Introduo  IL-6  Expresso no crebro.  Aumenta expresso em patologia e injria.

 Isquemia -> aumenta IL-6  IL-6 Intracerebroventricular -> reduz danos de isquemia  Importante inibidor exgeno da morte celular em modelo de isquemia. Atividade mitognica Pode induzir Bcl-2 PI3K-Akt tambm so ativado em resposta a IL-6

 IL-6 resgata neurnios e oligodendrcitos provenientes da morte neuronal induzida por NMDA e degenerao de oligodendrcitos.  Contraditoriamente, o aumento endgeno ou exgeno de IL-6 no crebro contribui para a patognese de doenas neurodegenerativas.  Entendendo a dicotomia -> melhor estratgias teraputicas.

Objetivo  Estudar a cascata downstream da IL-6 que leva ao seu efeito neuroprotetor.

Materiais e Mtodos  Cultura de clula:  Ratos DPN 8  Cerebelo removido.  Adio de cytosine arabinoside para inibir proliferao glial.

 Mostraram que: exposio crnica de IL-6 em neurnios granulares cerebelar (CGNs) protege contra neurotoxicidade induzida por NMDA.  Bcl-2  Famlia de genes e protenas a que do origem.  Pr-apopttico: Bax, Bad, Bak e Bid.  Anti-apopttico: Bcl-2, Bcl-xl, e Bcl-w.  Exposio a droga:  40 ou 120ng/mL de IL-6 foi adicionado na cultura de CGN nos dias 1, 4 e 7.  AG490 (inibidor da JNK) e LY294002 (inibidor da PI3K)foram injetados antes da IL-6.  NMDA foi aplicado nas culturas de 8 dias a 100M por 30min.  WB:  Mostraram que: exposio crnica de IL-6 em neurnios granulares cerebelar (CGNs) protege contra neurotoxicidade induzida por NMDA.  Bcl-2  Famlia de genes e protenas a que do origem.  Pr-apopttico: Bax, Bad, Bak e Bid.  Anti-apopttico: Bcl-2, Bcl-xl, e Bcl-w.  Marcao Hoechst 33342:  CGNs em cultura por 8 dias -> clulas fixadas.  10M por 15min no escuro  Observao da mudana do ncleo  Ver expresso de Bcl-2, Bax, caspase-3 clivada, STAT 3 fosforilada e Akt fosforilada.  PCR:  Ver expresso de Bcl-2, Bax e caspase-3

Discusso  PI3K-Akt determina morte ou sobrevida de  Produo maior de Bcl-2, Bax e caspase-3 em baixas [IL-6]->efeito precisa de concentrao tima.  Efeito neuroprotetor depende tambm da diminuio do dano em neurnio. Ex: infuso de NMDA no estriado resulta em perda de neurnios GABA e ACh. Adio de IL-6 s reduz a perda do ACh.  Diferentes respostas da IL-6 entre diferentes tipos neuronais explica efeito distinto.
Efeito neuroprotetor depende da regulao das ptns e mRNA pr e anti-apoptticos e da diminuio do dano do neurnio. Ach - colinrgico

clulas em crebro isqumico.  Axotomia em neonatos inibio da via Akt leva a morte neuronal.  Axotomia em adultos overexpresso da atividade Akt levou a acelerada regenerao.  No se sabe se a IL-6 est envolvida nestes casos.

 Aumento da IL-6 -> aumenta fosforilao Akt.  Adio de LY294002 previne esse aumento -> no inibe nveis basais.  Clulas PC12-> efeito anti-apopttico mediado por essa via.  Clulas carcinoma-> PI3K-Akt up-regulate ptn Mcl-1 por IL-6. Essa via e JNK/STAT esto envolvidas na atividade de sobrevida da clula.

 Receptor solvel necessrio para ativar efeito neurotrfico:  Ex: neurnios do GRD secretam IL-6, mas a citocina endgena no aumenta a sobrevida do neurnio in vitro e exgena adio de receptor solvel o torna responsivo.  Ex2: apenas a adio de exgeno IL-6 e receptor solvel levam a significante efeito neuroprotetor contra dano e apoptose induzidos por NMDA na retina.  Sinalizao pelo receptor da IL-6 est envolvido com ativao da JAK/STAT, Ras-MAPK e/ou PI3K-Akt:  IL-6 induz fosforilao da STAT3, inibida por AG490-> no inibe os nveis basais.  AG ->especfico inibidor da JAK/STAT3.  Via de sinalizao implicada com neuroproteo da IL-6 contra apoptose em neonatos induzida por NMDA. reverte a diminuio da viabilidade neuronal e aumento de Ca2+ intracelular. Concluso  IL-6 protege neurnios contra diminuio da expresso de Bcl-2 e aumento da expresso de Bax, caspase-3 e do aumento do nmero de neurnios apoptticos induzidos por NMDA.  A via de sinalizao JAK/STAT3 e PI3K- Akt medeiam a ao neuroprotetora da IL-6. Neuroproteo da IL-6 sugere-se que requer cross-talk entre as vias JNK/STAT e PI3K-Akt.  Cascata que medeia crescimento, sobrevida ou reparo complicada e depende do tipo celular e funo. Cross-talk