Citocinas.

* Alfredo Prieto, * Marco Jondee, * Leticia Muoz, *Esperanza Perucha, * Melchor Alvarez-Mon. * Departamento de Medicina, Universidad de Alcal

Servicio de Enfermedades del Sistema Inmune y Oncologa. Hospital Universitario

Prncipe de Asturias Universidad de Alcal

Las citocinas son factores solubles no antgeno especficos que son producidos mayoritariamente por leucocitos e intervienen en la regulacin de las clulas del sistema inmune y los procesos inflamatorios. Estas molculas estn implicadas en las respuestas frente a agentes infecciosos, pero en ocasiones pueden ser responsables de procesos patolgicos. Las citocinas incluyen a las interleucinas (IL), linfocinas, interferones, monocinas y quimiocinas. Las quimiocinas son protenas implicadas en la atraccin especfica de los leucocitos hacia tejidos en donde se est produciendo un proceso inflamatorio y son tratadas en otro captulo de esta obra. Las citocinas son polipptidos o glicoprotenas con un peso molecular menor de 30 kDa, aunque algunas pueden formar oligmeros de mayor peso molecular. La clonacin de los genes de estas citocinas ha permitido su produccin en masa y actualmente est siendo explorada la utilidad teraputica de la administracin de citocinas o molculas antagonistas (anticuerpos anticitocina, receptores solubles) en enfermedades infecciosas, tumorales o autoinmunes. Las citocinas ejercen su funcin actuando sobre receptores especficos de membrana y contribuyen a la activacin, blastognesis y/o diferenciacin en clulas efectoras, regulando tambin otros procesos como la apoptosis, adquisicin de capacidad citotxica y la recirculacin de los leucocitos.

Los efectos y la sntesis de las citocinas no se limitan al sistema inmune, ya que se ha observado que estas molculas pueden regular la funcin de las clulas de otros rganos y tejidos. Por otro lado, el estado funcional de las clulas del sistema inmune es modulado por molculas aparentemente propias de otros sistemas tales como el sistema nervioso o el endocrino (1), sugiriendo la integracin global de todos ellos dentro del organismo. Las citocinas originariamente se definieron por las actividades biolgicas que eran capaces de promover en distintos ensayos in vitro. Con posterioridad estas diversas actividades se fueron asociando a una determinada citocina a medida que fue conocindose su secuencia de aminocidos. Slo en algunos casos, se ha mantenido la denominacin original, como por ejemplo, interferones (IFN) o factores estimuladores de colonias (CSF), debido a la unanimidad y universalidad de su empleo (Tabla 1). Caractersticas genricas de las citocinas Las citocinas presentan una serie de caractersticas funcionales comunes que son mostradas en la Tabla 2: 1) La secrecin de citocinas es un suceso breve y autolimitado. En general no se almacenan en la clula, y su sntesis se inicia por una nueva transcripcin gnica de corta duracin. La sntesis de citocinas es por tanto un proceso transitorio. 2) El radio de accin de las citocinas es corto, siendo su modo de accin autocrino, yuxtacrino o paracrino. 3) Las citocinas producen sus efectos unindose a receptores especficos de alta afinidad alterando en las clulas diana los patrones de expresin gnica. 4) Muchos tipos individuales de citocinas, pueden producirse por diversos tipos celulares. Por ello, se tiende cada vez ms a denominar a estas molculas como citocinas, en vez de linfocinas o monocinas. 5) Sus acciones se solapan ya que son realizadas por varios tipos de citocinas diferentes. 6) Es usual que un tipo de citocina influya sobre la sntesis de otro, producindose cascadas en las que una segunda o una tercera citocina, puede mediar las mismas acciones biolgicas de la primera, o

suprimirlas. Esta propiedad de aumentar o suprimir la produccin de otras citocinas, proporciona un mecanismo regulador muy importante para las respuestas inmunes. 7) A menudo, dos citocinas pueden tener un efecto sinrgico, aunque tambin en ocasiones distintas citocinas tienen efectos antagnicos. 8) Las citocinas son molculas pleiotrpicas, es decir actan sobre diferentes tipos de clulas induciendo sobre ellas efectos variados. En muchos casos, una citocina puede interaccionar con diferentes tipos celulares que expresan receptores para ella. 9) Una nica clula presenta receptores para mltiples citocinas. 10) La unin de una citocina a su receptor altera la expresin de receptores tanto para la propia citocina como para otras. Las interacciones de los efectos de las distintas citocinas sobre las clulas inmunes determinan que una mezcla de dos citocinas pueda tener acciones cuantitativa y cualitativamente diferentes de las que tendran ambas citocinas por separado. Por esta razn, en condiciones naturales, las citocinas ejercen sus acciones biolgicas en presencia de otras citocinas y su accin biolgica refleja las interacciones sinrgicas o antagnicas entre las distintas citocinas a las que est expuesta la clula diana. Debido a estos hechos, los distintos tipos celulares pueden activarse de forma diferencial en un ambiente que presenta una misma combinacin de citocinas. Las familias estructurales de citocinas y de sus receptores La clasificacin de las citocinas de acuerdo a su estructura y a la estructura de sus receptores se muestra en la Tabla 3. Los receptores de citocinas estn formados por varias cadenas que a su vez estn formadas por varios dominios. Se distinguen varias familias de receptores para citocinas, la mayora de ellos pertenecen a la superfamilia de receptores de citocinas que contienen un dominio caracterstico de unin al ligando que se denomina dominio hemopoyetina. Los receptores de esta superfamilia estn formados por un componente especfico que se une a una citocina especfica y otro componente comn a

