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Apostila de patologia clnica Adriane Pimenta da Costa Val Bicalho Rubens Antnio Carneiro ndice Fundamentos de hematologia

Composio do sangue Volume sangneo Sistema hematopoitico/ltico Hematopoiese Eritropoie e Exigncias Nutricionais da Hematopoiese Eritropoiese ineficaz Eritropoiese anorm al Anticoagulantes Colheita de sangue Colheita de material e exame da medula ssea Bibliografia Literatura Recomendada Estudo do eritron Introduo Eritrograma Contagem total de eritrcitos Dosagem total de hemoglobina Hema tcrito (Hc) ou volume globular (VG) ndices hematimtricos ou valores globulares mdios Bibliografia Literatura recomendada Avaliao das anemias Introduo Sintomatologia clnica Colheirta Classificao das anemias Hemoparasitas Intens idade da anemia Bibliografia e leitura recomendada Avaliao das policitemias

Introduo Sintomatologia Clnica Classificao das policitemias Avaliao laboratorial Bib grafia e leitura recomendada Os leucticos Leucopoiese / compartimentos Caractersticas dos leuccitos Formas de atuao dos leuccit os Os leuccitos e a inflamao Referncias bibliogrficas

Interpretao clnica das alteraes no nmero dos leuccitos Alteraes no nmero de leuc rculao Respostas leucocitrias nos ruminantes Contagens leucocitrias absolutas e relativas Interpretao do leucograma Referncias bibliogrficas Hemostasia Introduo Sintomatologia clnica Fatores envolvidos Hemostasia primria Hemostasia secu ndria Fibrinlise Avaliao laboratorial Esquema diagnstico Anormalidades de hemostasia Nomenclatura internacional dos fatores de coagulao do sangue Avaliao laboratorial do lquido cfalo raquidiano

Introduo Produo / circulao Funes Colheita Riscos e contra indicaes Tcnica de col laboratorial Bibliografia e literatura recomendada Aspectos laboratoriais das afeces de pele Introduo Colheita Artrpodes Helmintos Fungos Avaliao laboratorial do sistema renal

Sistema renal Formao da urina Concentrao e diluio da urina Rim, rgo endcrino Avali rpretao do exame de urina Caractersticas da qumica urinria (Elementos anormais) Bibli ografia Literatura recomendada

Avaliao laboratorial das doenas hepticas

Introduo Anatomia Circulao heptica Sistema biliar e produo de bile Funes hepticas e doenas hepticas Sinais clnicos Mecanismo da leso Avaliao Mecanismo da leso Testes icativos de leses hepatocelulares Testes relacionados com captao, conjugao, e secreo Testes relacionados com clareamento portal Testes relacionados com a sntese heptic a Exame de fezes

Introduo Colheita Conservao Exame fsico Elementos anormais Exame qumico Exame microsc co Mtodos de pesquisa de parasitas Tabelas Avaliao laboratorial das efuses corporais Introduo Diagnstico das efuses Exame laboratorial dos fludos corporais Fundamentos de hematologia ndice

Composio do sangue Volume sangneo Sistema hematopoitico/ltico Hematopoiese Eritropoie e Exigncias Nutricionais da Hematopoiese Eritropoiese ineficaz Eritropoiese anorm al Anticoagulantes Colheita de sangue Colheita de material e exame da medula ssea Bibliografia Literatura Recomendada Composio do sangue O sangue um tecido formado por trs tipos de clulas: os glbulos vermelhos, tambm conh ecidos como hemcias ou eritrcitos; os glbulos brancos ou leuccitos e ainda as plaque tas, que so fragmentos de citoplasma dos megacaricitos e por um meio intercelular, denominado plasma, que por sua vez composto de 91,5% de gua, 7,5% de slidos orgnic os. Protenas, tais como albumina, globulinas e o fibrinognio e demais fatores de c oagulao respondem por 7% dos slidos orgnicos do plasma, os 0,5% restantes so um conju nto de substncias nitrogenadas, gorduras neutras, colesterol, fosfolipdeos, glicos e, enzimas e hormnios. A parte restante compe-se de slidos inorgnicos, os minerais c omo Na, K, Mg, Cu, e HCO3. Volume sangneo

O sangue responsvel por cerca de 7,5% do peso de um animal. Esse valor mantm-se es tvel, pela passagem de lquidos intersticiais para o meio vascular e vice e versa. Mas alguns fatores, como a ingesto de lquidos, a produo de gua metablica e perda de corporal podem determinar variaes neste percentual. Sistema hematopoitico/ltico

Sabemos que as clulas do sangue possuem natureza temporria, ou seja, apresentam um perodo de vida curto e limitado. Portanto, para que se mantenha uma quantidade e stvel destas clulas na circulao necessria a existncia de um conjunto de rgos e te hamados de sistema hematopoitico/ltico, que tem a funo de produzir e destruir glbulos do sangue e plaquetas, de modo a manter a populao sempre constante. Medula ssea o tecido existente no interior das cavidades sseas, podendo ser divido em dois me ios, o intravascular e o extravascular, sendo que neste ltimo so produzidos os glbu

los brancos, vermelhos e plaquetas. Sistema monoctico fagocitrio (S.M.F.) um conjunto de clulas com poder fagocitrio que destri os eritrcitos velhos ou anorma is, desmembra a hemoglobina em globina e bilirrubina livre e armazena o ferro. O S.M.F. encontra-se espalhado por todo o organismo, mas sua maior concentrao nos rgo s linfticos, principalmente o bao. Bao e linfonodos Produzem linfcitos T e B, alm de serem os locais de maior concentrao do S.M.F. Mantm a sua capacidade hematopoitica embrionria por toda a vida adulta, que pode ser aci onada nos casos de anemias regenerativas. O bao ainda um importante local de rese rva de eritrcitos. Fgado o local de reserva de vitamina B12, cido flico e ferro, elementos necessrios hemato poiese e sntese de hemoglobina. o local predominante de produo de eritropoietina no feto. Nos animais adultos, produz ainda uma pequena quantidade desta glicoproten a, exceto no co. Tambm mantm sua capacidade embrionria de hematopoiese. Mucosa estomacal Produz cido clordrico, que libera o ferro das molculas complexas e o fator intrnseco , que facilita a absoro da vitamina B12. Mucosa intestinal Absorve vitamina B12, folatos e ferro e ainda elimina boa parte da bilirrubina. Rim Produz eritropoietina e trombopoietina e elimina uma parte da bilirrubina. Hematopoiese Pode ser definida como a produo de clulas do sangue, compreendendo ento a eritropoie se, a leucopoiese e a trombocitopoiese. Pode ser dividida em duas fases, a hemat opoiese pr-natal e a hematopoiese ps natal. medular comea aproximadamente na metade da gestao e perdura por toda a vida

Os primeiros indcios da hematopoiese so extra-embrionrios. Esta fase se inicia em t orno do dcimo dia de gestao. So observados, no saco vitelnico, as primeiras ilhas de clulas eritropoiticas, juntamente com os primeiros precursores dos leuccitos. Logo a seguir vem a hematopoiese embrionria, que comea no final do primeiro tero de gest ao e composta por trs fases. A primeira heptica, quando a eritropoiese predomina no fgado e a leucopoiese se torna mais evidente. Em seguida vem a fase esplnica/linfti ca, quando estes acontecimentos tm lugar tambm no bao e linfonodos. A ltima fase, qu e a A hematopoiese ps-natal limita-se exclusivamente a medula ssea e pode ser dividida em duas fases: a infantil, que envolve a medula ssea de todos os ossos e a adult a, quando a atividade a hematopoitica se limita aos ossos chatos a s extremidades dos ossos longos. Nesta fase, as demais medulas sseas so tomadas por tecido adipos o e se tornam amarelas. Porm, em casos de necessidade a medula amarela volta a se r vermelha, ou seja, recupera sua atividade hematopoitica, o que pode ocorrer com os demais rgos que desempenharam funes a hematopoiticas na vida pr-natal. Formao das clulas do sangue

Atualmente, a teoria mais aceita que exista na medula ssea uma clula pluripotencia l indiferenciada. Ao se dividir, esta clula d origem a duas clulas: uma igual a si prpria, destinada a manter a populao constante e a uma outra clula chamada Unidade F ormadora de Colnias (UFC). A UFC pode ser uma UFCe, formadora de linhagem eritroct ica; uma UFCmg, formadora de linhagem megacarioctica ou uma UFCmm, formadora de l inhagem mielomonoctica, que por sua vez da origem a duas linhagens, a mieloctica o u granuloctica e a monoctica. A clula tronco provavelmente d tambm origem a clula que originar os linfcitos. Aps formadas, as UFCs seguem um processo de amadurecimento, com vrias divises, dando origem a um clone de clulas de seu grupo. Eritropoiese Fator estimulante

O fator estimulante para a produo de eritrcitos a eritropoietina. Este hormnio atua sobre a clula tronco da medula ssea, determinando a sua diviso e a produo da UFCe. O amadurecimento da clulas tronco e precursora ocorrem sob o estmulo de grandes conc entraes de eritropoietina. As quatro divises que ocorrem (de rubroblasto at metarubrc ito) so mitticas, e acontecem paralelamente com a maturao das clulas. Estes dois proc essos so caracterizados pelos seguintes eventos: perda dos nuclolos, diminuio do tam anho da clula e do ncleo, aumento na condensao da cromatina nuclear, diminuio da baso ilia nuclear e aumento na policromasia, seguida ento de normocromasia e sntese de hemoglobina. Ocorre, por fim, perda da capacidade mittica. Tanto as divises como a maturao dos eritrcitos ocorrem sob o estmulo de concentraes basais de eritropoietina Em situaes normais, o nvel basal de eritropoietina fornece estmulos necessrios para a reposio de eritrcitos perdidos, mantendo a massa normal destas clulas. Quando h tran sporte insuficiente de O2 para os tecidos, sensores renais localizados no aparel ho justaglomerular dos rins sinalizam para que haja aumento na secreo de eritropoi etina. A eritropoietina possui duas origens: produzida na medula renal tanto na forma de eritropoietina ativa como de pr-eritropoietina, que ativada por um fator srico no momento da liberao e nas clulas de Kupfer, as produzem uma molcula precurso ra, que ativada por uma fator renal para produzir eritropoietina ativa. O rim a n ica fonte de eritropoietina no co, ao contrrio das outras espcies. UFCe Como foi visto anteriormente, a clula tronco se divide em duas, uma igual a si e outra que dar origem Unidade Formadora de Colnias da linha eritroctica ou UFCe. Rubroblasto

a clula que vem em seguida a UFCe, tambm chamado de proeritoblasto. uma clula trs v zes maior que o eritrcito maduro, tem ncleo geralmente central, que ocupa quase to da a rea da clula e formado por cromatina de aspecto delicado, onde pode-se ver do is ou at trs nuclolos. Apresenta DNA e RNA em atividade, alm da sntese proteca, mas n sintetiza hemoglobina. Pr-rubrcito O rubroblasto se divide em duas clulas chamadas de pr-rubrcito ou eritroblasto. um pouco menor que o rubroblasto, a cromatina um pouco mais grosseira e os nuclolos menos evidentes. Nesta fase inicia-se a sntese de hemoglobina, que persiste at a f ase de reticulcitos. Rubrcito basfilo O pr-rubrcito divide-se em dois rubrcitos basfilos ou eritroblasto basfilo. Nesta fas e, o citoplasma j se torna um pouco acidfilo, devido ao acmulo de hemoglobina j nele produzida. Ocorre diminuio da sntese de cidos. uma clula bem menor que a anterior, ncleo j no apresenta nuclolos e a cromatina bem mais compacta.

Rubrcito policromtico O rubrcito basfilo se divide em dois rubrcitos policromticos ou eritroblastos policr omatfilos. Nesta fase, ocorre a finalizao da sntese de DNA, que por sua vez controla da pelo aumento da sntese de hemoglobina. Metarubrcito O rubrcito policromtico se divide em dois metarubrcitos. a menor clula dos precursor es nucleados dos eritrcitos e neste estgio o ncleo apenas uma mancha de cromatina c ompacta. Neste estgio est o auge da produo de hemoglobina. Reticulcito

O metarubrcito no se divide mais, apenas amadurece, perde o ncleo e passa a se cham ar reticulcito. A substncia basfila dessas clulas o RNA, pode se apresentar em forma s de grnulos. Quando corados pelo novo azul de metileno ou outro corante vital, e sta substncia basfila precipita-se em forma de retculos, da o nome reticulcito. Quand o corados pelos mtodos usuais, os reticulcitos so vistos como clulas no nucleadas, um pouco maiores que os eritrcitos adultos, apresentando certa policromatofilia. Es sas clulas no so achadas normalmente na circulao de cavalos e ruminantes sadios, pois toda a maturao eritrocitria nestas espcies ocorre dentro da medula ssea. Em sunos sa ios so observados cerca de 2% de reticulcitos na circulao. J em ces e gatos normais p dem ser encontrados em percentuais que variam de 0,5-1,5; sendo que nestes ltimos animais se apresentam em duas formas: os reticulcitos agregados e ponteados e re fletem diferenas significativas no estdio de maturao e tempo de vida no sangue. Os r eticulcitos agregados apresentam a substncia basfila de forma linear e se maturam e m ponteados, que apresentam apenas pequenos pontos de retculo, sem formaes lineares . A contagem de reticulcitos pode ser usada na avaliao da resposta individual a uma anemia em todos os animais e avaliao da terapia usada, com exceo dos eqinos, pois ne stes animais os reticulcitos s so liberados da medula aps sua total maturao. Cerca de 20% da hemoglobina contida nos eritrcitos ainda sintetizada nos reticulcitos. Eritrcitos

