microbiology

(PEMERIKSAAN BAKTERI PEWARNAAN GRAM DENGAN MIKROSKOP)

MIKROBIOLOGI

Pemeriksaan mikroskopik langsung tanpa pengecatan akan menghasilkan hasil yang kurang bagus karena kontras warna antara sel bakteri dan background. Dengan pengecatan bakteri akan terlihat jelas perbedaannya dengan background. Pewarnaan gram adalah pewarnaan diferential. TUJUAN KLINIS: Diagnostik mikrobiologi Diagnosis penyakit infeksi 5 MACAM MIKROSKOP: Light microscope Dark-field microscope Fluorescence microscope Phase microscope Electron microscope FAKTOR UNTUK MENDAPATKAN KUALITAS DETAIL GAMBAR: Perbesaran: Semakin pendek jarak focus, perbesaran semakin besar. Semakin panjang jarak focus, perbesaran semakin kecil. Resolusi: kemampuan lensa objektif untuk memisahkan gambar dari 2 partikel yang jaraknya berdekatan. 3 TEKNIK PENGECATAN: Simple staining: Hanya menggunakan satu cat. Sehingga bakteri dan sekitarnya memiliki warna yang sama, hanya intensitasnya yang berbeda. Diferential staining: Menggunakan 2 cat atau lebih. Pengecatan ini dapat digunakan untuk identifikasi karena masing-masing bakteri mempunyai reaksi tertentu. Special staining: Digunakan untuk memeriksa anggota tubuh bakteri. PENGELOMPOKAN BAKTERI BERDASARKAN HASIL PENGECATAN: Bakteri gram positif (resisten terhadap alcohol) Bakteri gram negative (tidak resisten terhadap alcohol) PERALATAN DAN BAHAN: Light microscope Kaca slide Pembakar Bunsen Loop Specimen atau bakteri dari media kultur Formalin 1% Minyak immerse yudaherdantoproduction

microbiology
Gram A (ungu) o Kristal violet o Alkohol 95% o Amonium oksalat 1% o Aquadest Gram B (coklat) o Iodium o Kalium iodine o Aquadest Gram C o Aseton o Alkohol Gram D (merah) o Safranin o Alkohol 95% o Aquadest 2gram 20ml 0,8gram 80ml 1gram 2gram 300ml 50ml 50ml 0,25gram 10ml 90ml

FUNGSI: Gram A: Mewarnai bakteri gram positif Gram B: Mengikatkan gram A pada sel Gram C: Melarutkan zat warna Gram D: Mewarnai bakteri gram negative Pemanasan: Untuk fiksasi LANGKAH KERJA: Persiapan preparat: Panaskan slide kaca (untuk membersihkan dari lipid) kemudian biarkan didinginkan. Ambil specimen dengan loop yang steril kemudian oleskan diatas slide kaca setipis mungkin. Panaskan slide kaca hingga olesan mongering dalam jarak 20cm dari pemanas. Teteskan formalin 1% satu tetes dan biarkan mengering. Pengecatan gram: Genangi preparat dengan cat gram A selama 1-3 menit. Setelah itu cat dibuang, preparat tanpa dibilas dengan air. Bakteri akan bewarna ungu. Genangi preparat dengan cat gram B selama 1 menit. Kemudian cat dibuang dan preparat dibilas air. Dengan pemberian gram B warna bakteri menjadi lebih baik. Preparat ditetesi cat gram C, akan menghasilkan 2 kemungkinan: o Warna bakteri tetap ungu karena tidak luntur dengan alcohol (bakteri gram positif) o Warna bakteri luntur, menjadi tidak berwarna karena tidak resisten pada alcohol (bakteri gram negatif)

yudaherdantoproduction

microbiology
Genangi preparat dengan cat gram D selama 1-2 menit. Akibatnya: o Bakteri gram positif yang sudah jenuh mengikat gram A, tidak mampu mengikat gram D. (warna akhir violet). o Bakteri gram negative akan mengikat gram D karena gram A telah luntur. (warna akhir merah).

BENTUK-BENTUK BAKTERI: Coccus Bacillus Spirochete Spirillum PERBEDAAN BAKTERI GRAM POSITIF DAN NEGATIVE:

GRAM POSITIF
Resisten. Tebal. Penisiline, asam, iodine, dan zat warna basa. Kapsul-Peptidoglikanmembran sitoplasmik. Asam teikoat: Membrane ini dihubungkan ke membrane sitoplasmik. Polisakarida: Mannosa, arabinosa, galaktosa, rhawnosa.

PEMBEDA
TERHADAP ALKOHOL PEPTIDOGLIKAN PEKA TERHADAP SELUBUNG SEL

GRAM NEGATIVE
Tidak resisten. Tipis. Alkali, antibody, dan komplemen. Kapsul-membran luarpeptidoglikan-membran sitoplasmik. Lipoprotein: menghubungkan membrane luar dengan peptidoglikan. Lipopolisakarida: Pada membrane luar. Porins: Protein penghubung yang memasukkan komponen hidrofilik dengan berat molekul kecil (difusi pasif). Merah. - Coccus: Nisseria, Velonella - Bacillus: E.Coli, Shigella, Salmonella, Hemophillus, Brucella.

KOMPONEN KHUSUS

Ungu. - Coccus: Streptococcus, Pneumococcus, Peptococcus. - Bacillus: Bacilus, Mycobacteria, clostridia.

WARNA PENGECATAN CONTOH

yudaherdantoproduction

microbiology

Tentang Penulis
Nama: Nama Dwi Yuda Herdanto Nickname: Nickname Yuda Danto Dantox Agama: Agama Islam Kelamin: Jenis Kelamin Laki-Laki Darah: Golongan Darah B TTL: TTL Yogyakarta, 27 Januari 1990 Alamat: Alamat Jalan Prof. Dr. Soepomo 131 RT 35 RW 09 Warungboto UmbulharjoYogyakarta Indonesia Mail: E-Mail yuda27011990@yahoo.co.id ; : yudaherdanto@gmail.com HP: Nomor HP + 62 8586 8 2727 87 Pendidikan: Riwayat Pendidikan

TK PEMBINA Yogyakarta TK TUNAS HARAPAN Sub Unit Dharma Wanita Pertamina Pangkalan Susu, Sumatera Utara SD 2 Dharma Patra YKPP Pangkalan Susu, Sumatera Utara SD Dharma Patra 1 YKPP Rantau, Aceh Timur SD GLAGAH 1 Yogyakarta SMP N 4 Yogyakarta SMAN 3 Yogyakarta UNIVERSITAS GADJAH MADA [Fakultas KEDOKTERAN Program Studi PENDIDIKAN DOKTER]

yudaherdantoproduction