosedur laboratorium agar tidak terjadi kontaminasi. Oleh
karena itu, diperlukan teknik-teknik dalam pembiakan mikroorganisme yang
disebut dengan teknik inokulasi biakan (Dwijoseputro, 1998).
Di dalam bidang ilmu mikrobiologi, untuk dapat menelaah bakteri
khususnya dalam skala laboratorium, maka terlebih dahulu kita harus dapat
menumbuhkan mereka dalam suatu biakan yang mana di dalamnya hanya terdapat
baktri yang kita butuhkan tersebut tanpa adanya kontaminasi dari mikroba lain.
Biakan yang semacam ini biasanya dikenal dengan istilah biakan murni. Untuk
melakukan hal ini, haruslah di mengerti jenis- jenis nutrien yang disyaratkan
bakteri dan juga macam ligkungan Iisik yang menyediakan kondisi optimum bagi
pertumbuhan bakteri tersebut (Pelczar, 1986).
Teknik isolasi mikroba yang sering dikenal sebagai inokulasi merupakan
suatu teknik pemindahan suatu biakan tertentu dari medium yang lama ke medium
yang baru dengan tujuan untuk mendapatkan suatu biakan yang murni tanpa
adanya kontaminasi dari mikroba yang lain yang tidak di inginkan. Berdasarkan
hal tersebut diatas maka dilakukanlah praktikum ini untuk mengetahui teknik dari
isolasi dan inokulasi bakteri dengan menggunakan metode kuadran cawan gores.
(Pelczar, 1986).
TUJUAN
Adapun tujuan dari percobaan ini adalah Mengetahui teknik isolasi
mikroorganisme dari substrak cair, mengetahui teknik pemindahan/ inokulasi
biakan mikroorganisme, mengetahui ciri pertumbuhan dari mikroorganisme pada
media agar, dan melakukan pengelompokan biakan bakteri.
ALAT DAN BAHAN

Alat yang digunakan pada praktikum kali ini adalah cawan petri,
pembakar bunsen, tabung reaksi, rak tabung reaksi, penyemprot alcohol, ose
pipetmikro, dan inkubator. Bahan yang dipergunakan pada percobaan ini adalah
Biakan Escherichia coli , medium nutrient agar padat, aquadest, spiritus, alkohol,
kertas tisyu dan korek api.

METODE KERJA
Sebelum melakukan pengerjaan , terlebih dahulu mensterilkan tangan dengan
mengunakan alkohol 70°. Cawan petri yang berisi medium NA dibagi menjadi
empat bagian. Bagian-bagian yang telah dibatasi diberi nomor dari 0 sampai 3
dengan menggunakkan spidol permanen. Mengambil biakan bakteri dengan
menggunakan ose. Tutup tabung reaksi yang berisi biakan dibuka. Melidahapikan
mulut/ pinggir cawan petri dengan maksud agar bakteri yang melekat mati. Ose
yang telah dicelupkan dalam biakan lalu digoreskan kea rah kiri dan kanan
berbentuk zig-zag pada permukaan medium sesuai dengan nomor. Perlakuan
yang diberikan : pada kuadran nomor 0 biakkan yang baru diambil langsung
digoreskan diatas permukaan media, kemudian pada kuadran 1 ditarik garis lurus
dari kuadran 0 dan kemudian digerakkan ke kiri dan kanan berbentuk zig-zag
seperti pada biakan 0, tanpa mengambil kembali biakan dari tabung reaksi.
Perlakuan yang sama dilakukan pada kuadran 2 dengan menarik garis lurus dari
goresan kuadran 1. Perlakuan pada kuadran 3 dengan menarik garis lurus dari
goresan kuadran 2. Kemudian membungkus cawan petri dengan menggunakan
plastic lalu menginkubasi ke dalam inkubator selama 24- 48 jam. Mengamati
koloni yang tumbuh.



















HASIL PENGAMATAN

Gambar 1 Hasil Inokulasi metode Kuadran

PEMBAHASAN
Metode kuadran cawan gores mempunyai dua keuntungan yaitu
menghemat bahan dan waktu. Namun untuk memperoleh hasil yang baik
diperlukan keterampilan yang lumayan yang biasanya diperoleh dari pengalaman.
Metode cawan gores yang dilakukan dengan baik kebanyakan akan menyebabkan
terisolasinya mikroorganisme yang diinginkan.
Dua macam kesalahan yang umum sekali dilakukan adalah tidak
memanIaatkan permukaan medium dengan sebaik- baiknya untuk digores
sehingga pengenceran mikroorganisme menjadi kurang lanjut dan cenderung
untuk menggunakan inokulum terlalu banyak sehingga menyulitkan pemisahan
sel- sel yang digores, untuk itulah metode kuadran dilakukan, agar mikroba yang
ingin dikembangkan terbagi dalam kelompok-kelompok sehingga dapat terlihat
perbedaan antara kelompok bakteri yang padat dengan yang jarang.