varios receptores que es capaz de transducir las seales de una familia de citocinas. Dentro de esta superfamilia, se distinguen tres familias: la del receptor de IL-2, la del receptor de GM-CSF y la del receptor de IL-6. Los receptores de IL-2, IL-4, IL-7, IL9,IL-13 e IL-15 pertenecen a la primera familia y estn formados por un componente especifico de cada uno y una cadena compartida por todos y encargada de transducir

la seal de ocupacin del receptor. (2).. En la mayora de los casos el componente especfico es un monmero, sin embargo en el receptor para la IL-2 esta formado por 2 cadenas y que se unen a la IL-2 con distinta afinidad. La segunda familia incluye los receptores de IL-3, IL-5 y GM-CSF que comparten una cadena comn que transduce la seal de ocupacin, las citocinas de esta familia se unen a cadenas especficas de sus receptores. La tercera familia incluye los receptores de IL-6 e IL-11 que comparten una subunidad comn, la cadena gp130. Los dos receptores de IL-1, IL-1RI, IL-1RII estn formados por dominios de la superfamilia de las inmunoglobulinas, el receptor de la IL-18 comparte cadenas que forman parte del receptor de IL-1. Los interferones tambin se unen a un dominio especifico de su receptor. Los receptores de TNF y TNF forman parte de la familia del receptor de TNF. Algunos de los miembros de esta familia de receptores como CD27, CD30, CD40, y FasL tienen ligandos que no son molculas solubles sino protenas de membrana. Papel de las citocinas en la determinacin del tipo de respuesta inmune. Las citocinas TNF , IL-1, IL-6, IL-8, IFN e IFN son mediadoras de la inmunidad natural y del reclutamiento linfocitario necesario para la respuesta inmune especfica. Las respuestas inmunes especficas requieren de la activacin y proliferacin de los linfocitos T que son estimuladas por la IL-2 y la IL-15. Las respuestas inmunes especficas se han dividido clsicamente en funcin de los mecanismos efectores implicados en respuestas

mediadas por clulas y en respuestas humorales. Las citocinas participan en la determinacin de estos dos tipos de respuesta inmune (tabla 4). Las respuestas mediadas por clulas requieren que los linfocitos CD4 proinflamatorios estimulen el crecimiento y la diferenciacin de linfocitos T citotxicos, as como la activacin de los macrfagos. La accin proinflamatoria de estos linfocitos es estimulada por la produccin de las citocinas IL-12, IL-16, IFN y TNF . En las respuestas mediadas por anticuerpos los linfocitos T CD4 cooperan con los linfocitos B estimulando su proliferacin y diferenciacin hacia clulas productoras de inmunoglobulinas. La accin cooperadora de los linfocitos CD4 es estimulada por las citocinas IL-4, IL-5, IL-10, IL-13 y IL-14. Mosmann y cols. demostraron que los clones de clulas T cooperadoras de los ratones podan ser divididos en dos tipos, definidos por distintos patrones de produccin de citocinas (3). Los linfocitos T cooperadores de tipo1 (Th1) produciran IL-2, IFN y TNF y seran por tanto los responsables de la promocin de las respuestas celulares que pasaron a denominarse respuestas inmunes de tipo 1. Los linfocitos T cooperadores de tipo 2 (Th2) produciran IL-4, IL-5, IL-6, IL-10 y IL-13 y serian los responsables de la cooperacin con las clulas B en las respuestas humorales, que pasaron a denominarse respuestas inmunes de tipo 2 (4). La existencia de una divisin dicotmica entre los linfocitos Th humanos es objeto de controversia. Los estudios de los patrones de secrecin de citocinas en clulas individuales han demostrado que en los linfocitos humanos, slo un pequeo porcentaje de los linfocitos encaja en las categoras Th1 y Th2 (5). La mayora de los linfocitos T cooperadores humanos presenta patrones de secrecin de citocinas que combinan la secrecin de algunas citocinas tipo 1 con la de otras tipo 2; por ejemplo la IL-10, una citocina Th2 por excelencia, es producida tanto por linfocitos T productores de IL-4, como por los productores de IFN (6). Es un hecho generalmente admitido que las

clulas T que secretan IL-4 no secretan IFN y viceversa, pero tambin es cierto que en los linfocitos Th humanos existen clulas que secretan cualquiera de las combinaciones del resto de citocinas segn patrones de asociacin aleatorios (7). Por tanto, podemos concluir que aunque existen respuestas inmunes de tipo1 y de tipo 2, stas no se basan (al menos en la especie humana) en el predominio de clones de Th1 o Th2, sino en el predominio de clones productores de IL-4 o IFN . Actualmente el concepto ha evolucionado y al referirse a linfocitos humanos se denomina Th1 a los linfocitos productores de IFN y Th2 a los productores de IL-4. En la tabla 5 se muestran los factores que influyen en la diferenciacin de los linfocitos T cooperadores hacia la produccin de IL-4 o IFN . Es destacable el papel de la IL-12 y la IL-4 en este proceso. La IL-12 producida por los macrfagos acta sobre los linfocitos Th en los que activa tres factores de transcripcin Stat1, Stat3 y Stat4 que favorecen su diferenciacin en linfocitos T productores de IFN , que aumentarn la actividad microbicida de los macrfagos. El desarrollo de las clulas productoras de IL-4 es inducido por la IL-4. Su seal es transducida por el factor de transcripcin Stat 6 que se une a la regin promotora de la expresin del gen de la IL-4. El tipo de clulas presentadoras de antgeno tambin influye en la regulacin de la expresin de los genes de IFN e IL-4. Las clulas dendrticas y los macrfagos (que producen IL-12 y no IL-4) estimulan preferentemente el desarrollo de linfocitos T productores de IFN mientras que las clulas B (que producen IL-4 y no IL-12) inducen la diferenciacin de los linfocitos Th hacia la produccin de IL-4. En conclusin los estmulos inmunolgicos que activan a los macrfagos o a las clulas dendrticas inducen respuestas inmunes de tipo Th1 mientras que los antgenos que son captados por las Inmunoglobulinas de superficie de las clulas B inducen respuestas de tipo Th2.