Os reticulcitos se maturam em eritrcitos ou hemcias, clulas anucleadas e sem incluses de retculo. Os eritrcitos so as clulas mais numerosas no sangue, seu citoplasma for mado por 1/3 de hemoglobina e 2/3 de gua. Sua funo carrear hemoglobina, que por sua vez, transporta O2 dos pulmes para os tecidos e CO2 dos tecidos para os pulmes. A membrana eritrocitria formada por duas camadas proticas, envolvendo uma camada de lipdios; flexvel permitindo a deformao e passagem da clula pelos estreitos sinusid do bao e dos tecidos. A medida que a clula envelhece e flexibilidade vai diminuind o, no consegue mais atravessar os sinusides do bao e ento fagocitada pelo S.M.F. Exigncias Nutricionais da Hematopoiese Protenas So extremamente necessrias na formao da globina Vitaminas Em especial, a riboflavina ou vitamina B2, a piridoxina ou vitamina B6, a niacin a, o cido flico, a tiamina e a vitamina B12, sendo esta ltima extremamente necessria diviso das fases nucleadas das clulas. Minerais O mais importante o ferro, utilizado na sntese do heme. Outros minerais important es na eritropoiese so o cobalto, necessrio sntese da vitamina B12 e o cobre, co-fat or da enzima ALA-dehidrase, necessria sntese do heme. Lipdios

Os lipdios so integrantes da membrana do eritrcito. Alm disto, o colesterol funciona como regulador da resistncia osmtica da clula. Eritropoiese ineficaz Este termo designa a quantidade de eritrcitos que morrem ainda no interior da med ula, sem chegar a circulao. A taxa de eritropoiese ineficaz cerca de 10% na maiori a das espcies, mas pode estar aumentada em algumas doenas. Eritropoiese anormal Na ausncia dos fatores apropriados a eritropoiese, como por exemplo os fatores nu tricionais, este processo pode ocorrer de forma anormal, sendo lanadas na circulao eritrcitos com teor de hemoglobina incompleto ou clulas atpicas, deficientes em nmer o ou com anormalidades fisiolgicas. Na eritropoiese anormal, em alguns casos, pod e ser produzido nmero excessivo de eritrcitos. Anticoagulantes EDTA o cido etilenodiaminotetractico. Este anticoagulante o mais utilizado na rotina do s laboratrios pois possuem um excelente poder preservador da morfologia e caracte rsticas de colorao das clulas vermelhas e brancas. Atuam como quelantes, evitando a coagulao do sangue ao se combinar com o clcio. No se deve exceder o nvel recomendado de EDTA, pois o excesso prejudica a determinao do hematcrito, provocando uma falsa diminuio deste devido ao "encarquilhamento" celular". As quantidades recomendadas so: 1 gota de uma soluo a 10% para 5 ml de sangue ou 1 mg de p por ml de sangue. Na rotina laboratorial o tubo que o contm identificado por uma tampa de borracha de cor roxa. Heparina Evita a coagulao do sangue ao interferir na converso de pr-trombina em trombina. Afe ta de forma intensa e prejudicial as qualidades de colorao dos leuccitos, por isto usado em provas bioqumicas, como por exemplo a dosagem de Ca++ no sangue. Tem um custo bastante elevado. Por estes motivos, utilizado na rotina como anticoagulan te, sem apresentar propriedades preservativas. Na rotina laboratorial o tubo que o contm identificado por uma tampa de borracha de cor verde. Fluoreto de sdio Atua como anticoagulante e conservador de glicose, por isto usado quando se dese ja a determinao da glicemia. Na rotina laboratorial o tubo que o contm identificado por uma tampa de borracha de cor cinza. Colheita de sangue Local de puno O local de puno varia de acordo com a espcie, quantidade de sangue a ser colhido e a finalidade laboratorial da amostra. Eqinos: Principalmente na veia jugular, quando se deseja maiores quantidades. Par a pequenas quantidades e pesquisa de hemoparasitas pode-se realizar uma pequena inciso na borda das orelhas, realizando-se o esfregao do sangue obtido logo em seg uida. Bovinos: Para obteno de maiores quantidades, utiliza-se a veia jugular, a veia mamr ia e a veia coccgea. Para pesquisa de hemoparasitas utiliza-se tambm a borda das o relhas, realizando-se o esfregao do sangue obtido logo em seguida Ces: Quando se deseja realizar pesquisas de hemoparasitas ou alguns testes sorolgi

cos, como por exemplo para a Leishmaniose Visceral, realiza-se um pequeno corte na ponta da orelha, recolhendo o sangue em um papel de filtro no segundo caso e realizando um esfregao sangneo normal no primeiro. Para obteno de maiores quantidades de sangue utiliza-se as veias jugular, ceflica ou safena. Gatos: Para maiores quantidades, utiliza-se a veia jugular e ceflica Para pesquis as de hemoparasitas, faz-se o mesmo procedimento que os outros animais. Sunos: Veia cava anterior ou seio venoso orbital. Para pesquisas de hemoparasitas , faz-se o mesmo procedimento que os outros animais. Tcnica de puno A realizao de anti-sepsia no local antes que a agulha seja introduzida na veia de suma importncia na colheita do sangue. Seria desejvel que a rea a ser puncionada fo sse depilada antes da anti-sepsia com lcool ou lcool iodado, mas na rotina hospita lar, este procedimento nem sempre feito; sendo resguardado para momentos em que se necessite melhor visualizao do vaso a ser puncionado. Aps a escolha do local adequado e realizao da ant-sepsia, faz-se ento o garrote, ist o , a compresso da veia escolhida cranialmente ao local desejado. Se for necessrio, pode-se distender a pele sobre a veia, para que esse fique mais firme. Em segui da, introduzir a agulha na pele com o bisel posicionado para cima, puncionando a veia. Soltar o garrote, recolher o sangue, retirar a agulha e comprimir a regio, para evitar a formao de hematomas. Cuidados a serem observados durante a colheita visando evitar a hemlise e danos a os leuccitos Observar se a agulha possui dimetro adequado quantidade de sangue que se deseja e ao calibre da veia escolhida; Aderir bem a seringa ao canho da agulha; Deixar o sangue fluir com o mnimo de vcuo; Evitar o bombeamento do sangue; Evitar o excesso de presso na seringa, pois isto poder provocar o colabamento da p arede da veia contra o bisel da agulha; Se o sangue parar de fluir, rotacionar cuidadosamente a seringa e a agulha, proc urando posicionamento mais adequado; Em sunos, pode ocorrer entupimento da agulha por tecido adiposo e cogulos de sangu e quando se tente puncionar mais que uma vez. Este ltimo fato pode acontecer tambm nos outros animais, especialmente os pequenos; Retirar a agulha da seringa ante s de colocar o sangue no recipiente. Colheita de material e exame da medula ssea

O exame da medula ssea fornece informaes a respeito do estado hematopoitico dos anim ais. Existem vrias ocasies em que este estudo se faz necessrio: anemias no regenerat ivas, neutropenias e trombocitopenias persistentes, quando so observadas clulas atp icas no sangue, sugerindo uma alterao neoplsica, intoxicao por drogas, radiao. o io de avaliar a resposta a anemias em cavalos. Coloraes especiais fornecem informaes sobre os estoques de ferro e ajuda na diferenciao entre anemias ferroprivas e por inflamao crnica. A medula ssea ativa vermelha, enquanto que aquela no produtiva amarela. Nos animai s adultos a maioria das cavidades sseas dos ossos longos so preenchidas por medula amarela, estando a atividade hematopoitica reservada aos ossos chatos, tais como

costelas, plvis e ossos da cabea, a ossos menores como as vrtebras e as extremidad es dos ossos longos. Portanto, para obteno de amostras para estudo, necessria a esc olha de algum destes stios. O esterno pode ser escolhido para este procedimento e m grandes animais, bem como a poro dorsal da oitava a dcima primeira costelas. A cr ista ilaca um local adequado para colheita tanto em grandes animais como nos pequ enos, sendo que nestes utiliza-se tambm a poro proximal do mero e do fmur.

A aspirao da material medular na maioria das vezes adequada para a avaliao desejada. Mas em alguns casos necessria a bipsia, especialmente quando se desejam informaes s obre a topografia e arquitetura medulares, quando no de obtm material aps diversas aspiraes ou h suspeita de mielofibrose. Existem agulhas adequadas tanto para obteno d e material por aspirao ou para bipsia. No casa de obteno do material por aspirao dev e ter o cuidado de no aspirar mais que 0,5 ml de material, pois pode haver contam inao com sangue, o que pode dificultar ou mesmo impedir o estudo do esfregao do mat erial obtido. Pela mesma razo no se deve aspirar material medular com muita fora. Bibliografia 1) JAIN, H.C. Schalm's Veterinary Hematology, Lea & Febiger, 4 ed, Philadelphia, 1986, 1221p. 2) NAVARRO, C.E.K.G., PACHALY, J.R. Manual de Hematologia Veterinria. Livraria Va rela, So Paulo, 1994, 163p. Literatura Recomendada 1) JAIN, H.C. Schalm's Veterinary Hematology, Lea & Febiger, 4 ed, Philadelphia, 1986, 1221p. Estudo do eritron ndice Introduo Eritrograma Contagem total de eritrcitos Dosagem total de hemoglobina Hema tcrito (Hc) ou volume globular (VG) ndices hematimtricos ou valores globulares mdios Bibliografia Literatura recomendada Introduo

O termo eritron define a massa total de eritrcitos circulantes associado ao tecid o eritropoitico da medula ssea. Os mtodos para a avaliao do estado funcional do eritr on so a contagem total de hemcias; a avaliao do teor de hemoglobina e a determinao do hematcrito. Estes trs valores, por sua vez, so utilizados para o clculo dos ndices He matimtricos ou seja, o Volume Globular Mdio (VGM), a Hemoglobina Globular Mdia (HGM ) e a Concentrao da Hemoglobina Globular Mdia (CHGM). Tais ndices so utilizados para a elucidao das alteraes do eritron, especialmente na avaliao dos tipos de anemia. Eritrograma a avaliao dos eritrcitos, do hematcrito e da hemoglobina, assim como a contagem e av aliao dos reticulcitos, nos casos necessrios. Contagem total de eritrcitos

Para a realizao da contagem total de eritrcitos podem ser utilizados vrios mtodos, qu e so divididos em manuais e automticos. O mtodo manual utilizado o mtodo do hemocitm tro ou seja, a Cmara de Neubauer. As contagens automticas so realizadas atravs de ap arelhos fotoeltricos, eletrnicos ou a lazer. Hemocitmetro: Utilizado quando em pequenos laboratrios, onde o volume de servios no

justifica a compra de um aparelho para a contagem por mtodos automticos. Este mtodo apresenta erros de at 20%.

Automticos: Utilizados em grandes laboratrios, onde o volume de exames justifica a compra de um aparelho destes. Podem ser fotoeltricos, que medem a quantidade de luz que transmitida atravs de uma suspenso de hemcias; eletrnicos, quando as hemcias so diludas em uma soluo eletroltica e passadas por uma abertura, que apresenta certa resistncia eltrica. A alterao na freqncia eltrica igual ao nmero de clulas. Nos a laser a difrao da luz incidida sobre as clulas faz a contagem, baseada no tamanh o e complexidade interna de cada uma. Estes mtodos apresentam erros de at 5%. Dosagem total de hemoglobina

A hemoglobina uma protena conjugada, composta por uma protena simples, a globina e por um ncleo prosttico do tipo porfirina, chamado heme, cujo principal componente qumico o ferro. A hemoglobina responsvel por at 90% do peso seco de um eritrcito a ulto e por aproximadamente 1/3 de seu contedo celular e sua sntese se faz no citop lasma dos precursores nucleados dos eritrcitos. A molcula de hemoglobina tem peso molecular que varia entre 6.0 e 69.00 daltons. formada por um conjunto de quatro molculas de heme, ligadas a uma cadeia peptdica, formando um conjunto de duas cadeias alfa e duas beta. O grupamento heme um com posto metlico, com um tomo de ferro em seu interior e uma estrutura porfirnica, for mada por quatro anis pirrlicos. Os grupamentos heme e polipepitdicos ligam-se atravs de pontes que se abrem facilmente para fazer a ligao com o O2 ou com o CO2. Estas ligaes obedecem ao grau local de tenso destes gases. Nos capilares pulmonares, a t enso de O2 elevada e de CO2 baixa. Desta forma, a ligao de da hemoglobina com o O2 acontece juntamente com a liberao de CO2. Nos capilares dos tecidos ocorre o contrr io.

Dentro de uma mesma espcie existem vrias formas de hemoglobina, sendo as principai s, alm da hemoglobina, a oxi hemoglobina, meta hemoglobina e hemoglobina reduzida . Essa variedade determinada por alteraes na seqncia de aminocidos da molcula, have ainda diferenas entre as hemoglobinas fetais e adultas. O eritrcito, no fim de sua vida til, perde a sua elasticidade, no conseguindo mais passar pelos sinusides do bao, onde fagocitado por um macrfago. No interior desta cl ula ocorre o desmembramento da hemoglobina, com liberao do ferro do heme e da glob ina, formando-se ento a bilirrubina, que abandona o macrfago e passa a circular no plasma.

A dosagem total da hemoglobina reflete diretamente a capacidade do eritron como carreador de oxignio. A determinao exata do teor de hemoglobina no fcil de ser obtid , pois algumas tcnicas, especialmente as de comparao visual com algum padro, no so su icientemente precisas. Na prtica atual so utilizados mtodos qumicos, em que a leitur a feita por espectofotometria, que possuem preciso suficiente para uma interpretao correta. Tais mtodos convertem todas as formas de hemoglobina presentes no interi or do eritrcito em cianometahemoglobina, cuja dosagem ento determinada pelo espect ofotmetro. A dosagem de hemoglobina dada em g/% ou g/dl. Hematcrito (Hc) ou volume globular (VG)

Literalmente, a palavra hematcrito significa separao do sangue e essa separao obtida facilmente no laboratrio atravs da centrifugao. Aps este processo, o sangue fica sepa rado em trs partes: a massa vermelha de eritrcitos ao fundo, uma camada bastante f ina, branca ou acinzentada, formada de leuccitos e plaquetas logo acima da camada vermelha que chamada de boto leucocitrio e por fim, o plasma. Define-se como hema tcrito o volume do sangue total que ocupado pelas hemcias sendo os resultados expr essos em porcentagem.