KESIMPULAN
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan maka dapat diperoleh
kesimpulan bahwa teknik inokulasi merupakan teknik pemindahan bakteri ke
dalam media dengan perlakuan khusus untuk mempertahankan kemurnian biakan
bakteri. Teknik inokulasi dapat dilakukan dengan metode gores pada agar datar
yang kemudian dibagi menjadi empat bagian yang disebut sebagai metode
kuadran. Proses inokulasi harus benar-benar aseptic atau steril supaya tidak terjadi
kontaminasi oleh mikroorganisme lain.
















DAFTAR PUSTAKA
Dwidjoseputro, D. 1998. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Djambatan : Malang.
Pelczar, M.1986. Dasar-Dasar Mikrobiologi I. Erlangga : Jakarta.
Waluyo, L. 2005. Mikrobiologi Umum. MM Press: Malang.

8 27447.3 4708  !0.7   %&& /./. ...3 2094/0 :..7 507.7  20309.8 /.3 /.. 0309./7.3 203:3.84.4-.3 34:..: 903 5023/.5:3 9::...907 /03.3 3 .: 903  84.7 8:-897.3820 /.3 .3.8-..

3  .3 2::9.9:2 .3 /.-:370.3 203:3...75.3 -.8 /-07 34247 /./.907 /03.44  079.3-..8  7.3 5.3 /:3...3 5097 .. .44    .3 3 .6:. .4-.3 203:3.7  -:3803  9.. 0/. 507. 9.320.947  ../ 025..3 . 34:.3 85/4 5072./.3470.:: 2038907. 3 .3 -.07..7 5079:2-:./.3 50307.-:3 70.3480 %:9:59..303  03.:.3 203:3.38205.3-.44   480 5509274  /..3-078-.5.3 5.8..3 27447...3../. 203.5   % # $0-0:2 20...9 -.-:3 70.7 /.7  8..38..3 /507:3.3 .3 -078 20/:2  /-.8  503025749 ./.3  9070- /.2-  -...9 ..3 5097  502-.8 -.4 20/:2 3:97039.9 .25../.907  %  .3 .3/-:.9..  /03.3 90..7 27447.:.3 3:-.. 20/.350304254. /-.3 /03.: .898:/./089 8579:8 ..3 9.3820  20309. 57..

3 .7.7 :.3 -07-039:  .7 9.3. 203..3/..../7.35..:.9  80 .3 /./.-:3 70. -.7 -.3 34247  !07.3 /07. /.2 -./7./7.3 90. 02:/.3 0. 7./7.3 ../.38:3 /4708. :.38.78:7:8/.2.9 2.7.3 2.8  !07.  5./.3.7: /.3/03.3 20/:2 808:.85072:.3 200./.:.3 .3  /.:.35. -.8:/ .: /4708.3 . 805079 5.78:7:8 /.3203.3 34247   -.3 20/./.3 /.3  9.3  5. 5072:..3/9.2- .907 .3 0 7 /.7 .9.3 -..3./.3 -07-039:  .3 02:/. /03.35.3 5097 /03.:. 7 /.3 /-07.0:5..3 ..2- 02-.:.. 537 .

../7.39:2-:                     .947 80.4708.3 5097 /03./7.3   !07.3  /03.89.  . :.3   02:/.2 3:-.78 :7:8 /./7.7 .:.3 203:3.3 :.9 443.3 203..7 4708.3 5.2../.3 202-:3:8 .3 :.3 5.2  03.: 2033:-.8 0 /.    .2.

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

:.3-.3 02:/.3 -..3 90.23. /.3                  .3 2.220/.8 207:5.7 /.9/.$!& 07/.3820.8./03.9.3 903 5023/..5.9 -.3 /-.7 .302:73.3 /03. 203.8 /.907  %03 34:..:.3507.3 -.907 0 /.7:8-03.5.9:2 .. ./ 025..8.907./ 439. 903 34:./7.7....3 !7480834:.84027447.3:8:8:39:2025079..9.:..3.7 -03.3 .3 2094/0 4708 5..3 /80-:9 80-. /.:89078:5.8059.7. 2094/0 :..9 /./.3 -.9 /50740 0825:.3 57.

774-44 .7   .7 .3  !0.8..7 ..  .%#!&$% /4805:974   .8..9.79..774-44 7.8..2-.3.3  .8.:4    74-44&2:2 !7088.3.