Las respuestas inmunes dominadas por IFN

(Th1) estimulan a los macrfagos

aumentando su potencial fagoctico microbicida y tambin favorecen la produccin de anticuerpos de los isotipos IgG1 e IgG3 que son los de mayor capacidad para la activacin del complemento y mayor afinidad por los receptores Fc de las clulas fagocticas. Las respuestas Th1 favorecen la opsonizacin, la fagocitosis y la presentacin antignica por clulas fagocticas. Por tanto estas respuestas Th1 estn asociadas a activacin de macrfagos, inflamacin y dao tisular y son esenciales en la defensa frente a bacterias intracelulares como Mycobacteria. Las respuestas dominadas por IL-4 (Th2) inducen la produccin de niveles elevados de IgM y tambin de isotipos de IgG que no fijan complemento como IgG4. Tambin favorecen el cambio de isotipo hacia la produccin de IgE y la activacin de eosinfilos, basfilos y mastocitos que son las clulas efectoras con receptores de alta afinidad para IgE. Estos mecanismos son importantes en las respuestas inmunes frente a helmintos y en las reacciones alrgicas. Las respuestas Th2 antagonizan los efectos proinflamatorios de IFN sobre los macrfagos por lo que suprimen tanto las reacciones inflamatorias agudas como las crnicas. La heterogeneidad de los patrones de produccin de citocinas por los linfocitos Th tambin se refleja en sus patrones de expresin de receptores de quimiocinas. Se ha demostrado en modelos murinos, que la expresin de CCR3 y su interaccin con la eotaxina sobre linfocitos T de sangre perifrica identifica una pequea poblacin de clulas productoras de IL-4 con capacidad de expansin in vitro, indicando una polarizacin de respuesta inmune hacia la produccin de IL-4 (8). De este modo la eotaxina y su receptor CCR3 se implican no slo en la atraccin de basfilos y eosinfilos sino tambin en la de los linfocitos T productores de IL-4 que estimulan las respuestas inmunes mediadas por basfilos y eosinfilos.

Finalmente, la accin reguladora de las citocinas sobre las respuestas inmunes tambin puede ser negativa. Existen citocinas inhibidoras como TGF y IL-1Ra, as como formas solubles de los receptores, que inhiben especficamente la accin de las citocinas a las que se unen. Los linfocitos productores de TGF responsables de la inhibicin de las respuestas inmunes y de la induccin de tolerancia se han denominado como TH3 para resaltar su importancia en la regulacin del sistema inmune. Asimismo se producen relaciones de antagonismo reciproco, las citocinas IL-4 e IL-10 inhiben los efectos de IL-12 e IFN , que a su vez inhiben los efectos de las primeras. A continuacin se exponen con ms detalle los efectos de las citocinas sobre la regulacin del sistema inmune. Las clulas productoras de cada citocina se muestran en la Tabla 6. En la Tabla 7 se muestran las clulas diana de cada citocina as como sus efectos ms importantes. I. Citocinas mediadoras de inmunidad natural. Son aquellas que protegen frente a la infeccin viral (interferones de tipo I, MIP 1- , RANTES) y las que inician las reacciones inflamatorias que defienden frente a las infecciones bacterianas (IL-15, TNF , IL-1, IL-6, IL-8, IL-18). Los Interferones de tipo I (IFN), se sintetizan en respuesta a la infeccin vrica e incluyen dos grupos serolgicamente distintos de protenas, denominados y . Los interferones o leucocitarios son producidos preferentemente por fagocitos

mononucleares. Los interferones o fibroblastoideos son producidos preferentemente por fibroblastos. Ambos interferones interaccionan con un mismo receptor. Sus principales acciones biolgicas son la inhibicin de la replicacin viral mediante la induccin en las clulas diana de un estado de resistencia a la infeccin viral y la inhibicin de la proliferacin celular. Los interferones aumentan el potencial ltico de las