Para a determinao do hematcrito deve ser usado sangue com anticoagulante. O mtodo do microhematcrito atualmente o de eleio para a determinao do volume globular, por req erer menor quantidade de sangue e possuir maior rapidez, sendo realizado em 5 mi nutos e a leitura feita comparando-se o tubo do microhematcrito com grfico especia l.

Existem ocasies em que o hematcrito pode estar falsamente aumentado. A principal d estas so os casos de desidratao, pela perda de lquidos do organismo. Neste caso, as protenas plasmticas totais estaro tambm aumentadas, diferenciando a desidratao de out a situao na qual haver um aumento real do hematcrito. Quando sangue colhido em situa de excitao ou estresse, principalmente em eqinos, pois nestes animais o bao reserva cerca de 1/3 do potencial de eritrcitos circulantes, alm de possuir musculatura m uito enervada. Portanto, sob estmulos adrenrgicos, ocorre a contrao deste rgo e liber de grande quantidade de eritrcitos na corrente circulatria, e isto causar alteraes d e 10-15% na determinao do hematcrito. Em menor grau, este fato tambm observado em ce rtas raas de ces de difcil manuseio. Por outro lado, existem situaes em que o hematcrito pode estar falsamente diminudo. Em amostras colhidas com excesso de EDTA, uso de amostras velhas e ainda o uso d e anestsicos ou conteno qumica pode ocorrer o "encarquilhamento celular", isto uma d iminuio do tamanho dos glbulos.

Alm da determinao da massa eritroctica em si, outras avaliaes podem ser feitas a part r do hematcrito. Por exemplo, uma avaliao do boto leucocitrio pode sugerir um excesso de leuccitos, se esse estiver muito largo; o teor de protenas plasmticas totais, s e o tubo quebrado e o plasma colocado em um proteinmetro para leitura. O aspecto do plasma pode ainda oferecer informaes sobre o estado da amostra colhida, pois no rmalmente ele se apresenta claro, mas em outras situaes pode ter aspecto avermelha do se h hemlise, esbranquiado se h uma lipemia ou ainda amarelado, se h ictercia. Alg ns protozorios pode ser observados no plasma, dentro do tubo do hematcrito, logo a cima do boto leucocitrio. So eles Tripanossoma eqinun e T. equiperdum vistos no pla sma de equdeos e T. Cruzi, em ces e tatus. Larvas de helmintos so tambm observados, especialmente as microfilrias dos gneros Dirofilaria e Diptalonema, no plasma de ce s habitantes de regies litorneas, onde existam insetos transmissores. ndices hematimtricos ou valores globulares mdios Utilizando a contagem total de eritrcitos, o teor de hemoglobina e o hematcrito po ssvel calcular o volume de um eritrcito mdio e sua concentrao de hemoglobina. Estes v alores so de importncia particular na determinao do tipo morfolgico das anemias, serv indo de guia para a determinao do tratamento e monitorao do paciente. Em alguns cont adores automticos, estes ndices so calculados automaticamente. Volume Globular Mdio (VGM) Este ndice determina o tamanho mdio dos eritrcitos ou seja o volume de um eritrcito mdio. Se estiver aumentado, normal ou diminudo, indica se as clulas esto macrocticas, normocticas ou microcticas. O VGM determinado pela diviso do hematcrito em 1.0 ml d e sangue (porcentagem x 10) pelo nmero de hemcias em milhes. Os resultados so expres sos em fentolitros (fl). A frmula portanto : VGM: Hc x 10 /no He (106) Observao: 1 fl = 1015l Concentrao hemoglobnica globular mdia (CHGM) uma medida da concentrao de hemoglobina nas hemcias. Expressa a taxa de peso da hem oglobina em relao a um dl de eritrcitos, e no a um dl de sangue total. Se est normal ou diminudo, define morfologicamente se o eritrcito normocrmico ou hipocrmico.

O CHGM calculado pela diviso do teor de hemoglobina em 1.0 ml de sangue (g/dl x 1 00) pelo Hc. Os resultados so expressos em g/dl ou g/%. Portanto, a frmula : CHGM: Hb x 100 / Hc Hemoglobina Globular Mdia (HGM)

Indica o contedo hemoglobnico de cada hemcia, sendo porm o peso da hemoglobina em um a clula mdia. menos preciso que o CHGM, pois calculado por dois ndices menos sensve s, que so a dosagem de hemoglobina e contagem total de hemcias. de pouco valor prti co direto. O HGM calculado pela diviso do teor de hemoglobina em 1.0 ml de sangue (g/dl x 10 ) pelo nmero de hemcias em milhes. Os resultados expressos em picogramas (pg). Port anto, a frmula : HGM: Hb x 10 / no He (106) Bibliografia 1) JAIN, H.C. Schalm's Veterinary Hematology, Lea & Febiger, 4 ed, Philadelphia, 1986, 1221p. 2) NAVARRO, C.E.K.G., PACHALY, J.R. Manual de Hematologia Veterinria. Livraria Va rela, So Paulo, 1994, 163p. Literatura recomendada 1) JAIN, H.C. Schalm's Veterinary Hematology, Lea & Febiger, 4 ed, Philadelphia, 1986, 1221p. Avaliao das anemias ndice Introduo Sintomatologia clnica Colheita Classificao das anemias Hemoparasitas Intensi dade da anemia Bibliografia e leitura recomendada Introduo

Pode-se caracterizar anemia quando a contagem de eritrcitos, a dosagem de hemoglo bina e a determinao do hematcrito demonstrarem valores abaixo dos normais. Estes va lores normais ou de referncia so caracterizados de acordo com a espcie, raa, sexo e idade. No pedido enviado ao laboratrio ou na realizao do exame a anotao da espcie i escindvel, pois a variao dos valores entre os animais muito grande. Estes valores e sto relacionados com o tamanho dos eritrcitos e conseqentemente, com o contedo de he moglobina. Por exemplo, quando compararmos os eritrcitos de ces e dos caprinos ver emos que, os eritrcitos dos caprinos por serem menores, em um mesmo volume sero em maior nmero. Por outro lado, o contedo de hemoglobina est relacionado com a ativid ade animal isto , animais mais lpidos como os ces e os cavalos tendem a ter contedo maior de hemoglobina que os bovinos. Animais de mesma espcie tambm apresentam vari aes; os cavalos utilizados para corrida apresentam os eritrcitos maiores que os ani mais de trabalho ou trao; os ces da raa Akita apresentam eritrcitos menores, enquanto que os da raa Poodle apresentam eritrcitos maiores em relao ao tamanho mdio para a e spcie. A idade outro parmetro importante a ser observado; os animais recm nascidos possuem eritrcitos maiores, ainda de origem fetal que so substitudos gradativamente durante as primeiras semanas de vida. A variao entre sexos discreta podendo haver variaes durante a gestao devido a hemodiluio inerente a gestao. Sintomatologia clnica O animal anmico apresenta mucosas plidas e, dependendo da intensidade, pode-se obs

ervar tambm fraqueza, aumento da freqncia e sopros cardacos, depresso mental e sede. Tais sintomas so relacionados com a reduzida capacidade de oxigenao sangnea devido ao s valores reduzidos da taxa de hemoglobina e dependero da intensidade da mesma. P ela resistncia individual de alguns animais, de mesma espcie ou no, o quadro de ane mia pode ser assintomtico. Colheita

Para avaliao adequada das anemias importante que a amostra seja colhida e manusead a corretamente, pois caso contrrio os resultados podem ser alterados total ou par cialmente. Primeiramente, no estressar muito os animais, em especial os cavalos e os gatos, a contrao esplnica resultante lanar eritrcitos na corrente sangnea alter o valor do eritrograma. A relao sangue-anticoagulante deve ser correta, pois volumes maiores do anticoagul ante podem diluir a amostra e alterar a caracterstica das clulas, como por exemplo , o excesso de EDTA pode causar encolhimento dos eritrcitos. Estase prolongada provoca hemoconcentrao, presso exagerada no mbolo da seringa causa r hemlise diminuindo o valor do volume globular e aumentando o valor da hemoglobin a alm de aumentar a densidade tica da amostra. A observao de jejum muito importante, pois a lipemia ps prandial pode aumentar a fragilidade osmtica dos eritrcitos torn ando-os facilmente lisveis. Classificao das anemias

As anemias podem ser divididas em relativas e absolutas. As anemias relativas so aquelas nas quais no h reduo da massa celular, ocorre apenas expanso do volume plasmt co. Situam-se nestes casos, as fmeas gestantes, os neonatos e os animais submetid os a fluidoterapia. Por outro lado as absolutas so tambm chamadas de anemias verda deiras onde verifica-se reduo da massa celular e so classificadas baseando-se na re sposta medular, na morfologia e colorao dos eritrcitos e na patofisiologia. Classificao baseada na resposta medular

Est relacionada totalmente com a resposta reticulocitria, que est na dependncia da p roduo e liberao da eritropoetina renal e ou heptica, variando de acordo com a espcie. Baseado na resposta as anemias so consideradas regenerativas, pouco regenerativas e arregenerativas. As anemias regenerativas so aquelas onde se verifica resposta satisfatria da medula ssea, com produo e liberao de clulas jovens, como no caso das emias hemolticas e perdas sangneas por parasitas ou traumas. As pouco regenerativas so aquelas nas quais se verifica diminuio dos precursores eritrides havendo pouca r esposta a estmulos. Ocorre nas deficincias de vitamina B12 e acido flico, vitamina B6 e deficincia de ferro. J nas anemias arregenerativas no se observam precursores eritrides medulares, no h resposta a estmulos como nas anemias aplsticas. No caso par ticular dos ces, a deficincia de eritropoetina na insuficincia renal crnica grave no gera estmulos para o desenvolvimento e divises da clula tronco e linhagens, causand o depresso medular, pois nesta espcie a produo de eritropoetina somente renal. Podem ser tambm causadas por eritropoiese ineficaz isto , ocorre aumento dos precursore s eritrides, mas os eritrcitos formados no so liberados na circulao, devido a sua des ruio intramedular pelo sistema fagocitrio mononuclear ou por algum defeito de matur ao. Podem ter origem em alguma doena primria medular como neoplasias, aplasia eritrid e, anemia aplstica; ser de origem nutricional ou causadas por algum dano medular, seja qumico e uso de drogas. As doenas nutricionais, tais como deficincias de vita minas B12 e B6, de ferro, cobalto e cobre geralmente so reversveis bastando para i sso corrigir a causa. Por outro lado as outras causas podem provocar leses irreve rsveis nas clulas tronco eritropoiticas. Essas causas podem ser doenas hepticas, rena is, radiao, txicos (samambaia, estrgenos, chumbo), doenas mieloproliferativas, medica mentos (quimioterpicos, fenilbutazona, sulfatrimetropina).

A avaliao do sangue perifrico de cada animal oferece indcios da resposta medular: no s ces e gatos encontra-se policromatofilia (indicando reticulocitose); nos cavalo s observa-se macrocitose e anisocitose mas no se observa policromatofilia (por no haver liberao de reticulcitos na corrente sangunea); nos ruminantes observa-se ponte ado basfilo e, nos sunos, policromatofilia.

A avaliao reticulocitria deve ser relacionada com a espcie em questo, j que so encon dos normalmente no sangue perifrico de ces, raramente em ruminantes e no so encontra dos em cavalos. A resposta reticulocitria em ces bastante acentuada permitindo ava liar bem a resposta medular; em ruminantes poucos reticulcitos j so patognomnicos de resposta medular. A avaliao nos eqinos feito pelo exame da medula ssea e ainda, exi stem atributos bioqumicos celulares nas clulas destes animais que podem ser medida s. Classificao morfolgica. baseada na morfologia do eritrcito e sua concentrao de hemoglobina, utilizando-se o s ndices hematimtricos VGM e CHGM. Normoctica e normocrmica Neste tipo de anemia verifica-se pouca ou nenhuma resposta medular, sendo consid eradas arregenerativas, ou pouco regenerativas. Geralmente ocorre em doenas crnica s:

doenas inflamatrias: doenas renais com uremia, doenas endcrinas, neoplasias, doenas pticas, enfim doenas que podem afetar o funcionamento medular ou o estmulo para pro duo de hemcias; doenas parasitrias que so depressoras de medula como erliquiose e l hmaniose; doenas mieloproliferativas; viroses imunodepressoras e depressoras da medula ssea como cinomose, parvovirose; Macroctica e normocrmica

Relacionada com deficincia de vitamina B12 e cido flico. Com a deficincia vitamnica n h sntese normal de DNA, as clulas no apresentaro divises normais, encontrando-se cl s maiores na corrente sangunea. Como a produo de hemoglobina normal, o ncleo com cre scimento contnuo por fim estrusado, dando origem a clulas maiores. Pode ocorrer em doenas hepticas, mieloproliferativas, com o uso de algumas drogas e por distrbios nutricionais. Ocorre na deficincia de cobalto em ruminantes; pois este mineral es sencial na sntese de vitamina B12 no rumem. A macrocitose e normocromia pode ser ocorrncia normal em ces da raa Poodle. Macroctica e hipocrmica Geralmente so regenerativas quando ocorre aumento da produo de reticulcitos. A retic ulocitose contribui para o aumento do VCM e diminuio do CHCM. Microctica e normocrmica Inicio da deficincia de ferro. Microcitose e normocromia caracterstica dos eritrcit os de ces da raa Akita. Microctica e hipocrmica

