Rosenbaum, et al., 2009. The structure and function of G-protein-coupled receptors. Nature, Vol 459.

How does this complex functional behavior reconcile with the biochemical and biophysical properties of GPCRs? The effect of a ligand on the structure and biophysical properties of a receptor, and hence on the biological response, is known as the ligand efficacy. Natural and synthetic ligands can be grouped into different efficacy classes (Fig. 1, inset): full agonists are capable of maximal receptor stimulation; partial agonists are unable to elicit full activity even at saturating concentrations; neutral antagonists have no effect on signalling activity but can prevent other ligands from binding to the receptor; and inverse agonists reduce the level of basal or constitutive activity below that of the unliganded receptor. The wide spectrum of ligand efficacies for individual GPCRs shows that efficient energy transfer between the binding pocket and the site of G-protein interaction is dependent on multiple interactions between receptor and hormone, and requires more than simply occupying the binding site. Further, biophysical studies on purified fluorescently labelled 2AR demonstrated that partial and full agonists containing different subsets of functional groups stabilize distinct conformational states by engaging with distinct subsets of conformational switches in the receptor1214. These findings lead to a complex picture of GPCR activation in which a distinct conformation stabilized by a ligands structure determines the efficacy towards a specific pathway. Many GPCRs can stimulate multiple signalling systems, and specific ligands can have different relative efficacies to different pathways15. In the extreme case, even opposite activities for different signalling pathways are observed: for 2AR, agonists for the arrestin/ MAP kinase pathway are also inverse agonists for the classical Gs/ cAMP/PKA pathway7,16. GPCRs are no longer thought to behave as simple two-state switches. Rather, they are more like molecular rheostats, able to sample a continuum of conformations with relatively

closely spaced energies17. Specific ligands achieve varying efficacies for different signalling pathways by stabilizing particular sets of conformations that can interact with specific effectors.

-- Comunicao e sinalizao celular

Do simples para o complexo, molculas organizadas formam as clulas, que unidas formam os tecidos, que unidos formam os rgos, os quais unidos formam os sistemas orgnicos que criam e mantm a vida. A vida de todos os organismos pluricelulares baseia-se na comunicao e nas interaes entre as clulas que os compem

Assim pensando, a vida depende basicamente do bom funcionamento de suas clulas, tanto de forma individual como de forma coletiva. De forma individual as clulas devem ter aparatos que permitam garantir a normalidade estrutural e bioqumica, e de forma coletiva devero se relacionar atravs de sistemas de comunicao e sinalizao. Essa comunicao poder ocorrer por contato direto ou por intermdio de molculas de sinalizao. A habilidade das clulas de perceber e responder a sinais alm de sua membrana plasmtica fundamental para vida. Organismos unicelulares, como bactrias, por exemplo, recebem constantes input de protenas de membrana que atuam como receptores de informaes, sinalizando o pH do meio ao redor, a presso osmtica, a disponibilidade de comida, oxignio e luz e a presena de predadores ou competio por comida. E esses sinais provocam respostas apropriadas, como mover-se em direo a comida ou mover-se para longe de substncias txicas ou formar esporos dormentes em um meio escasso de nutrientes. Nos organismos multicelulares, a troca de informaes acontece por meio de
molculas, que so sinais ou mensageiros qumicos, comea na vida embrionria e constitui, durante toda a vida, o principal meio de comunicao entre as clulas. Esses sinais so importantes para que os tecidos e rgos se formem de modo ordenado e, aps a estruturao estruturao do corpo, so necessrios para coordenar o crescimento e o funcionamento das diferentes partes do organismo. Os mensageiros qumicos influenciam o metabolismo, a multiplicao celular, a secreo, a fagocitose, a produo de anticorpos, a contrao e muitas outras atividades celulares. Molculas de sinalizao: Protenas; Pequenos peptdeos; Aminocidos; Nucleotdios; Esterides; Retinides; Derivados de cidos graxos; Gases (ex.: NO)

A maioria dessas molculas so secretadas por exocitose, mas tambm podem ser liberadas por difuso ou permanecem ligadas a superfcie celular. Mecanismo bsico de sinalizao Receptor: Protena especfica da clula alvo capaz de ligar-se a molcula sinalizadora e desencadear uma resposta na clula alvo. A molcula sinalizadora se liga a uma protena receptora (que normalmente incorporada na membrana plasmtica), ativando uma via de sinalizao intracelular que mediada por uma srie de protenas de sinalizao. No final de cada via de sinalizao intracelular esto as protenas-alvo, que so alteradas quando a via est ativa e altera o comportamento da clula. Dependendo do efeito do sinal, estas protenas alvo pode ser