clulas NK y de los monocitos. Tambin aumentan la expresin de molculas clase I e inhiben la expresin de molculas de clase II (tabla 7). La interleucina 15 (IL-15), estimula la generacin y proliferacin de linfocitos T citotxicos. Sus efectos se solapan con los de la IL-2, su receptor comparte la cadena con el receptor de IL-2. Sin embargo es mayoritariamente producida por monocitos y fibroblastos. En los ltimos tiempos se ha resaltado su participacin como factor proinflamatorio en la sinovitis asociada a la artritis reumatoide. En experimentos in vitro la IL-15 activa linfocitos T sinoviales que a su vez inducen la produccin de TNF por macrfagos sinoviales. Esto supone que la IL-15 producida en la sinovial puede reclutar y activar a los linfocitos T sinoviales que una vez activados amplifican la inflamacin mediante la activacin de monocitos que producen grandes cantidades de TNF. De este modo la IL-15 tiene un papel central en la regulacin de la inflamacin sinovial y podra ser un factor primordial en su perpetuacin. La interleucina 15 se detecta en los agregados de linfocitos de la membrana sinovial inflamada, su expresin se correlaciona con los niveles de TNF en liquido sinovial y disminuye con el tratamiento inmunosupresor. Por todo lo anterior los anticuerpos anti-TNF o antiIL-15 tienen un gran potencial teraputico en el tratamiento de las sinovitis de etiologa autoinmune. El factor de necrosis tumoral (TNF ), es una protena que existe en una forma libre y tambin como molcula de membrana. El TNF es producido por clulas T activadas, mastocitos y macrfagos tras estimulacin por endotoxinas bacterianas, factor estimulador de colonias de macrfago (M-CSF), IFN IL-2 IL-15. El TNF fue

descrito como factor txico para algunas clulas en cultivo, y causante de necrosis hemorrgica de tumores in vivo. El TNF es el principal mediador de la respuesta inmune frente a bacterias Gram negativas y que el estmulo ms potente para su

produccin son los lipopolisacridos bacterianos (LPS). Despus de la actuacin por LPS, el IFN regulara positivamente su sntesis. El TNF ejerce numerosos efectos in vivo que son muy dependientes de su

concentracin. A concentraciones bajas el TNF acta localmente como un mediador paracrino que provoca aumento de la adhesividad de las clulas endoteliales de los vasos, activacin leucocitaria y estimulacin de la produccin de IL-1, IL-6 e IL-8 en los fagocitos mononucleares. Tambin coestimula la activacin de linfocitos T y B. En clulas del endotelio vascular y fibroblastos, estimula la produccin de CSFs y aumenta la expresin de molculas del MHC de clase I. Cuando las cantidades de TNF son mayores, ste acta de modo endocrino y provoca acciones sistmicas: estimula la produccin de reactantes de fase aguda por el hgado y la produccin de IL-1 e IL-6 en clulas del endotelio vascular; activa el sistema de coagulacin e induce fiebre; suprime la proliferacin de las clulas progenitoras hematopoyticas de la mdula sea y contribuye a la induccin del estado caquctico. En las sepsis por bacterias Gram negativas se producen grandes cantidades de TNF; las concentraciones extremadamente elevadas de TNF deprimen la contractilidad del miocardio con la consiguiente reduccin de la perfusin tisular, relajan el tono del msculo liso vascular, contribuyendo a la disminucin de la presin sangunea y provocan coagulacin intravascular diseminada. Sobre los monocitos el TNF induce un aumento de la expresin de molculas de clase I del MHC y liberacin de IL-1, cuyas propiedades biolgicas se solapan a las del TNF . Los linfocitos T en reposo carecen de receptores para TNF , que aparecen tras su estimulacin antignica. Sobre las clulas T activadas el TNF incrementa el nmero de receptores para la IL-2, aumenta la proliferacin y la produccin de IFN inducidas por la IL-2. Los linfocitos T activados secretan simultneamente TNF e IFN . Tambin

los linfocitos B producen TNF cuando son activados por el antgeno (10). En presencia de IL-2, el TNF incrementa la expresin de receptores para IL-2 en clulas NK y LAK, as como su actividad citotxica. Parece probable la existencia de algn lazo de regulacin autocrino, ya que las clulas NK son capaces de producir TNF . La Interleucina 1 (IL-1), ejerce una amplia gama de efectos en una extensa variedad de clulas (Tablas 6 y 7). Las diferentes actividades de la IL-1 son el resultado de los efectos de dos protenas diferentes (IL-1 e IL-1 ) (11). A pesar de tener menos de un 30% de homologa en su secuencia aminoacdica, ambas molculas se unen a dos receptores muy similares entre s: IL-1RI (CDw121a) e IL-1RII (CDw121b) y tienen similares actividades biolgicas (12). La IL-1 es segregada por muchos tipos de clulas (Tabla 6), tras su estimulacin por diferentes seales activadoras. Los monocitos y los macrfagos secretan IL-1 en respuesta a productos bacterianos tales como endotoxinas, inmunocomplejos, fragmentos moleculares de degradacin del complemento, en particular C5a, y citocinas, como el M-CSF, el TNF y el IFN . Los receptores para la IL-1 se encuentran en diversos tipos celulares (tabla 7). La IL-1 en bajas concentraciones tiene funciones inmunoreguladoras a nivel local actuando como coestmulo para la activacin de las clulas T, incrementando la proliferacin de los linfocitos CD4 y el crecimiento y la diferenciacin de clulas B. Adems induce el aumento de su propia sntesis y la produccin de otras citocinas, tales como IL-6 e IL8 por monocitos y clulas endoteliales, IL-6 por los fibroblastos o la IL-2 por clulas T, y estimula la expresin de receptores de citocinas en diferentes tipos celulares, incluyendo clulas hematopoyticas y clulas T. La IL-1 durante la activacin del linfocito B, acta sinrgicamente con otras linfocinas, favoreciendo su progresin en el ciclo celular. Tambin acta sobre las clulas endoteliales promoviendo la coagulacin y la adhesin linfocitaria.