Ocorre nas deficincias de ferro, cobre e piridoxina (vitamina B6). Nas deficincias de ferro ou falhas na sua utilizao no haver produo normal de hemoglobina e havendo d mora na hemoglobinizao no haver parada na sntese de DNA, ocorrendo mitoses extras, ap

arecendo clulas menores com pouca hemoglobina na corrente sangnea. O ferro faz part e da molcula de hemoglobina e o cobre co-fator da enzima cido d aminolevilnico (ALA ) requerida para sntese do heme, alm de componente principal da ceruloplasmina, en zima responsvel pela transferncia do ferro das clulas da mucosa intestinal para a t ransferrina, protena de transporte plasmtico. A deficincia de ceruloplasmina dificu lta tambm a transferncia do ferro dos macrfagos e do fgado para o plasma. A piridoxi na necessria para a eritropoiese , principalmente porque serve de co-fator para a sntese do cido d aminolevilnico que faz parte da biognese do heme. Ocorre em perdas de sangue crnicas como nas leses gastrointestinais, neoplasias, desordens de coag ulao, infestao de ecto e endo parasitas hematfagos tais como carrapatos, piolhos, pul gas e vermes. Classificao patofisiolgica

Perdas sangneas (hemorragias) podem agudas ou crnicas e esta diferenciao depende da r apidez da instalao do processo. Um animal pode perder at 25% do seu contedo sangneo r pidamente ou cerca de 50% se esta perda for lenta (cerca de 24 horas) sem compro metimento fisiolgico. So exemplos de perdas por hemorragias: traumas e procedimentos cirrgicos; defeitos de coagulao: envenenamento por samambai a, trevo doce, veneno de rato (dicumarol), trombocitopenias; parasitas, neoplasi as, ulceraes intestinais; hemoparasitas: babesiose, ehrlichiose, anaplasmose, hemobartonelose. Anemias hemolticas tambm tem carter agudo e crnico e geralmente tem carter regenerati vo. Causas: hemoparasitas; anemias hemolticas imunomediadas;

intoxicaes: ingesto de cebola por ces e gatos, drogas como acetominofen em gatos, az ul de metileno em ces e gatos; anemias hemolticas idiopticas. Anemias depressivas: relacionadas com o tipo de resposta medular.

nutricionais: deficincia de cido flico e vitamina B12, cobre, cobalto, ferro, vitam ina B6; inflamaes: as bactrias e os macrfagos utilizam ferro levando a deplesso org a; parasitas. Ehrlichia sp, Babesia sp., parasitoses intestinais crnicas; aplasias idiopticas ou adquiridas; doenas mieloproliferativas. Anormalidades na forma (Poiquilocitose) A forma normal dos eritrcitos depende do perfeito equilbrio entre as propriedades estruturais da membrana celular e hemoglobina e a influncia dos meios intra e ext racelulares. Os eritrcitos possuem forma definida por espcie e a mudana nesta forma pode auxiliar no diagnstico da causa e tipo de anemia. A forma mais comum do dis co biconcavo, que pode ser alterado pela passagem atravs da microcirculao.

Codcitos: tambm chamado de clula em alvo; condensao central e perifrica da hemoglob resultante da redistribuio da hemoglobina celular provavelmente devido ao excesso de membrana (aumento do colesterol da membrana pode variar de 25% a 75%) ou ao pequeno contedo hemoglobnico. So encontradas nas anemias crnicas e em situaes de esta e sangnea; Excentrcitos: condensao da hemoglobina na periferia da hemcia que aparecem como proj ees em brotamento na borda destas clulas. So encontradas em quadros hemolticos como n a ingesto de cebola em ces e ocorrem em casos de animais que receberam drogas oxid

antes, como por exemplo a fenotiazina em cavalos ou paracetamol em gatos. Podem surgir em casos de hemoglobinria psparto na vaca; Equincitos: so eritrcitos crenalados. Podem ser artefatos de esfregao, ou excesso de EDTA, como animais em exerccio, em linfomas, glomerulonefrites, como so comuns em sunos. So encontrados em sangue estocado por depleo de ATP; Eliptcitos ou Ovalcitos: so hemcias com forma oval ou elipsoidal. Ocorrem nas leucem ias, sendo comum nas espcies de cameldeos; Esfercitos: so eritrcitos pequenos sem o halo central intensamente corados que apar ecem como resultado de deformao de membrana citoplasmtica, geralmente produzidas po r anticorpos anti-eritrcitos. Somente observadas em ces. Ocorrem em anemias hemolti cas imunomediadas. Como estas clulas possuem menor capacidade de deformao, so premat uramente retirados da circulao pelo bao; Acantcitos: so eritrcitos de contorno irregular, assumindo forma estrelar, podendo tambm ser resultado de alterao de membrana atribuido ao aumento do colesterol na me sma. Vistos em doenas renais e esplnicas, no hemangiossarcoma e cirrose heptica, es tas clulas so removidas prematuramente pelo bao tendo mais facilidade a lise. No dev em ser confundidos com artefatos de tcnica;

Esquiscitos ou fragmentos eritrocitrios: so clulas deformadas ou pedaos de clulas ( grego, schistos, fragmentar), entre os quais se destacam a clula em capacete e a clula em gota. A fragmentao e portanto os esquistcitos ocorrem como resultado de um defeito na produo ou de uma destruio acelerada de eritrcitos. Podem ser vistos em ca sos de vasculite e na coagulao intravascular disseminada (CID), sendo que nesta lti ma as clulas em capacete so caractersticas. Tambm podem aparecer em doenas renais ou esplnicas crnicas e ainda nas anemias ferroprivas; Fuscitos: So hemcias em forma de fuso, nas quais a hemoglobina se polimeriza em for ma de tbulos. So encontrados normalmente em cabras de raa angor. Incluses dos eritrcitos Ponteado basfilo So restos de ribossomos e polirribossomos que apresentam tom azulado formando agr egados finos e irregulares no eritrcito. A enzima pirimidina 5'nucleotidase que e st presente nos reticulcitos cataboliza estes ribossomas e polirribossomas. Aparec em nas anemias regenerativas em bovinos, ocorre nas intoxicaes por chumbo devido a enibio da enzima pelo chumbo. Corpsculos de Howell-Jolly So restos nucleares observados em forma de pequenos pontos na superfcie do eritrcit o apresentando-se como pontos espessos de cor violeta, azul ou quase negros, ger almente na periferia da clula,. Aparecem em casos de anemia severa e so rapidament e retirados de circulao pelo bao e tambm nas anemias regenerativas de ces e gatos, po dendo ainda significar inefetividade esplnica. No devem ser confundidos com parasi tas do gnero Anaplasma, especialmente Anaplasma marginale pois estes estaro sempre em uma posio fixa e tero o tamanho uniforme, enquanto que os corpsculos apresentam localizao variada e dimenses no uniformes. Em sangue de gatos e cavalos sadios pode ser vistos em at 1%. Hemoparasitas Ricketsias Gnero Haemobartonela

Aparecem na forma de pequenos cocos ou bacilos escuros na periferia da hemcia. So parasitas do co (H. canis) e do gato (H. felis). Gnero Anaplasma Parasitas dos bovinos, que aparecem como pequenos pontos escuros no citoplasma d a clula, sendo que A. marginale possui sempre localizao perifrica e mais numeroso e A. centrale, de localizao central. Protozorios Gnero Babesia Tambm chamados de piroplasmas, pois possuem forma de chama de fogo. Estes orios so vistos no interior dos eritrcitos como gotas nicas ou duplas, tice. Podem ser observados no sangue de bovinos (B. bovis ou B. bigemina); (B. cabali, Nutalia equi); e ces (B. canis). Em eqinos podem parecer em uatro no mesmo eritrcito, em uma formao chamada de Cruz de Malta. Gnero Plasmodium Tais protozorios podem ser vistos no interior de hemcias de rpteis, aves, ces, gatos e seres humanos. Intensidade da anemia hematoz unidas pelo vr eqinos nmero de q

A avaliao da intensidade da anemia baseada no valor do hematcrito em relao as varias espcies. Esta intensidade nos direciona na avaliao da necessidade de reposio sangnea

Nos pequenos animais, usa-se os seguintes parmetros de reposio sangunea: hematcrito a baixo de 15% para os ces, abaixo de 10% para os gatos, e para os grandes animais abaixo de 12% mas a melhor avaliao da necessidade de reposio sangunea est na avalia ca. Bibliografia e leitura recomendada Jain, N. C. ESSENTIALS OF VETERINARY HEMATOLOGY. Philadelphia, Lea & Febiger, 19 93. Jain N. C. SCHALM'S VETERINARY HEMATOLOGY, 4ed., Philadelphia, Lea & Febiger , 1986. Campbell, K. Diagnosis and management of policythemia in dog. CONTINUING EDUCATI ON ARTICLE, v. 2,n. 4, p. 543-550, 1990. Cole, D, J., Roussel, A, J., Whitney, M,S Interpreting a bovine CBC: Collecting a sample and evaluating the erythron. VETERINARY MEDICINE. N.4, P. 460-478, 1978 . Morais, D,D. Review of anemia in horses Part I: Pathophisiologyc mechanisms, spe cific diseases and treatment. EQUINE PRATICE-HEMATOLOGY. v.2 n.5, p. 39-46, 1989 . Avaliao das policitemias ndice

Introduo Sintomatologia Clnica Classificao das policitemias Avaliao laboratorial Bib grafia e leitura recomendada Introduo

As policitemias so caracterizadas pelo aumento do nmero de eritrcitos, da concentrao da hemoglobina e do volume globular acima do normal avaliado para cada espcie, raa , sexo, idade. Volume globular acima de 50% torna o sangue mais viscoso dificult ando o transporte de oxignio e quando este valor supera 60% considerado policitem ia. Sintomatologia Clnica A viscosidade sangnea aumentada diminue o fluxo sangneo promovendo distenso de capila res e pequenos vasos, que, alm de causar ruptura vascular e mucosas hiprmicas, con sequentemente ocorre hipxia, trombose, resultando em poliria, polidipsia, distrbios do SNC, hematemse, epistaxe, hematoquezia, hematria. Classificao das policitemias Relativa A caracterstica principal da policitemia relativa que os valores podem voltar ao normal aps a correo do evento. Pode ser devida a dois mecanismos distintos:

Diminuio do volume plasmtico causado principalmente por desidratao, ocasionando aume to do volume globular, mas a massa total de eritrcitos circulantes permanece inal terada.

Contrao esplnica aps stress ou dor, com injeo temporria de grande massa de eritrc corrente sangnea. Absoluta Quando ha aumento da massa celular circulante permanente sem diminuio do volume pl asmtico. Policitemia primaria Tambm chamada de policitemia vera, doena mieloproliferativa caracterizada por exce ssiva proliferao das clulas tronco hematopoieticas da srie eritride. Esta mieloprolif erao independente da produo de eritropoetina. Policitemia secundria Resultado do aumento da eritropoiese resultante de fatores que estimulam a produo de eritropoetina. Causando hipxia renal Neste caso, chamado tambm de policitemia fisiologicamente apropriada, a concentrao de oxignio nos tecidos renais diminui, aumentando a secreo de eritropoetina. So caus as: "Shunt" trio-ventricular Altitudes elevadas Obesidade acentuada Hemoglobinopatias Doenas pulmonares crnicas

Depresso do centro respiratrio Neoplasias produzindo substancia eritropoiticas Nestes casos, a produo de eritropoetina ou outras substancias eritropoiticas tais c omo corticides, andrgenos e prostaglandinas ocorre sem estmulo da hipxia. Carcinoma renal Tumores uterinos Tumores da supra renal Avaliao laboratorial Algumas tcnicas inerentes ao laboratrio e a colheita de material podem causar poli citemias transitrias. importante a homogeneizao bem feita quando da medida do volum e globular pois corre-se o risco de medir a amostra concentrada. Este fato torna -se muito importante no caso dos eqinos que apresentam sedimentao mais rpida. O pree nchimento correto do tubo capilar do microhematcrito tambm importante pois quando se preenche mais de 2\3 do tubo dificulta a concentrao da amostra. O exame mais importante o volume globular que deve estar acima de 60%. Linfossarcoma renal

A medida dos gases arteriais til para se verificar a oxigenao do sangue assim como a dosagem de eritropoetina. Normalmente nas policitemias relativas a saturao de ox ignio e os valores da dosagem de eritropoetina so normais enquanto na policitemia primria a saturao de oxignio normal e a dosagem de eritropoetina ligeiramente abaix do normal; por outro lado, nas policitemias secundarias fisiologicamente apropr iadas a saturao de oxignio baixa e a dosagem de eritropoetina alta e nas fisiologic amente inapropriadas, a saturao de oxignio normal mas a dosagem de eritropoetina al ta. A anlise clnica e laboratorial das policitemias pode ser feita atravs do fluxograma que se segue: Bibliografia e leitura recomendada Jain, N. C. ESSENTIALS OF VETERINARY HEMATOLOGY. Philadelphia, Lea & Febiger, 19 93. Jain N. C. SCHALM'S VETERINARY HEMATOLOGY, 4ed., Philadelphia, Lea & Febiger , 1986. Campbell, K. Diagnosis and management of policythemia in dog. CONTINUING EDUCATI ON ARTICLE, v. 2,n. 4, p. 543-550, 1990. Cole, D, J., Roussel, A, J., Whitney, M,S Interpreting a bovine CBC: Collecting a sample and evaluating the erythron. VETERINARY MEDICINE. N.4, P. 460-478, 1978 . Morais, D,D. Review of anemia in horses Part I: Pathophisiologyc mechanisms, spe cific diseases and treatment. EQUINE PRATICE-HEMATOLOGY. v.2 n.5, p. 39-46, 1989 . Avaliao das policitemias ndice

Introduo Sintomatologia Clnica Classificao das policitemias Avaliao laboratorial Bib grafia e leitura recomendada

Introduo As policitemias so caracterizadas pelo aumento do nmero de eritrcitos, da concentrao da hemoglobina e do volume globular acima do normal avaliado para cada espcie, raa , sexo, idade. Volume globular acima de 50% torna o sangue mais viscoso dificult ando o transporte de oxignio e quando este valor supera 60% considerado policitem ia. Sintomatologia Clnica A viscosidade sangnea aumentada diminue o fluxo sangneo promovendo distenso de capila res e pequenos vasos, que, alm de causar ruptura vascular e mucosas hiprmicas, con sequentemente ocorre hipxia, trombose, resultando em poliria, polidipsia, distrbios do SNC, hematemse, epistaxe, hematoquezia, hematria. Classificao das policitemias Relativa A caracterstica principal da policitemia relativa que os valores podem voltar ao normal aps a correo do evento. Pode ser devida a dois mecanismos distintos:

Diminuio do volume plasmtico causado principalmente por desidratao, ocasionando aume to do volume globular, mas a massa total de eritrcitos circulantes permanece inal terada.

