xLD = xb + 3 sb (2)
Em espectrometria de absoro atmica (AAS), uma curva de calibrao utilizada para determinar a concentrao em uma amostra desconhecida, a partir de solues padro de concentrao conhecida. A representao matemtica desta curva de calibrao, cuja funo de regresso linear de primeiro grau, que melhor passa por todos os pontos, dada pela equao:
onde: a = coeficiente angular ou inclinao da curva de regresso linear b = coeficiente linear ou ponto de interceptao da curva de regresso linear no eixo das ordenadas Para determinao do LD: Absorbncia = xLD Concentrao = CLD = LD b = xb Assim, a partir de equaes (2) e (3), (2) xLD = xb + 3.sb (3) xLD = (inclinao . LD) + xb xb + 3.sb = (inclinao . LD) + xb 3 sb = inclinao . LD
LD = 3 sb / inclinao
(4)
A inclinao na equao (4), tambm conhecida como sensibilidade, determinada atravs de:
.
x
.
C
onde: x1 = absorbncia mdia da primeira soluo padro xb = absorbncia mdia da soluo de branco de amostra C1 = concentrao da primeira soluo padro Cb= concentrao da soluo em branco = 0 Na equao (5), a inclinao determinada utilizando uma soluo padro de concentrao conhecida e um branco de amostra. Preferencialmente, a concentrao da soluo padro deve estar prxima concentrao do LD. Como um exemplo, uma estimativa aproximada pode ser obtida a partir da concentrao caracterstica (equivalente a 1% de absoro) normalmente a concentrao de C1 aproximadamente 10 vezes superior concentrao caracterstica de um determinado analito. Alternativamente, a inclinao tambm pode ser determinada por uma srie de solues padro, para obteno de uma curva de calibrao - na maior parte dos instrumentos AAS, a inclinao calculada automaticamente pelo software e exibidos nos resultados. Substituindo a equao (5) na equao (4), tm-se:
Conc (ppm) Abs 0,0 0,0036 0,2 0,0533 0,5 0,1222 1,0 0,2241 Desvio padro do branco para 10 medidas: 0,0001295
Com base na tabela acima, sb = 0,0001295; C1 = 0,2 ppm; x1 = 0,0533; xb = 0,0036 Assim, LD = (3 . 0,0001295 . 0,2) / (0,0533 - 0,0036) = 0,0016 ppm Alternativamente, o clculo usando o valor obtido para inclinao da curva de regresso linear tambm pode ser utilizado para determinao do LD: Abs = 0,219383 Conc + 0,00756212 Da equao (4), LD = 3 sb / inclinao = 3 . 0,0001295 / 0,219383 = 0,0017 ppm Limite de Quantificao O LD calculado anteriormente no pode ser usado para expressar com exatido a concentrao de uma amostra, ou de outra forma, ser considerado como garantia de valor mnimo a ser referenciado em caso de no ser detectado nenhum sinal analtico. A razo para isto um tanto bvia, uma vez que valores estatsticos de incerteza do processo de calibrao, necessrio determinao do LD, esto includos no clculo do LD. Deste modo, afirmaes tpicas como menor do que o limite de deteco no devem ser utilizadas, vez que no podem ser justificadas estaticamente. O valor limite que defina o quanto de uma amostra pode ser detectada e quantificada com elevada preciso estatstica, sendo este valor acima do LD anteriormente calculado, chamado de Limite de Quantificao, LQ ou LOQ. Desta forma, entende-se por LQ a concentrao de analito mnima que pode ser detectada quantitativamente com erro menor que 5% (P=95%). Isto significa dizer que embora o sinal entre o LD e o LQ possa ser positivo, afirmaes quantitativas acerca do resultado de anlise so inadmissveis.
Uma vez que o LQ deve incluir anlise de varincia dos dados analticos de calibrao e isto requer uma grande quantidade de dados e informaes, este freqentemente calculado atravs da frmula a seguir.
LQ = 10 sb / inclinao (7)
De forma anloga a determinao do LD, onde se pode inferir algo sobre um analito presente na amostra sem entretanto realizar sua quantificao, pode-se aumentar o intervalo de confiana ou probabilidade, para clculo do LQ, sendo para tanto utilizado o fator 10 em seu clculo.
1 2
nd
Edition (1997).
Por branco de amostra, entende-se uma soluo de iguais caractersticas ao solvente de amostra,
excetuando-se a presena dos analitos de interesse anlise. importante salientar que a utilizao de solues de branco com diferentes caractersticas do solvente de anlise pode ocasionar erros no clculo de LD referente a uma determinada anlise. Por outro lado, este fato exemplifica a variao do LD e LQ observados com a utilizao de diferentes tipos de solventes e matrizes.