A concentraciones mayores la IL-1 ejerce una accin endocrina y provoca, a nivel sistmico, algunos de los efectos que produce el TNF : fiebre, sntesis de protenas de fase aguda y caquexia. Por otro lado, tiene efectos diferentes a los del TNF, ya que no produce dao tisular por s misma y no es letal, tampoco causa necrosis hemorrgica de tumores, ni lisa clulas tumorales in vitro. Tampoco incrementa la expresin de molculas del MHC ni inhibe el crecimiento de las clulas hematopoyticas de mdula sea sino que potencia las acciones de los CSF sobre estas clulas. Finalmente, la accin IL-1 es ms potente que la del TNF como coestimulador de las respuestas de los linfocitos T. La IL18 presenta accin proinflamatoria y muchas similitudes con la IL-1 . La interleucina 6 (IL-6), es una glicoprotena producida por diversos tipos celulares (Tabla 6) tras su activacin por virus, IL-1 o TNF . El receptor de IL-6, CD126, est presente en las clulas T en fase quiescente, y su expresin no aumenta tras la estimulacin antignica (13). Por el contrario, las clulas B en reposo carecen de receptores para la IL-6, adquirindolos despus de su activacin. La IL-6 favorece la diferenciacin de clulas B humanas, sobre las clulas B in vitro aumenta la sntesis y secrecin de Igs sin estimular cambios en el isotipo de las Igs producidas (13). La IL-6 precisa de la IL-2, aunque sea en cantidades mnimas, para ejercer su accin favorecedora de la diferenciacin. La IL-6 acta como coestimulador de la activacin de las clulas T y de los timocitos. Tambin acta sobre los hepatocitos, estimulando la sntesis de diferentes protenas plasmticas, como el fibringeno, que contribuyen a la respuesta inflamatoria de fase aguda. La interleucina 8 (IL-8), es un miembro de la familia de las quimiocinas y es producida por una amplia variedad de clulas (Tabla 6), tras su estimulacin con diferentes seales que incluyen a la IL-1, TNF, endotoxina y diferentes virus; tambin es producida por las plaquetas. Los receptores para la IL-8 IL-8R se encuentran en diversos

tipos celulares 7). Esta quimiocina ejerce un papel primordial en la iniciacin de la respuesta inflamatoria al promover la quimiotaxis y posterior degranulacin de los neutrfilos. Adems, desarrolla una accin quimiotctica sobre otras clulas entre las que se encuentran los linfocitos T y los basfilos. Sobre estos ltimos estimula la liberacin de histamina. Algunas de las acciones proinflamatorias del TNF y la IL-1 son mediadas por la secrecin de IL-8, que por tanto acta como un mediador secundario de los procesos inflamatorios. Dentro de las quimiocinas de la familia podemos destacar MIP-1 que es un factor quimiotctico para monocitos, eosinfilos, clulas B y NK. MIP-1 es un mediador importante en la inflamacin inducida por virus (12). RANTES es otro miembro de esta familia que es quimiotctico para clulas T memoria y eosinfilos. II. Citocinas que regulan la activacin y la diferenciacin linfocitaria T Son producidas principalmente por linfocitos activados por el antgeno. Promueven tanto las respuestas humorales como las mediadas por contacto celular directo. La interleucina 2 (IL-2), es capaz de mantener el crecimiento de los linfocitos T en cultivo y es producida exclusivamente por clulas T y NK. El receptor de alta afinidad est formado por tres cadenas ( ) y ejerce su accin por activacin de una tirosina quinasa lck dependiente de las cadenas y (14). Los linfocitos T y B as como los macrfagos en reposo expresan pequeas cantidades de receptores de afinidad baja ( ) y las clulas NK los presentan de afinidad intermedia ( ). Las clulas T y B al activarse expresan un gran nmero de molculas de la cadena que se traduce en la formacin de mayor nmero de receptores de alta ( ) y de baja afinidad( ).La actividad biolgica de la IL-2 es esencial en la regulacin de la proliferacin de los linfocitos T, en los que induce la sntesis de TNF , IFN entre otras citocinas. Activa a los precursores

citotxicos de las clulas NK, as mismo promueve el crecimiento de las clulas NK e incrementa su potencial ltico. Tambin promueve el crecimiento de las clulas B, y estimula su diferenciacin a clulas productoras y secretoras de Igs. III. Citocinas promotoras de respuestas de anticuerpos La interleucina 4 (IL-4), es producida por linfocitos CD4+ activados, mastocitos activados y macrfagos. Se han detectado sus receptores CD124 en los linfocitos T, en los linfocitos B, en los macrfagos y en otras clulas no pertenecientes al sistema inmune, tales como fibroblastos, hepatocitos, clulas hematopoyticas, etc. La IL-4 acta sobre los linfocitos B en reposo modulando el efecto de activacin subsiguiente a la interaccin con el antgeno, pero no induce proliferacin. Tambin aumenta la expresin de molculas del MHC de clase II, CD23 y CD40. Por otro lado, el aumento en la expresin de CD23 inducido por IL-4 puede inhibirse por IFN (15). Tambin, induce el cambio de isotipo de Ig hacia la produccin de IgE. La IL-4 antagoniza varios de los efectos de la IL-2 en los linfocitos B. Sobre los macrfagos inhibe la expresin de los tres tipos de receptores para la regin Fc de la IgG y bloquea la produccin de IL-1, IL-6, IL-8 y TNF . Sobre los linfocitos T activados inhibe la produccin de IFN , aumenta la capacidad ltica de los CTLs. y sobre las clulas NK induce proliferacin y actividad LAK, pero antagoniza los efectos de IL-2. La interleucina 5 (IL-5), es una glicoprotena producida exclusivamente por linfocitos T activados. La IL-5 estimula el crecimiento y la diferenciacin de los eosinfilos y promueve su activacin, que es necesaria para la respuesta inmune frente a parsitos (16). Tiene actividad como factor de diferenciacin de clulas B promoviendo la sntesis de inmunoglobulinas, especialmente la de IgA. La interleucina 10 (IL-10), es una protena producida por linfocitos T, B y monocitos activados. Tiene efectos inmunosupresores y anti-inflamatorios. A travs de la inhibicin