Contrao esplnica aps stress ou dor, com injeo temporria de grande massa de eritrc corrente sangnea. Absoluta Quando ha aumento da massa celular circulante permanente sem diminuio do volume pl asmtico. Policitemia primaria Tambm chamada de policitemia vera, doena mieloproliferativa caracterizada por exce ssiva proliferao das clulas tronco hematopoieticas da srie eritride. Esta mieloprolif erao independente da produo de eritropoetina. Policitemia secundria Resultado do aumento da eritropoiese resultante de fatores que estimulam a produo de eritropoetina. Causando hipxia renal Neste caso, chamado tambm de policitemia fisiologicamente apropriada, a concentrao de oxignio nos tecidos renais diminui, aumentando a secreo de eritropoetina. So caus as: "Shunt" trio-ventricular Altitudes elevadas Obesidade acentuada Hemoglobinopatias Doenas pulmonares crnicas

Depresso do centro respiratrio Neoplasias produzindo substancia eritropoiticas Nestes casos, a produo de eritropoetina ou outras substancias eritropoiticas tais c omo corticides, andrgenos e prostaglandinas ocorre sem estmulo da hipxia. Carcinoma renal Tumores uterinos Tumores da supra renal Avaliao laboratorial Algumas tcnicas inerentes ao laboratrio e a colheita de material podem causar poli citemias transitrias. importante a homogeneizao bem feita quando da medida do volum e globular pois corre-se o risco de medir a amostra concentrada. Este fato torna -se muito importante no caso dos eqinos que apresentam sedimentao mais rpida. O pree nchimento correto do tubo capilar do microhematcrito tambm importante pois quando se preenche mais de 2\3 do tubo dificulta a concentrao da amostra. O exame mais importante o volume globular que deve estar acima de 60%. Linfossarcoma renal

A medida dos gases arteriais til para se verificar a oxigenao do sangue assim como a dosagem de eritropoetina. Normalmente nas policitemias relativas a saturao de ox ignio e os valores da dosagem de eritropoetina so normais enquanto na policitemia primria a saturao de oxignio normal e a dosagem de eritropoetina ligeiramente abaix do normal; por outro lado, nas policitemias secundarias fisiologicamente apropr iadas a saturao de oxignio baixa e a dosagem de eritropoetina alta e nas fisiologic amente inapropriadas, a saturao de oxignio normal mas a dosagem de eritropoetina al ta. A anlise clnica e laboratorial das policitemias pode ser feita atravs do fluxograma que se segue: Bibliografia e leitura recomendada Jain, N. C. ESSENTIALS OF VETERINARY HEMATOLOGY. Philadelphia, Lea & Febiger, 19 93. Jain N. C. SCHALM'S VETERINARY HEMATOLOGY, 4ed., Philadelphia, Lea & Febiger , 1986. Campbell, K. Diagnosis and management of policythemia in dog. CONTINUING EDUCATI ON ARTICLE, v. 2,n. 4, p. 543-550, 1990. Cole, D, J., Roussel, A, J., Whitney, M,S Interpreting a bovine CBC: Collecting a sample and evaluating the erythron. VETERINARY MEDICINE. N.4, P. 460-478, 1978 . Morais, D,D. Review of anemia in horses Part I: Pathophisiologyc mechanisms, spe cific diseases and treatment. EQUINE PRATICE-HEMATOLOGY. v.2 n.5, p. 39-46, 1989 . Interpretao clnica das alteraes no nmero dos leuccitos ndice

Alteraes no nmero de leuccitos na circulao Respostas leucocitrias nos ruminantes Con ens leucocitrias absolutas e relativas Interpretao do leucograma Referncias bibliogrf

icas Alteraes no nmero de leuccitos na circulao

Variaes no nmero de leuccitos podem ocorrer em situaes fisiolgicas ou de doena. Os os "ose" ou "filia" so usados para denotar um aumento acima da contagem mxima, enq uanto que o sufixo "penia" denota diminuio abaixo dos nveis mnimos. A leucocitose po de ser fisiolgica, patolgica em resposta a doena ou vir como resultado de uma alter ao neoplsica. De forma especial, a leucocitose fisiolgica deve ser compreendida, par a que haja discernimento entre esta e a patolgica. Pode-se observar elevao na conta gem total de leuccitos como resultado de exerccio muscular intenso, excitao, apreenso ou alteraes emocionais. Esta elevao considerada leucocitose fisiolgica. Grandes var aes so observadas na contagem total e na contagem diferencial de leuccitos, talvez r efletindo a intensidade do estresse envolvido. A contagem total pode aumentar mu ito, as vezes 100 ou 200%, inicialmente como resultado de elevao dos neutrfilos mad uros; portanto esta condio pode ser chamada de "pseudo' neutrofilia. A leucocitose pode tambm ser observada como resultado de linfocitose, especialmente em animais jovens ou em crescimento e em particular no gato e no cavalo. Entretanto, em al guns casos pode haver aumento em todos os tipos de leuccitos. Leucocitose por neu trofilia e linfocitose geralmente considerada como efeito da adrenalina. Aumentos nos nveis de corticides, sejam eles endgenos ou exgenos esto associadas com alteraes previsveis nas contagens total e diferencial de leuccitos. A resposta tpica consiste em neutrofilia, linfopenia e eosinopenia. A neutrofilia devido as clulas maduras, embora bastonetes possam ser observados em algumas ocasies. Para este e stmulo, monocitose uma resposta caracterstica do co enquanto que nas outras espcies a resposta varivel.

A leucopenia quase sempre devido a um processo patolgico e na maioria das vezes r epresenta prognstico desfavorvel. As leucopenias acontecem quando a contagem total de leuccitos fica abaixo do nvel mnimo considerado para aquela espcie. Leucopenia p ode resultar de um ou mais dos seguintes fatores: diminuio da produo em casos de dan os a medula ssea ou necrose do tecido linfide, granulopoiese inefectiva ou diminuio da liberao na circulao, aumento na utilizao ou destruio, como nos casos de sepsias. Alguns dos motivos mais comuns de leucopenia so algumas doenas a vrus, septicemia o u toxemia bacteriana, alguns casos de leucemia, anafilaxia, substncias txicas, dro gas ou outros compostos qumicos, que competem na utilizao do cido flico pelas clulas ainda deficincias nutricionais.

Alteraes quantitativas e qualitativas em um tipo particular de leuccito pode reflet ir a natureza do processo e a resposta do organismo a ele. Existem variaes particu lares de acordo com a espcie em questo. O co responde de forma dramtica as infeces mi robianas, doenas ou situaes de estresse. Contagens totais de leuccitos de 30.0/ml- 5 0.0/ml so comuns e contagens acima destas marcas tambm no so raras. Pode-se entender isto pelo fato que estes animais liberam tanto neutrfilos quanto moncitos em resp ostas a hormnios adrenocorticais em situaes de estresse. De modo geral, em resposta a doenas os gatos no respondem de forma to significativa como o co, apresentando co ntagens mximas de 75.0/ml. Por outro lado, leucocitose fisiolgica, na qual os linfc itos se igualam ou at mesmo superam o nmero de neutrfilos, bastante comum em filhot es amedrontados. Esta resposta dos gatos ao medo a excitao devem ser levados em co nta na interpretao do leucograma. A leucopenia tambm um achado comum. Em gatos jove ns, ela se d principalmente por infeces ao vrus da pancitopenia, mas em gatos mais v elhos esta variao observada em situaes de toxemia, que podem causar depresso de medu a. Nos eqinos, o nvel de resposta leucocitria fica entre 15.0- 25.0/ml. A leucocito se acentuada nestes animais so consideradas aquelas entre 25.0- 35.0/ml e respost as extremas so consideradas na faixa de 35.0/ml. Os ruminantes so ainda menos responsivos que os equdeos. Muito freqentemente, a fai xa normal de resposta fica entre 4.0100-12.0/ml. A leucocitose acentuada seria r

epresentada por contagens de 20.0-30.0/ml e extremas por valores discretamente s uperiores a 30.0/ml. Neutrofilia/Neutropenia (Leucocitose/Leucopenia) Os neutrfilos so as clulas presentes em maior porcentagem no sangue dos animais. As sim sendo, a maioria das leucocitoses, vistas principalmente em ces e gatos, so de vido a neutrofilia e da mesma forma, a maioria das leucopenias advindas de neutr openias.

Como os neutrfilos so as clulas de primeira linha de defesa contra infeces e nas rea inflamatrias, natural que as alteraes neste tipo de leuccito sejam melhor percebidas . Assim sendo, os termos desvio para a esquerda e desvio para a direita foram pr opostos para descrever as alteraes no sangue na contagem diferencial destas clulas. Estes desvios so baseados na contagem total de leuccitos, na contagem diferencial de neutrfilos e no grau de maturao destes. Desvio dos neutrfilos direita

Neste tipo de alterao o nmero total de leuccitos varivel, mas h elevao no nmero los muito maduros ou seja, hipersegmentados. As formas jovens estaro ausentes ou em nmeros muito reduzidos. observado em doenas caquetizantes ou em situaes de defici cia de vitamina B12. A elevao nos nveis de corticides na circulao, sejam endgenos ou enos, faz com que os neutrfilos permaneam mais tempo no compartimento marginal, am adurecendo mais, ficando assim com o ncleo hipersegmentado. Desvio dos neutrfilos esquerda

o aumento, na circulao, do nmero de neutrfilos jovens acima do normal da espcie. Oco re na fase aguda dos processos inflamatrios, por uma liberao mais acelerada dessas clulas pela medula. Existem dois tipos de desvio esquerda, o regenerativo e o deg enerativo. Desvio esquerda regenerativo Neste tipo de desvio observa-se leucocitose e neutrofilia, mas h manuteno da distri buio piramidal dos neutrfilos, isto , os mais jovens em nmero inferior aos mais madur os. considerado pequeno quando so vistos apenas neutrfilos bastonetes, moderado qu ando so observados metamielcitos e bastonetes e ainda, acentuado quando so vistos m ielcitos, metamielcitos e bastonetes. Representa prognstico bom, pois indica funcio namento normal do processo inflamatrio. Desvio esquerda degenerativo

Neste caso o nmero total de neutrfilos normal ou h at mesmo neutropenia, mas h aumen o do nmero de formas jovens. H duas explicaes para o desvio esquerda degenerativo. N o primeiro caso, o nmero de neutrfilos deveria estar aumentado, mas a destruio dessa s clulas processa-se a uma velocidade maior que a sua reposio. No segundo caso h uma interferncia no processo de maturao das clulas, causada por agresses em nvel medular O prognstico para o desvio a esquerda degenerativo reservado, exceto nos ruminan tes em fase inicial de resposta inflamatria. Ocasies em que h neutrofilia

A neutrofilia fisiolgica no tem relao com alteraes patolgicas; causada por uma lib ta dos neutrfilos do compartimento marginal. Isto ocorre aps as refeies, na gestao, a exerccios violentos ou prolongados, aps vmitos ou convulses e no estresse. Lembrar que o compartimento marginal na maioria das espcies domsticas igual ao compartimen to circulante, nas no gato o tal compartimento chega a ser 2-3 vezes maior que o compartimento circulante.

Existem situaes em que a neutrofilia patolgica, como por exemplo na fase aguda das inflamaes e infeces, especialmente aquelas causadas por bactrias piognicas, como a ma oria dos cocos. Ocorre tambm na agudizao de processos crnicos anteriormente em equilb rio; intoxicaes metablicas, (uremia, acidose diabtica, e hipocalcemia puerperal) ou no metablicas (chumbo, mercrio, digitlicos, adrenalina, veneno de artrpodes peonhento ); leses com necrose abrangente de rgos e tecidos como miocrdio, pncreas e rins e nas leucemias mielocticas. Observa-se neutrofilia tambm em fase inicial e de regenerao das hemorragias, quando a liberao aumentada de eritrcitos jovens pode vir acompanha da de um maior nmero de neutrfilos. Algumas afeces so caracterizadas por extrema neut rofilia, como por exemplo a piometra na cadela e na gata e a pericardite traumtic a nos bovinos. Ocasies em que h neutropenia A neutropenia ocorre basicamente por dois mecanismos, ou seja, quando h diminuio da produo de neutrfilos por uma hipoplasia granuloctica da medula ssea, seja ela de ori gem infecciosa (parvovirose, erlichiose), uso de drogas como estrgeno e sulfas no s ces e fenilbutazona em eqinos e ainda intoxicaes por plantas, como a samambaia no caso dos bovinos. O segundo mecanismo o excesso de consumo dos neutrfilos, em pro cessos infecciosos graves e demorados. Linfocitose/Linfopenia

Em filhotes e animais em crescimento observa-se linfocitose fisiolgica, pois nele s a atividade imunognica mais intensa. O mesmo ocorre aps vacinaes ou imunizaes, in endentes da natureza do antgeno. A linfocitose patolgica ocorre quando o agente ag ressor antignico, como por exemplo nas erlichioses e de modo especial nas viroses ; infeces crnicas; linfoadenopatias inespecficas, locais ou generalizadas. Algumas p rotozoonoses so caracterizadas por linfocitose persistente, ainda que moderada, p odem ser citadas como exemplo a doena de Chagas e a toxoplasmose. A linfopenia ou linfocitopenia ocorre na fase aguda das inflamaes, em viroses imun odepressoras e em processos infecciosos graves. A administrao de antagonistas do ci do flico e de drogas antineoplsicas tambm levam a linfopenia, bem como em algumas d oenas mieloproliferativas como a doena de Hodgkin descrita no co, certos linfossarc omas nesta e em outras espcies e em neoplasias de outros tecidos, quando em estad o avanado. O aumento no nvel de corticosterides circulantes, seja endgeno como no hi peradrenocorticismo ou iatrognico um fator determinante de linfopenia. Eosinofilia/Eosinopenia.

O aumento no nmero de eosinfilos circulantes acima do normal da espcie ocorre em do enas alrgicas, onde h processos inflamatrios com hipersensibilizao; infeces parasit principalmente naqueles em que h leso profunda de tecido e nas parasitoses intesti nais, embora nestas com menor intensidade. Observa-se eosinofilia intensa no gra nuloma eosinoflico do gato. O reaparecimento dos eosinfilos no trmino da fase aguda da inflamao marca geralmente o incio da recuperao do organismo. J a eosinopenia ocorre na fase aguda das inflamaes, aps intenso estresse emocional o u fsico, nas endotoxemias e nas situaes em que h excesso de hormnios corticosterides irculantes, sejam de origem endgena ou exgena. Monocitose/Monocitopenia

A monocitose observada principalmente na fase de recuperao das inflamaes, quando os moncitos iniciam o trabalho de "limpeza" da regio inflamada. Outras situaes em que h monocitose so: desnutrio e caquexia, inflamaes inespecficas ou doenas crnicas e leu monoctica.

A monocitopenia no alterao significante, pois pequenos nmeros destas clulas so norm ente observados. Basofilia No observada normalmente, pois estas clulas esto presentes em nmero bastante reduzid o na circulao dos animais domsticos. Em alguns casos, porem, pode ser observada: na s mesmas ocasies em que h eosinofilia, quando h lipemia nos ces ou ainda em casos de tuberculose. Respostas leucocitrias nos ruminantes

Nestes animais, os linfcitos so as clulas presentes em maior nmero na circulao e o co partimento medular de reserva de neutrfilos segmentados bastante pequeno. Nos estg ios iniciais das inflamaes os neutrfilos segmentados dos compartimentos marginal e circulante migram para o local atingido, tendo seu nmero diminudo na circulao. A med ula ssea libera ento neutrfilos imaturos que ento superam os maduros. H uma diminuio entuada dos linfcitos e eosinfilos devido a presena de hormnios corticosterides endge os, observando-se ento uma leucopenia. Este quadro condizente com desvio para a e squerda degenerativo, no significando prognstico desfavorvel como para as outras es pcies. Esta situao pode se manter por 6-24 horas, quando h ento progressiva liberao neutrfilos maduros pela medula, sendo que a o quadro leucocitrio deve retornar ao normal em 3-4 dias. Contagens leucocitrias absolutas e relativas A contagem diferencial de leuccitos feita manualmente deve ser baseada na identif icao de 100 clulas. A partir da contagem diferencial de leuccitos, expressa em porce ntagem (contagem relativa) e o nmero total da contagem de leuccitos por ml de sang ue, obtm-se o nmero total de cada leuccito por ml de sangue (contagem absoluta), de terminando-se assim se houve um aumento ou decrscimo no nmero total daquele leuccit o em particular. Os erros de interpretao so menos provveis de ocorrer quando os valo res absolutos so usados, pois eles permitem a avaliao mais precisa que os valores r elativos. Por exemplo, 65% de neutrfilos segmentados, para um co adulto com uma co ntagem total de leuccitos de 10.0/ml normal? Sim, pois 6500 neutrfilos segmentados /ml uma contagem normal para esta espcie, nesta faixa etria. Por outro lado, 65% d e neutrfilos segmentados sempre normal? No. Se o animal apresentar uma contagem to tal de 1000 leuccitos/ml, sero 650 neutrfilos segmentados, significando uma neutrop enia. Se a contagem total for 50.0/ml, sero 32.500 neutrfilos segmentados, o que s ignifica uma neutrofilia. Outro exemplo, se a contagem total de leuccitos for 1.0 /ml, 20% neutrfilos segmentados iro corresponder a 200 clulas. Este mesmo valor, is to , 200 clulas significam apenas 2% se a contagem total 10.0 leuccitos/ml e 2% de neutrfilos segmentados representam 1.200 clulas se a contagem total de leuccitos fo r de 60.0/l. Interpretao do leucograma Qualquer interpretao do leucograma deve levar em considerao os valores normais para a espcie em questo, idade do animal e respostas espcie-especficas. Sabemos que anima is mais jovens possuem mais linfcitos que os adultos. Por exemplo, linfocitopenia deve ser considerada se encontramos < 2.0/ml em um co com menos de 6 meses de id ade; < 1.500/ml em um co com menos de 1 ano e < 1.0/ml em um co adulto. A raa do an imal deve ser levada em considerao especialmente em cavalos e ruminantes. A diferenciao entre leucocitose fisiolgica e leucocitose reativa requer muitas veze s considerao de outros fatores do hemograma e difcil em algumas ocasies. Hemogramas seqenciais podem ser feitos diariamente em tais pacientes, pois a leucocitose fis iolgica transitria.

As alteraes nas contagens dos leuccitos podem envolver alteraes na produo, liberao

ibuio intravascular e consumo pelos tecidos. Por exemplo, os neutrfilos circulantes esto em equilbrio com os neutrfilos do compartimento marginal e do compartimento d e reserva da medula. Uma demanda inicial de neutrfilos atendida pela mobilizao das clulas do compartimento marginal e do compartimento circulante, depois pelo compa rtimento de reserva da medula e finalmente por aumento na granulopoiese e liberao acelerada. Portanto, o tamanho do compartimento circulante, compartimento margin al e do compartimento de reserva e a capacidade proliferativa da medula so import antes na resposta neutroflica do organismo. Referncias bibliogrficas BUSH, B.M. Interpretation of Laboratory Results for Small Animal Clinicians Blac kwell Scientific Publications, Oxford, 1994, 515p. JAIN, H.C. Schalm's Veterinary Hematology, Lea & Febiger, 4 ed, Philadelphia, 19 86, 1221p. NAVARRO, C.E.K.G., PACHALY, J.R. Manual de Hematologia Veterinria. Livraria Varel a, So Paulo, 1994, 163p. WILLARD, M.D., TVEDTEN, H., TURNVALD, G.H. Small animal diagnosis by laboratory methods.. W.B. Saunders Company, 2 ed., Philadelphia, 1994, 377 p. Hemostasia ndice Introduo Sintomatologia clnica Fatores envolvidos Hemostasia primria Hemostasia secu ndria Fibrinlise Avaliao laboratorial Esquema diagnstico Anormalidades de hemostasia Nomenclatura internacional dos fatores de coagulao do sangue Introduo

Entende-se por hemostasia processos naturais e ou artificiais, fisiolgicos e bioq umicos envolvendo tanto estimulantes como inibidores da coagulao, necessrios para im pedir que o sangue escape dos vasos lesados. Esses processos englobam vasos, pla quetas, fatores de coagulao e mecanismo fibrinoltico tendo as funes de limitar a perd a sangnea, preservar a perfuso tecidual e reparar a leso local. Quando envolve apena s substancia intravasculares chamado sistema intrnseco e quando envolve tambm fato res teciduais denominado sistema extrnseco. O histrico do animal constando a idade , sexo e raa muito importante pois as coagulopatias hereditrias so muito comuns em animais jovens; as adquiridas so mais comuns em animais idosos; aquelas envolvend o os fatores VIII e IX so ligados ao cromossoma X ocorrendo primariamente em mach os e algumas raas so mais propcias a apresentarem deficincias de fatores de coagulao, tais como Doberman, Pastor Alemo e outros. Estes processos hemostticos envolvem si stema intrnseco e extrnseco. O primeiro envolve apenas as substncias intravasculare s e o segundo envolve tambm fatores teciduais. Sintomatologia clnica Os sinais e sintomas das alteraes hemostticas podem ser brandos ou emergenciais, ob servando-se hemorragias puntiformes (petequias), epistaxe, sangramentos gastroin testinais (hematoquezia e melena), hematmese, hemorragias oculares, hemartroses, hematomas. Fatores envolvidos Vasculares Dependem da existncia de vasos sangneos funcionais e com estrutura ntegra, pois o en dotlio vascular participante dinmico em muitos aspectos da hemostasia. O mesmo con stitui-se de monocamada de clulas na superfcie luminal dos vasos, possuindo caract

ersticas prprias nas artrias, veias, vnulas, arterolas e capilares nas vrias partes d corpo. As caractersticas superficiais do endotlio e o glicoclix endotelial associa do contribuem para a tromboresistncia endotelial. Tromboresistncia o mecanismo pel o qual o sangue no coagula dentro dos vasos, sendo a maior funo das clulas endotelia is e depende de atributos estruturais, sintticos e metablicos. Essas propriedades antitrombognicas incluem mecanismos ativos e passivos. O mecanismo passivo corres ponde a carga negativa que repele substncias de carga similar e clulas. Os constit uintes do glicoclix so anticoagulantes naturais como o sulfato de heparan, a hepar ina e o sulfato de dermatan. O sulfato de heparan estimula a atividade da antitr ombina I, anticoagulante mais importante circulante no plasma, provendo 80% do e feito anticoagulante. A heparina o anticoagulante mais importante encontrado na microcirculao. As clulas endoteliais tambm processam a trombomodulina que receptor s uperficial para a trombina ajudando a inativ-la. O complexo trombina-trombomoduli na estimula a protena C, substncia vitamina K dependente, que tem atividade tambm a nticoagulante, mediando a inibio dos fatores V e VIII ativados. O endotlio produz a inda ADPase, (enzima que inativa o ADP) e a prostaciclina (PGI). O ADP ativador fisiolgico das plaquetas e o PGI vasodilatador e inibidor da agregao plaquetria atra vs da elevao do contedo celular de monofosfato cclico de adenosina (CAMP) inibindo a agregao plaquetria. O tromboxano A2 a prostaglandina plaquetria mais ativa e antago ista dos efeitos da PGI. As clulas endoteliais produzem ainda elastina, colgeno, f ibronectina e fator de Von Willebrand que tem papel importante na formao do tampo h emosttico primrio. O colgeno promotor de aderncia das plaquetas aos componentes sube ndoteliais; a fibronectina e a globulina promovem adeso, agregao e aglutinao plaquetr a e o fator de Von Willebrand componente da molcula do fator VIII, sua falta difi culta a adeso plaquetria e liberao de fator VIII. Outra funo endotelial produo de or tecidual do plasminognio (ATP) que converte plasminognio em plasmina responsvel pela lise do cogulo de fibrina. Plaquetas Tambm denominados trombcitos so pequenos fragmentos citoplasmticos derivados dos meg acaricitos produzidos na medula ssea, bao, fgado e pulmes que apresentam as seguintes funes: adeso e liberao de eventos contrateis, agregao e retrao do cogulo. Fatores de coagulao

So protenas plasmticas (glicoprotenas), que circulam em estado inativo sendo seqencia lmente ativadas aps exposio ao colgeno ou fator tecidual. O nico fator no proteico ator IV (Ca2+ ), que necessrio na maioria das reaes.Todos esses fatores so produzido s no fgado com exceo dos fatores VIII e o fator IV. Acredita-se que a sntese do fato r VIII seja dividido em duas partes:, o fator VIII:von Willebrand (F VIII:VWF) v em das clulas endoteliais e megacaricitos e a outra parte, o (F VIII:C), possivelm ente do fgado. Todos os fatores esto presentes no plasma, com excesso do fator I (t romboplastina tecidual). Estas protenas so divididas em trs grupos: o primeiro grup o ou famlia fibrinognio, compe-se de fibrinognio (fator I) e dos fatores V, VIII, e XIII; o fator XIII estabiliza a fibrina e os outros atuam como substrato para tr ombina. Os fatores V e VIII servem como cofatores que aceleram o processo de coa gulao, so lbeis no sendo encontrados em sangue estocado. No segundo grupo, que vitam na K dependente, tambm chamado complexo protrombnico. incluem os fatores I, VI, IX , X e as protenas C e S. J o terceiro grupo chamado grupo de contato, incluem os f atores XI, XII, cininognio e calicreina. Biosntese dos fatores Os fatores I, VI, IX e X so inicialmente sintetizados pelos hepatcitos como percur sores inativos e requerem vitamina K para sua ativao. Os macrfagos produzem vrios fa tores de coagulao como os fatores I, V, VI, IX e X e fator tecidual. O fator V tam bm sintetizado pelos megacaricitos e possivelmente por clulas endoteliais. O fator de Von Willebrand (VWF) sintetizado por clulas endoteliais e megacaricitos, estand o presente nos a grnulos plaquetrios. O fator XIII alm do fgado, sintetizado nos meg

acaricitos, moncitos e tambm pela placenta. Os megacaricitos produzem tambm fibrinogn o. Sistema fibrinoltico Consiste no plasmonognio e todas as molculas que convergem o convergem em plasmina . Tem funo de dissolver o cogulo de fibrina. Hemostasia primria