de la accin coestimuladora de macrfagos inhibe la proliferacin y sntesis de citocinas en linfocitos T. En los macrfagos inhibe la sntesis de citocinas proinflamatorias como la IL-1, la IL-6, la IL-8, y el TNF y aumenta la produccin de un agente anti-inflamatorio, el factor antagonista del receptor de IL-1 (IL-1Ra) (17). El virus de Epstein Barr contiene un gen que presenta una gran similitud con el gen de la IL-10, se piensa que de este modo el virus estimula la proliferacin de las clulas B infectadas por l e inhibe las respuestas inmunes mediadas por linfocitos T contra las clulas B infectadas. La interleucina 13 (IL-13) tiene una accin coestimuladora sobre las clulas B y de modo similar a la interleucina 4 induce el cambio de isotipo hacia la produccin de IgE. Por otro lado inhibe en los monocitos la sntesis de citocinas inducida por LPS. La interleucina 14 (IL-14) es producida por las clulas foliculares dentrticas y linfocitos T activados. Esta citocina parece jugar un importante papel en el desarrollo de las clulas B memoria, aumenta la proliferacin de las clulas B activadas y disminuye su sntesis de inmunoglobulinas. IV. Citocinas proinflamatorias Estas citocinas son producidas por linfocitos T proinflamatorios activados por el antgeno y sirven para activar las funciones de clulas efectoras que participan en la fase efectora de las respuestas inmunes mediadas por clulas. Aunque la interleucina 15 tiene tambin efectos proinflamatorios es fundamentalmente producida por monocitos por lo que no es incluida en este apartado. La interleucina 12 (IL-12) tiene efectos que son recprocos a los de la interleucina 10 y acta de modo sinrgico con la interleucina 2 para inducir la produccin de IFN en

linfocitos T y clulas NK. Sus niveles correlacionan con la actividad clnica de la enfermedad en pacientes con esclerosis mltiple y son normalizados por la terapia con ciclofosfamida.

El Interfern

(IFN ), es una glicoprotena secretada por los linfocitos T

proinflamatorios y por las clulas NK. Es el principal factor activador de macrfagos en los que estimula la produccin de IL-1 y TNF, aumenta su capacidad ltica e induce la expresin de molculas de histocompatibilidad de clase I y II del MHC con lo que aumenta la presentacin antignica y la activacin de linfocitos CD4+ y CD8+. El IFN tiene un efecto protector contra infecciones parasitarias y otros patgenos intracelulares y puede contribuir a muchos de los efectos txicos de las endotoxinas bacterianas (18). Tambin regula positivamente la capacidad citotxica de los linfocitos T y de las clulas NK promoviendo su activacin y maduracin. As mismo, acta sobre los linfocitos B inhibiendo su proliferacin y favoreciendo su diferenciacin hacia clulas productoras de isotipos IgG2a o IgG3. El IFN activa los neutrfilos y las clulas endoteliales,

promoviendo la adhesin e infiltracin linfocitaria. El Factor de Necrosis Tumoral (TNF ) es una glicoprotena que presenta un 30% de homologa en su secuencia de aminocidos con el TNF . El TNF es producido por los linfocitos T activados y por algunas lneas linfoblastoideas de linfocitos B (19). El TNF y el TNF comparten los mismos receptores y en consecuencia sus actividades biolgicas. V Citocinas con efecto supresor de las respuestas inmunes El factor transformante de crecimiento beta (TGF ), es un polipptido que induce en clulas no neoplsicas un crecimiento no suprimible por contacto. El TGF es producido por casi todos los tipos celulares, los fagocitos mononucleares activados por LPS y los linfocitos B y T activados por antgenos. Inhibe el crecimiento de muchos tipos celulares y estimula el crecimiento de otros. Aumenta la proliferacin de los fibroblastos y la sntesis del colgeno As, en linfocitos T y B inhibe la proliferacin dependiente de IL-2 y en los linfocitos B, la secrecin de Igs inducida por la IL-2 (20). Tambin inhibe la

activacin de los macrfagos y de los linfocitos citotxicos. Su efecto como anticitocina dota de funcin supresora a los linfocitos T que lo sintetizan. Favorece la diferenciacin de las clulas B hacia clulas productoras de IgA. Los linfocitos productores de TGF tienen efectos supresores de la respuesta inmune y parece que son especialmente importantes en la induccin de tolerancia por va oral, ya que estos linfocitos son especialmente abundantes en el sistema linfoide asociado a mucosas y tracto gastrointestinal. El antagonista del receptor de IL-1 (IL-1Ra) es estructuralmente homlogo a IL-1 y se une a sus receptores pero no transduce seal por lo que bloquea la accin de la IL-1. Los receptores solubles de las citocinas son formas truncadas de los receptores de membrana a las que les faltan los dominios transmembrana e intracitoplsmico. Pueden liberarse por rotura proteoltica de receptores transmembrana o bien por sntesis de RNAm que han sido procesados y slo contienen la secuencia que codifica la regin extracelular del receptor. Pueden ejercer una funcin inmunoreguladora antagonista de la accin de las citocinas a las que se unen. Sin embargo, no slo deben ser considerados como agentes neutralizantes de las citocinas, ya que la presencia de receptores solubles en circulacin puede estabilizar y prolongar la vida media de las citocinas en suero aumentando de este modo su radio de accin.

Referencias 1.Alvarez-Mon M, Kehrl JH, Fauci AS: A potential role for adrenocorticotropin in regulating human B lymphocytic functions. J Immunol. 1985; 135: 3823-6. 2.Taniguchi T, Minami Y: The IL-2/IL-2 receptor system: a current overview. Cell. 1993; 73: 5-8. 3. Mosmann TR, Coffman RL. Th1 and Th2 cells: Different patterns of lymphokine secrection lead to different functional properties. Annu Rev Immunol. 1989; 7:145-73. 4. Mosmann TR, Cherwinski H, Bond MW, Giedlin MA, Coffman RL. Two types of murine helper T cell clone. I. Definition according to profiles of lymphokine activities and secreted proteins. J Immunol. 1986; 136:2348-57. 5. Kelso A, Trout AB, Maraskovsky E, Gough NM, Morris L, Pech MH, Thomsom JA: Heterogeneity in lymphokine profiles of CD4+ and CD8+ T cells and clones activated in vivo and in vitro Immunol rev 1991, 123:85-114. 6. Assenmacher M, Schmitz J, Radbruch A: Flow cytometric determination of cytokines in activated murine T helper lymphocytes: expresion of interleukin-10 in interferongamma and in interleukin-4-expressing cells. Eur J Immunol 1994,24: 1097-1101. 7. Kelso A, Th1 and Th2 subsets: paradigms lost? Immunology Today. 1995; 16: 374-9 8. Sallusto F, Mackay CR, Lanzavecchia A. Selective expression of the eotaxin receptor CCR3 by human T helper 2 cells. Science 1997;277:2005-7. 9. Mc Innes, Liew FY. Interleukin 15: a proinflammatory role in rheumathoid arthritis synovitis. Immunol Today 1998; 19:75-9. 10. Vassalli P: The pathophysiology of tumor necrosis factor. Annu Rev Immunol. 1992; 10 :411-53. 11.Dinarello CA Wolf SM: The role of Interleukin-1 in disease. N Eng J Med. 1993; 328: 106-13.

12. Cook DN, Beck MA, Coffman TM, Kirby SL, Sheridan JF, Pragnell IB, Smithies O. Requirement of MIP-1 for an inflammatory response to viral infection. Science 1995; 2691583-85. 13.Hirano: Interleukin 6, En The Cytokine handbook 2nd ed Academic press, New York 1994 p145-66. 14.Asao H, Takesita T, Ishii N, Kumaki S, Nakamura M, Sugamura K: Reconstitution of functional interleukin 2 receptor complexes on fibroblastoid cells: involvement of the cytoplasmic domain of the USA. 1993; 4127-31. 15.Banchereau J Ryback ME Interleukin 4 En The cytokine handbook 2nd ed chain in two distinct signaling pathways. Proc. Natl. Acad.

Academic press, New York 1994p 99-127. 16. Takatsu K Interleukin 5. Curr Opin Immunol 1992; 4:299-306. 17. Mosmann TR Properties and functions of Interleukin 10. Adv Immunol 1994; 56: 126 18 Farrar MA, Schreiber RD The molecular biology of Interfern gamma and its receptor. Annu Rev Immunol 11:571-611. 19.Kerl JH, Alvarez-Mon M, Delsing GA, Fauci AS: Lymphotoxin is an important T cellderived growth factor for human B cells. Science. 1987; 238: 1144-6. 20. Kehrl JH, Alvarez-Mon M, Fauci AS: Type B TGF suppresses the grow and differentiation of human B and T lymphocytes. Clin Res. 1985; 33: 610.

Palabras clave Citocinas - quimocinas - interleucina - TNF - interfern - Th1 - Th2 - respuesta inflamatoria - respuesta humoral - IFN - IL - receptores solubles -MIP - RANTES -CD27 - CD70 - CD40- CD40L -CD28- CTLA-4

Tabla 1. Nomenclatura de las citocinas y sus receptores.