A hemostasia secundria consiste na formao de fibrina pelos fatores de coagulao para e stabilizar o tampo hemosttico primrio. A mesma exposio ao colgeno atravs da leso va r inicia a cascata de coagulao. A pr cralicreina e o cininognio dos tecidos lesados potenciam esta ativao. A prpria carga negativa tecidual estimula a ativao do fator XI I, ativando o sistema intrnseco. Ao mesmo tempo as clulas endoteliais lesadas prov ocam exudao da tromboplastina tecidual (fator I) que ativa o fator VII, iniciando o sistema extrnseco. Finalmente o fator X ativado dispara a formao da fibrina entre laada na qual se formar a malha de eritrcitos. A trombostenina dentro do cogulo plaq uetrio se contrai, formando o grande tampo em cobertura. Durante todo o processo m ecanismos reguladores mantm o processo de coagulao localizado. A trombina liga-se a os receptores das clulas endoteliais integras e liberam a PGI2 que tem a funo de in ibir a agregao plaquetria; o complexo heparina antitrombina I cessa o processo de c oagulao. Estes fatores de coagulao ativados precisam ser eliminados e o so por proces sos celulares (SFM, fgado, pulmes, neutrfilos) e humorais. Hemostasia secundria

A hemostasia secundria consiste na formao de fibrina pelos fatores de coagulao para e stabilizar o tampo hemosttico primrio. A mesma exposio ao colgeno atravs da leso va r inicia a cascata de coagulao. A pr cralicreina e o cininognio dos tecidos lesados potenciam esta ativao. A prpria carga negativa tecidual estimula a ativao do fator XI I, ativando o sistema intrnseco. Ao mesmo tempo as clulas endoteliais lesadas prov ocam exudao da tromboplastina tecidual (fator I) que ativa o fator VII, iniciando o sistema extrnseco. Finalmente o fator X ativado dispara a formao da fibrina entre laada na qual se formar a malha de eritrcitos. A trombostenina dentro do cogulo plaq uetrio se contrai, formando o grande tampo em cobertura. Durante todo o processo m ecanismos reguladores mantm o processo de coagulao localizado. A trombina liga-se a os receptores das clulas endoteliais integras e liberam a PGI2 que tem a funo de in ibir a agregao plaquetria; o complexo heparina antitrombina I cessa o processo de c oagulao. Estes fatores de coagulao ativados precisam ser eliminados e o so por proces sos celulares (SFM, fgado, pulmes, neutrfilos) e humorais. Fibrinlise

Consiste na dissoluo do cogulo de fibrina. O sistema fibrinoltico o plasminognio e t das as substancias que convergem o plasminognio em plasmina, que responsvel pela d issoluo do cogulo de fibrina. A plasmina gerada pelos ativadores do plasminognio que so produzidos pelas clulas endoteliais em resposta a leso. A fibrina dissolvida em vrios fragmentos chamados de produtos de degradao da fibrina (FDP) que tem ao antico agulante, interferem com a funo plaquetria e tambm atuam sobre a inibio da trombina. removidos da circulao pelo fgado. A leso vascular recuperada por fibroblastos estim ulados que migram para a rea lesada e produzem colgeno para reparo vascular perman ente. Fatores de crescimento plaquetrio estimulam a formao de novas clulas endotelia is e colgeno, estimulando a produo de fibroblastos para reparar a rea lesada. Avaliao laboratorial A avaliao laboratorial deve ser sempre relacionada com a sintomatologia e histrico clnico. Como exemplo animais com distrbio de sangramento causado pela Doena de von Willebrand apresentam testes de coagulao normais apesar dos sintomas clnicos, por o

utro lado, animais com deficincia de fator XII ou deficincia de prcralicrena podero a presentar testes anormais, mas no apresentar sangramentos. Os testes de hemostasi a podem ser divididos em testes gerais que avaliam a atividade de todo o mecanis mo hemosttico (vasculares, plaquetas, coagulao e resposta fibrinoltica) e testes mai s especficos que avaliam os componentes passo a passo desses processos. Colheita

A veninpunctura inadequada pode acrescentar ao sangue colhido tromboplastina tec idual ativando fatores de coagulao e plaquetas. Qualquer remoo de sangue resulta em alguma ativao, por isso para qualquer avaliao laboratorial de hemostasia, o vaso dev e ser puncionado da primeira vez. O uso de seringas descartveis recomendado pois o vidro ativa as plaquetas. Para avaliao dos fatores de coagulao, deve-se usar sempr e plasma, que no seja colhido em EDTA, pois este evita a coagulao quelando o Ca++ . O soro tambm no deve ser utilizado porque deficiente em fatores I, I, V e tem con centraes reduzidas de fator XIII e maior concentrao de fator IX se comparado ao plas ma. O uso de seringas de plstico e vidros siliconizados imprescindvel na avaliao do processo hemosttico, no sentido de diminuir a superfcie de ativao plaquetria e proten s de coagulao. O manuseio rpido e cuidadoso do sangue importante na avaliao da fun quetria, estas se deterioram rapidamente quando retiradas da corrente sangunea. Testes gerais para avaliao da hemostasia Hemostasia geral Tempo de sangria Perfil de coagulao Tempo de coagulao Tempo de protrombina Tempo de tromboplastina parcial Tempo de tr ombina Atividade plaquetria Contagem e avaliao plaquetria Retrao do cogulo Fibrinlise Lise do cogulo Produtos de degradao da fibrina Avaliao das plaquetas Para a contagem de plaquetas deve ser usado sangue colhido em EDTA que impede a agregao das mesmas. Pode-se contar por mtodos diretos usando o hemocitmetro ou via i ndireta por avaliao do esfregao sangneo correlacionando com o nmero de hemcias. Por e mesmo mtodo avalia-se tambm a forma e tamanho das mesmas. A avaliao plaquetria via esfregao sanguneo oferece resultados satisfatrios de forma rpida. A contagem de 10 a 30 plaquetas em um campo de imerso sugere nmeros normais, isto , cada plaqueta em tal campo microscpio representa cerca de 15000/mm3. A presena de plaquetas gigante s indica hipertrofia de megacaricitos e resposta regenerativa. Tempo de sangria (TS) Este mtodo avalia-se as desordens plaquetrias e vasculares. Mede-se o tempo de san gramento desde o momento da perfurao da leso at o cessar o sangramento. No um teste specificamente laboratorial e no muito preciso, depende da espessura da pele, da profundidade da leso perfurante, do estado emocional do animal. Retrao do cogulo

A porcentagem de retrao do cogulo representada pelo volume do soro obtido, aps a coa gulao de uma quantidade determinada de sangue. Aps a retrao, o soro expulso da malha de fibrina, que se retrai pela ao das plaquetas. Este teste nos fornece dados rela tivos atividade plaquetria, em relao a quantidade e qualidade. um teste que apresen

ta variveis, no sendo muito preciso. A quantidade de trombina, de fibrinognio e val ores anormais do hematcrito, influenciam o resultado. Por exemplo, nas policitemi as, obtm-se pouca quantidade de soro e nas anemias, o hematcrito baixo fornece cogu lo proporcionalmente reduzido. Avaliao da coagulao Tempo de coagulao (TC) Avalia o sistema intrnseco, simples, mas pouco sensvel, sendo influenciado por mui tos fatores como volume do sangue, tipo do tubo, temperatura, valor do hematcrito , concentrao de plaquetas. Tempo de protrombina (TP) Avalia o sistema extrnseco e os fatores de coagulao da ca scata comum I, I, II, V, VI, X. O princpio do mtodo, baseia-se no fato que, ao plasma descalcificado adicionado ex cesso de tromboplastina. Considerando que a protrombina convertida em trombina e m tempo uniforme, a recalcificao com quantidade correta de cloreto de clcio produz coagulao do plasma. Por ser um mtodo avaliado em segundos, os processos devem ser p recisos desde a colheita, sem hemlise e sem traumatismos, com relao certa do antico agulante correto (Oxalato ou citrato). Este teste no afetado por alteraes plaquetria s. Tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPa) Avalia o sistema intrnseco e a cas cata comum sendo utilizado no diagnstico das hemofilias.

Este teste envolve tambm a recalcificao do plasma, porm, em presena de uma cefalina. A cefalina uma lipoprotena que funciona como substituto das plaquetas, fornecendo uma concentrao tima de fosfolpede. O meio de ativao por contato obtido pela adio penso de caolin ao reagente. Esquema diagnstico Deficincia plaquetria Normal Normal Normal Aumentado Deficincia do fator VII Normal Aumentado Normal Normal Sistema intrnseco Aumentado Normal Aumentado Normal Defi cincia de fibrinognio Aumentado Aumentado Aumentado Normal Anormalidades de hemostasia Congnitas . Hemofilia A (Deficincia do fator VIII) Doena hemorrgica ligada ao cromossoma X, podendo ocorrer em ces, cavalos, gatos e b ovinos. Doena de Von Willebrand Como o nome indica ocorre por deficincia deste fator, sendo comum em ces das raas D oberman, Pastor Alemo, Poodle e Schnauzer, sunos e eqinos.

Deficincia do fator VII Ocorre com alta incidncia em ces da raa Beagle. Deficincia fator X Descrito em ces da raa Cocker Spaniel. Deficincia de fator XI Observado em bovinos e ces da raa Springer Spaniel. Hipoprotrombinemia Comum em ces da raa Boxer . Adquiridas

Deficincia de vitamina K Intoxicao por veneno de rato (Warfarina). Em sunos devido a tratamento prolongado com antibiticos. Doena heptica Diminuio da sntese de fatores coagulao, No remoo de produtos de degradao da fibrina, M absoro de vitamina K.

efrite Perda de antitrombina 3. Nomenclatura internacional dos fatores de coagulao do sangue I - Fibrinognio I - Protrombina I - Trombloplastina tissular IV - Clcio V - Fator lbil, AC-globulina, proacelerina VII - Proconvertina, fator estvel VIII - Fator an ti-hemoflico (FAH), tromboplastinognio IX - Componente tromboplastnico do plasma (C TP), fator de Christmas X - Fator de Stuart-Power, fator de Stuart XI - Antecede nte tromboplastnico do plasma (PTA) XII - Fator de Haegeman, fator de ativao "in vi tro" XIII - Fator de estabilizao da fibrina (FEF), fibrinase, fator de Laki-Lorand Avaliao laboratorial do lquido cfalo raquidiano ndice

Introduo Produo / circulao Funes Colheita Riscos e contra indicaes Tcnica de col laboratorial Bibliografia e literatura recomendada Introduo

O Sistema Nervoso Central (SNC) est completamente alocado dentro de ossos dificul tando avaliao clnica satisfatria e procedimentos tais como bipsias e avaliaes radiog as. O crebro mantm estrito isolamento do restante do organismo; muitas substncias q ue circulam pelo corpo podem nunca penetrar no liquido cfalo raquidiano (LCR) e v ice versa, substncias qumicas cerebrais e do LCR nunca se difundiro para a circulao g eral. Essa caracterstica mantida pela barreira hematoceflica, que uma entidade fsic a e qumica que mantm o crebro estvel no corpo que sujeito a variaes drsticas. A bi eralmente traumtica, podendo ocasionar leses irreversveis no SNC e, as radiografias normalmente oferecem poucas informaes. Alguns exames como tomografias computadori zadas e ressonncia magntica so onerosos e de difcil acesso. O exame do LCR ou o lquor um teste diagnstico do SNC que fornece boas informaes, e com treinamento e prtica, oferece mnimo de trauma. Produo / circulao Cerca de 70% do lquor (LCR) produzido primariamente nos plexos corides do sistema ventricular cerebral, outros 30% so formados em outros stios como as clulas ependim ais do sistema ventricular e dos espaos subaracnides cerebrais. Normalmente duas b arreiras podem ser identificadas entre os capilares sanguneos que nutrem o SNC e o fluido intersticial das clulas neuronais. A primeira, a barreira sangue - lquor uma membrana semipermevel formada por endotlio vascular e clulas ependimais altas d o plexo coride que protege o SNC de vrias substancia, inclusive inicas. O lquor o re sultado da ultrafiltrao do plasma e transporte ativo atravs desta membrana. Uma seg unda barreira, a barreira LCR - crebro permite que alguns materiais sejam transpo rtados do LCR para o fluido intersticial do crebro e medula espinhal. Quando comp arado com o plasma, o lquor possui discretamente mais cloretos, sdio e magnsio; dis cretamente menos potssio, clcio e glicose e significativamente menos protenas. rela tivamente acelular, contendo poucos linfcitos. Sua velocidade de formao cerca de 0, 05 c/minuto em ces e 0,02 c/minuto em gatos e essa velocidade independente da pre sso do lquor ou da presso hidrosttica sangunea, mas reduzida por aumento da presso ica. Sua circulao ocorre no sistema ventricular, entrando nos espaos sub aracnides a travs de aberturas laterais do quarto ventrculo cerebral. Nos espaos subaracnides di funde-se entre as membranas sub aracnides e pial da coluna vertebral e do crebro, banhando toda superfcie do SNC. O fluxo primariamente no sentido caudal sendo na maioria das vezes absorvido atravs das vilosidades aracnides nos seios venosos e v eias cerebrais. Estas estruturas atuam como vlvulas de uma s direo (lquor - sangue ve noso) que se abrem quando a presso do lquor excede a presso venosa e se fecham quan do a presso venosa aumenta, prevenindo o retorno do sangue venoso para os espaos s ub aracnides. Pequenas quantidades so absorvidas pelas veias e linfticos encontrado s ao redor das razes dos nervos espinhais, primeiro e segundo par craniano quando

saem do crnio. Funes O LCR cobre todo o SNC mantendo o crebro e a medula espinhal suspensos, protegend o-os de injrias. Ajuda a modular as variaes normais da presso intracraniana (PIC) ju nto com o fluxo sangneo cerebral, possui propriedades antibacterianas e anticorpos , assim como meio de transporte de nutrientes, metablitos, neurohormnios e neurotr ansmissores. Colheita O LCR um importante aliado no diagnstico das doenas do SNC, mas a colheita pode se r perigosa, devendo-se tomar certos cuidados. Riscos e contra indicaes Anestesia Os cuidados na monitorao da anestesia so muito importantes; em pequenos animais ela feita com animais entubados e controlados; nos grandes animais, pela dificuldad e de anestesia, recomenda-se boa tranqilizao e boa conteno para evitar traumas medula res. Traumatismo A colheita requer experincia e/ou acompanhamento de pessoas experientes. O treina mento em cadveres recomendado. Como o LCR cobre a medula espinhal, qualquer proce sso traumtico pode ocasionar leses irreversveis. A penetrao da agulha pode traumatiza r um ramo do plexo venoso vertebral que corre juntamente com a juno atlanto-occipt al. Como este traumatismo no ocasiona leses no animal, nova puno deve ser efetuada. Contaminao Como um espao fechado e estril, recomenda-se total assepsia para evitar veiculao de doenas contagiosas, assim como evitar o contgio do colhedor em casos de doenas infe cto contagiosas. Presso intracraniana Em casos de traumas cranianos, edemas cerebrais, hematomas sub durais, aneurisma s, abscessos, neoplasias onde a presso intracraniana poder estar alterada, a remoo d o lquor pode causar baixa presso nas reas puncionadas em relao ao compartimento intra craniano ocasionando herniao do forame magno tentorium ou hrnia cerebelar. Tcnica de colheita