Citocina Sinnimos Peso molecular kD Receptor Peso molecular kD

IL-1 IL-1 IL-2

Factor Activador de los Linfocitos (LAF) Pirgeno Endgeno (EP) Factor de crecimiento de linfocitos T (T-CGF) Factor cooperador de la citotoxicidad (KHF) Factor de crecimiento de mastocitos BSF-1 BCGF-1 T cell replacing factor I Factor II de crecimiento de clulas B Factor potenciador de la sntesis de IgA Factor estimulador de colonias de eosinfilos Interfern b2 BSF-2 Limpoyetina I Factor activador de los neutrfilos NAF-1 Factor inhibidor de la sntesis de citocinas (CSIF). Factor estimulador de las clulas NK

17

CD121a CD121b CD25 CD122 IL-2R

80 68 55 75 64

15.5

IL-3 IL-4 IL-5

20.32 18-20 24

CD124 CD125

140

IL-6 IL-7 IL-8 IL-10 IL-12

21-26 25 8-10 17-21 p35 p40 9-17 50-60 14-15 20-30 17 25 25

CD126 CD130 CD127 CDw128 CD114 IL-12R

80 130 75 58-67 110 110

IL-13 P-600 IL-14 IL-15 GM-CSF Caquectina TNF TNF TGF Linfotoxina (LT)

IFN IFN IFN

Interfern leucocitario Interfern fibroblastoideo Interfern inmune, interfern tipo II

20-25

CD116 CD120a CD120b CD120a CD120b Tipo I Tipo II Tipo III CD118 CD118 CD119

75-85 55 75 55 75 53 70-85 250-350

90

Tabla 2. Caractersticas comunes de las citocinas. 1.-Secreccin transitoria. 2.-Radio de accin corto. 3.-Actuacin a travs de receptores especficos. 4.-Produccin por diversos tipos celulares. 5.- Solapamiento: Hay diferentes citocinas con los mismos efectos. 6.-Cascada de Citocinas: Puede alterar la produccin de otras citocinas. 7.-Sinergismo/Antagonismo: La presencia de varias citocinas puede hacer variar la respuesta de forma cualitativa. 8.- Pleiotropismo: Una citocina tiene mltiples dianas y acciones. 9.- Cada tipo celular presenta receptores para mltiples citocinas. 10.-Transmodulacin a travs del receptor:

Tabla 3. Clasificacin de las citocinas y sus receptores.

Familia Hematopoyticas Hematopoyticas Interferones Estructura de la citocina 4 hlice cadena corta 4 hlice cadena corta 4 hlice cadena corta 4 hlice cadena larga hoja plegada Clase del receptor dominio hemopoyetina dominio hemopoyetina IFNR Cadena compartida CD132 () CDw131 () Citocina IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-10, IL-12, IL-13, IL-15 IL-3, IL-5, GM-CSF IFN, IFN , IFN IL-6, IL-11 TNF, TNF , CD27-L, CD30-L, CD40-L, NGF hoja plegada Dominios Ig hoja plegada serina/treonina quinasa Tipo IgR IL-1, IL-1

Hematopoyticas Del TNF

dominio hemopoyetina TNFR/NGFR

CD130 (gp130)

Tabla 4. Patrones Th1 y Th2 de secrecin de citocinas. Citocina producida IL-2 IFN TNF TNF GM-CSF IL-3 IL-4 IL-5 IL-10 Th1 ++ ++ ++ ++ + + + Th2 + ++ ++ ++ ++ ++

Tabla 5. Polarizacin de los linfocitos T cooperadores hacia la produccin de IFN IL-4. Factores favorecedores Presencia de IL-2 + IFN Presencia de CTLs CD8+ activados APC adherentes Antgeno que requiera fagocitosis Patgenos intracelulares Dosis bajas de antgenos Presencia de IL-12 Factores inhibidores Presencia de clulas CD16+ Presencia de IL-10 o IL-4 Presencia de clulas productoras de IL-4 Polarizacin hacia la produccin de IL-4 Factores favorecedores activadas Presencia de IL-4 Clulas B como APC Antgenos solubles Bajas dosis de ciclosporina A Factores inhibidores Dosis altas de antgenos Presencia de IFN Presencia de CTLs CD8+ o clulas productoras de IFN activadas Presencia de IL-12 Presencia de clulas CD16+ La polarizacin de la respuesta de las clulas T cooperadoras hacia la produccin de IFN IL-4 viene determinada por factores todava mal conocidos que dependen de

Polarizacin hacia produccin de IFN

la naturaleza y va de entrada del antgeno y del trasfondo gentico del husped. La identificacin de las clulas productoras de IL-4 o IFN depende de criterios

funcionales como la produccin de citocinas, ya que no se ha logrado todava establecer la existencia de marcadores de superficie caractersticos de estos subtipos celulares.

Tabla 6. Clulas productoras de citocinas.

Clulas T Immunidad natural + IFN IFN ++ TNF + IL-1 IL-1 IL-6 + IL-8 + Citocina Clulas B + + + NK + + + Monocitos Neutrfilos +++ ++ +++ + + + + + + Fibroblastos + + + + ++ + +++ + + + + + + Fibroblastos Fibroblastos Hepatocitos Astrocitos fibroblastos Clulas endoteliales Mastocitos Queratinocitos Otras clulas

IL-12 + IL-15 Activacin T IL-2 +++ Cooperadoras sntesis anticuerpos IL-4 + IL-13 IL-14 + +

Basfilos Clulas dendrticas foliculares

Proinflamatorias Th1 + IFN + TNF Th2 IL-5 + Inhibidoras IL-1Ra TGF

+ +

+ + + + + + + Condrocitos Osteoclastos Osteoblastos Plaquetas Fibroblastos + Basfilos Eosinfilos

Antiinflamatorias IL-10 +