Em geral recomenda-se anestesia geral e intubao dos pacientes assim como preparao de rea cirrgica. Como o LCR no possui diferenas de composio durante o seu percurso, pod -se colher tanto em puno cisternal como lombosacral. Alguns autores indicam a colh eita prxima da leso como meio mais eficiente de diagnstico, mas devido dificuldade de colheita fora do forame magnum, pouco usado. Colhe-se normalmente em trs frasc os: contendo EDTA, estril para cultura e frasco normal. Ces e gatos Nestes animais utiliza-se principalmente a colheita occipital, ou cisterna magna , podendo em alguns casos nos ces, utilizar-se colheita lombar. Colheita na cisterna magna O paciente colocado em decbito lateral, com a cabea formando um ngulo de 90 com a co

luna cervical. No inclinar demais a cabea para evitar obstruo traqueal. Delinear o e spao entre a protuberncia occipital e a ponta crnio dorsal da vrtebra C2, o espao med iano o local onde inserimos a agulha. Esta agulha deve ter um estilete para evit ar entupimento no transpassar da pele como tambm evitar contaminao celular intramed ular. Esperar o gotejamento evitando a aspirao. A quantidade coletada varia de um a dois ml que ser suficiente para todos os exames, devendo-se colher em frascos s eparados para culturas e rotina, devendo-se os exames serem processados rapidame nte para evitar deteriorao celular. Colheita lombar

A puno neste espao de colheita mais indicado para mielografias. A colheita de lquor mais difcil, pois menor quantidade de material obtido e maior a possibilidade de traumatismos e sangramentos. A utilizao desse espao pode ser necessrio em casos de d oenas que possam obliterar o espao subaracnideo da cisterna magna, ou na localizao de doenas de origem traco - lombar, j que o fluxo do LCR no sentido caudal. A puno pod r ser entre L5 - L6 ou entre L6 -L7, tendo-se o cuidado de fletir os membros para abrir os espaos intervertebrais. Bovinos/ovinos Nestas espcies usa-se tambm as duas formas de colheita, mas preferencialmente, uti lizase colheita lombar. Colheita na Cisterna magna Como nos ces os animais so colocados em decbito lateral, podendo-se tambm fazer a co lheita com o animal em estao, sendo esta forma mais difcil. Pode-se colher um total de 100 ml de cada vez, porm dois a trs ml so suficientes para todos os exames. Colheita Lombar Pode ser realizado com animal em estao, sendo a agulha introduzida no espao entre a ultima vrtebra lombar e primeira sacra (L6 S1). O local a ser puncionado anestes iado; os animais indceis devem ser sedados. A colheita ser facilitada com o animal posicionado em decbito esternal, com os membros anteriores flexionados e os memb ros plvicos estendidos no sentido do abdmen. Eqinos

Nestes animais importantssimo a anestesia geral e intubao. O mtodo de escolha a cis erna magna, sendo o animal colocado em decbito lateral como nos pequenos animais. Pode-se tentar a colheita lombar no mesmo local dos bovinos. Anlise laboratorial Consiste nos exames fsico, citolgico e bioqumico. O exame citolgico deve ser efetuad o at 30 minutos aps a colheita ou resfriado imediatamente para evitar degenerao celu lar. Exame fsico Cor

O lquor de qualquer espcie tem cor semelhante gua, qualquer turvao indica alterao, aumento celular e/ou de protenas. A cor deve ser verificada antes e aps centrifug ao. O lquor hemorrgico que apresenta cor clara aps centrifugao indica que as hemcia intactas sugerindo sangramento recente; o lquor amarelado pscentrifugao sugere hemo rragias antigas, com degradao de eritrcitos. A xantocromia, um amarelo mais denso, sugere formao de bilirrubina derivada da degradao do eritrcito, como nos casos de hid

rocefalia, neoplasias do SNC, hemorragias subaracnideas, inflamaes agudas e ictercia s sistmicas. Densidade No parmetro muito usado, mas seu aumento acima de 1.0 indica aumento de protenas, a ceitando-se como normais, os valores entre 1004-1006 para ces e gatos e ruminante s e eqinos valores abaixo de 1010. avaliada pelo uso do refratmetro. Coagulao O lquor normalmente no se coagula, podendo ocorrer por causa de sangramento iatrogn ico ou aumento de fibrinognio. Geralmente ocorre nos processos supurativos. Exame Citolgico Citometria a contagem global das clulas do lquor, podendo ser utilizada a cmara de Neubauer ou a de Fuchs-Rosenthal. Normalmente o lquor acelular, podendo apresentar variaes nor mais de 0 - 8 clulas nucleadas /mm3, no se encontrando hemcias. O aumento do nmero d e clulas denomina-se pleocitose. As clulas do lquor se degeneram rapidamente, por i sso a contagem e avaliao celular devem ser realizada at uma hora aps a colheita. Exi stem poucas variaes do nmero celular em relao aos locais de colheita, mas espera-se n o LCR colhido na cisterna magna cerca de cinco clulas/mm3 enquanto a puno lombar co ntm menos de um clula /mm3. A pleocitose nas meningoencefalites bacterianas geralm ente apresenta nmeros altos (500-1000/mm3). As doenas virticas, Ricketisias, intoxi caes e micoses apresentam pleocitose moderada. Citologia

a parte mais importante do exame do lquor, podendo-se encontrar anomalias celular es mesmo no apresentando aumento do nmero total de clulas. Usa-se a mesma colorao par a os exames hematolgicos. A maior parte das clulas encontradas so linfcitos que se d eterioram facilmente devendo a colorao e o exame ser realizados rapidamente. Ainda podem ser encontrados poucos moncitos e raros neutrfilos. Como o lquor tem poucas clulas, usa-se centrifugao em baixa rotao para evitar danos celulares. A presena de l nfcitos reativos sugerem estmulo antignico local, doenas infecciosas, processos neop lsicos e doenas imunomediadas. A neutrofilia sugere doenas inflamatrias e bacteriana s, traumas, meningites asspticas e spticas e neoplasias; sendo que a presena de neu trfilos degenerados diagnostica infeces. Infeco por toxoplasmose e fungos apresenta u ma relao igual de mono e polimorfonucleares, nas meningoencefalites granulomatosas , h predominncia de mononucleares. Pode-se encontrar ainda clulas das meninges, ple xo coride e clulas ependimais que podem ser freqentes em amostras colhidas pela asp irao com seringa. A presena de eosinfilos apesar de ser aparentemente inespecfica, po de sugerir a presena de parasitas, hipersensibilidade, ou processos neoplsicos env olvendo o SNC. A presena de macrfagos fagocitando eritrcitos indica que a presena de sangue no LCR de cerca de mais de um dia. A presena de clulas neoplsicas pode indi car neoplasias no SNC, desde que este processo esteja em comunicao com os espaos su baracnideos. A presena de bactrias e fungos pode ser confirmada respectivamente pel a colorao de Gram e tinta da China. Exame Bioqumico Dosagem de protenas A quantificao das protenas do lquor usada para detectar um aumento na permeabilidade da barreira hematoceflica, aumento na sntese protica no SNC e traumas. A alterao de valores pode indicar processo iatrognico, inflamaes, obstruo do fluxo do LCR, aumento na sntese de imunoglobulinas e leses destrutivas locais, levando ao aumento protic

o. J que o lquor um ultrafiltrado do plasma a protena predominante a albumina. A pe rmeabilidade da barreira hematoceflica bastante aumentada nas meningites bacteria nas e em menor grau alterada por meningites virais ou encefalites, sendo que a p resena de protenas no lquor pode ser resultado tambm de aumento da presso intracrania na devido a tumores cerebrais e hemorragias intracranianas. Como a quantidade de protenas no lquor muito pequena, mtodos especiais so necessrios para sua determina nclusive com a diferenciao entre albumina e globulinas, sendo que o lquor normalmen te livre de globulinas. A quantidade de protenas no lquor dos animais domsticos var ia de 12 - 40 mg/dl com exceo dos eqinos que podem variar de 20- 120mg/dl e pode se r avaliada por mtodos qualitativos como a fita reagente para urinlise e por mtodos quantitativos como o mtodo do cido tricloractico ou o mtodo do azul cromassie. A pre sena de globulinas avaliada tambm por mtodos especficos como a reao de Pandy e Nonn ppelt. O exame de eletroforese tambm boa ajuda na diferenciao das protenas podendo c aracterizar alteraes na barreira hematoceflica, sntese de IgG local e/ou uma combinao de sntese local de IgG e alterao da barreira hematoceflica. Elevaes acentuadas so ob vadas nas meningoencefalites bacterianas podendo exceder 1,0/dl. As outras afeces oferecem elevaes moderadas. Em todas as espcies animais, a produo de imunoglobulinas intratecal resultado de infeces virais crnicas do SNC, mas, em ruminantes, as encef alites virais so poucos comuns. Glicose

A glicose no LCR dependente da concentrao no soro, pois os nveis so atingidos atravs do mecanismo de transporte atravs da barreira hematoceflica. Os valores de glicose para o lquor nos animais domsticos so menores que os valores sangneos, isto , cerca e 60 - 70% dos valores sangneos, sendo os valores mdios em torno de 40 - 80 mg/dl. O mtodo de avaliao o mesmo de avaliao sangnea. A hipoglicorrafia, isto , a diminu lores da glicose no lquor, geralmente encontrada em casos de hipoglicemia, impedi mento do transporte atravs da membrana hematoceflica, aumento do metabolismo do pa rnquima cerebral ou infeco por organismos glicolticos, isto , a utilizao da glicose microorganismos, leuccitos ou clulas do SNC. Em geral nas meningites bacterianas ocorre diminuio dos valores de glicose. A hiperglicorrafia est relacionada com o di abetes melitus. Cloretos

Em geral os nveis de cloretos so mais altos no lquor que no sangue, podendo os valo res variar entre 650 - 850 mEq/ml. Os mtodos de avaliao so os mesmos sangneos, e em c so de inflamao das meninges estes valores estaro diminudos, tendo pouca importncia di agnstica. Outros exames Enzimas A atividade de vrias enzimas tem sido medidas para avaliar se o SNC ou suas barre iras foi lesadas. Enzimas como AST, CPK, LDH podem ser medidas, mas no so especfica s para se fechar um diagnstico. Bibliografia e literatura recomendada Braund, K.G. Diagnostic Techinics IN Clinical Syndromes in Veterinary Neurology ed.London Williams & Wilikins, 19990, v.1, pag. 207-244. Coles.E.H. Fluido cerebroespinhal IN: Coles. E.H. Patologia Clnica Veterinria. 3 e d. So Paulo, Manole, 1984, pag.367-381. Feldman, B.F. IN: Kaneko J.J. Clinical Biochemistry of Domestic Animals, 4 ed., San Diego, Academic Press, 1989, p.835-865. Cook, J.R. & DeNicola, D.B. Cerebrospinal fluid, Veterinary Clinics of North Ame rica: Small Animal Practice, v. 18, n. 3, p.475-499, 1988.

Scott, P.R. The collection and analysis of cerobrospinal fluid and aid to diagno sis in ruminant neurological disease. British Vetrinary Journal, v.151, n.6, p.6 03-614, 1995. Aspectos laboratoriais das afeces de pele ndice Introduo Colheita Artrpodes Helmintos Fungos Introduo Doenas de pele so um desafio para o clnico, pois a pele responde de maneira similar as diversas afeces: prurido, alopecia, ndulos. Assim como os outros sistemas, exig e histrico e exame clnico detalhado. O raspado de pele importante auxiliar no diag nstico de algumas dermatoses, servindo para o diagnstico definitivo e avaliao do pro gnstico e da evoluo de outras. Colheita Geralmente, so utilizadas lminas de bisturi ou cureta, coloca-se o produto do rasp ado em um vidro de relgio, placa de Petri ou entre duas lminas. O raspado pode ser profundo ou superficial, deve-se recolher sangue ou secrees, dependendo da suspei ta clnica. Para fixar o material lmina de vidro, pincelar o local com leo mineral e /ou embeber o bisturi. Este procedimento tambm feito na dependncia da suspeita clni ca. Artrpodes Demodicose Quando adequadamente efetuados e interpretados, os raspados de pele possuem valo r diagnstico definitivo, pois os caros so facilmente encontrados. A parte da pele a fetada deve ser comprimida vigorosamente entre os dedos para facilitar a extruso dos caros do interior dos folculos. Os raspados devem ser profundos at que se obser ve sangramento capilar e realizados em diversos locais. Colocar o material entre lmina e lamnula e examinar no aumento 40 X. Podem ser observado quatro estgios do ciclo de vida do Demodex: ovos em forma de fuso; ninfas com oito pernas; adultos com oito pernas. larvas com seis pernas;