gene protenas reguladoras, canais inicos, componentes de uma via metablica, partes do citoesqueleto, e assim por diante. Transduo de sinal: converso do sinal em resposta celular atravs de um processo qumico. Propriedades de sinalizao: Especificidade: A molcula sinalizadora se liga ao stio complementar do receptor, onde outros ligantes no se ligam. Amplificao: Quando enzimas ativam enzimas, o nmero de molculas afetadas aumentam geometricamente em uma cascata enzimtica. Dessensibilizao/ adaptao: A ativao do receptor dispara um circuito de feedback que bloqueia o receptor, ou o retira da superfcie. Integrao: Quando dois sinais tem efeitos opostos sobre uma caracterstica metablica, a resposta regulatria resulta de um in put integrado de ambos receptores. Comunicao por Contato direto Junes comunicantes => Permitem a passagem direta de molculas pequenas (<1500Da) entre as clulas tais como os eletrlitos e os 2 mensageiros. Clulas conectadas por gap junctions dividem pequenas molculas, incluindo pequenas molculas de sinalizao intracelular e podem responder a sinais extracelulares de forma coordenada. Interao entre molculas de superfcie Protenas ligadas membrana plasmtica de uma clula podem interagir com receptores de uma clula adjacente. Ex: Fator de crecimento epidrmico (EGF). Molculas de aderncia so glicoprotenas transmembrana que pertencem a cinco grandes famlias: 1- Integrinas 2- Caderinas 3- Selectinas 4- Imunoglobulinas 5- Molculas ricas em leucina As molculas de aderncia celular desempenham papis importantes tanto durante o desenvolvimento embrionrio quanto nos fenmenos de reparao tecidual e combates a invases tumorais na vida adulta. Comunicao por Molculas de sinalizao As molculas de sinalizao de origem celular podem pertencer a vrias famlias de substncias bioqumicas e atuaro como mensageiras entre duas clulas mais ou menos distantes entre si. Dentre os diferentes tipos de comunicao celular que envolvem molculas de sinalizao destacam-se: Comunicao parcrina Comunicao entre clulas vizinhas que no utiliza a circulao. Ex: clulas endoteliais-musculatura lisa vascular, onde o xido ntrico atua como modulador do tnus. As molculas sinalizadoras (mediadores locais) agem em mltiplas clulas-alvo, prximas do local de sua sntese. Ex: fatores de crescimento, citocinas, interleucinas, eicosanides e neurotransmissores

Comunicao autcrina Ocorre quando o sinal age sobre a clula que o emitiu. Muito utilizado com a inteno de amplificar sinais, como a retroalimentao positiva. Pode tambm atuar na retroalimentao negativa, inibindo sua prpria sntese. Vale ressaltar, que h necessidade de que a clula que produz a substncia, tambm possua receptor para a mesma. A clula responde a substncias liberadas por ela mesma. As molculas sinalizadoras so os mediadores locais, como por exemplo alguns fatores de crescimento. Comunicao endcrina Torna possvel a ligao de clulas distantes atravs de sinais qumicos. As molculas sinalizadoras so os hormnios. Atingem a clula alvo atravs da circulao sangunea. A molcula sinalizadora (hormnio) age na clula alvo distante do stio de sntese. Comunicao sinptica: A molcula sinalizadora (neurotransmissor) age em uma clula alvo prxima de onde ela foi formada. Comunicao neurcrina Semelhantemente parcrina, essa comunicao ocorre entre clulas prximas. A diferena existe no tipo de ligao, tendo em vista que a comunicao neurcrina somente liga uma clula nervosa a outra, ou a uma clula muscular. O mecanismo bsico a sinapse (neuro-neuronal ou neuro-muscular). As trocas de informaes entre as clulas condicionam e regulam o funcionamento dos rgos e determinam a homeostase de todo o organismo. As informaes so transmitidas de clula a clula sob a forma de molculas. De acordo com a natureza qumica das molculas de sinalizao ocorrero respostas celulares diferentes em diferentes locais. As molculas podem ser classificadas em: Hidrossolveis So pequenas molculas derivadas dos aminocidos, as catecolaminas, ou peptdeos, molculas de grande peso. So os neurotransmissores ou hormnios. Lipossolveis Molculas de pequeno tamanho, cuja capacidade de difuso atravs da membrana celular as caracteriza. Podem ser derivadas do colesterol (esterides), derivadas de aminocidos (tireideos) ou compostos gasosos (ON e CO). Para que haja resposta a uma determinana molcula sinalizadora a clula dever ter a capacidade de reconhecer a substncia. Este reconhecimento feito atravs dos receptores localizados na membrana celular, no citosol ou no ncleo. Os mecanismos de homeostase envolvem ao de diversos receptores distribudos nos vrios compartimentos orgnicos. Na medida em que voc for aprofundando seus conhecimentos nas diversas sees dessa WebQuest voc ser informado sobre os diferentes receptores envolvidos em respostas que visam o equilbrio e manuteno do ambiente interno, ou seja, a homeostase.

Molculas sinalizadoras e seus receptores

A - Molculas de sinalizao ativas nos receptores da membrana 1 - Hormnios peptdicos - Hipotalmicos (TRH, CRH, GH-RH, GnRH, etc) - Adeno-hipofisrios (GH, TSH, ACTH, prolactina, LH, FSH) - Neuro-hipofisrios (ADH, ocitocina) - Tireideos (Calcitonina)

- Paratormnio (PTH) - Pancreticos (Insulina e glucagon) - Fatores endoteliais (endotelina) 2 - Citocinas 3 - Eicosanides (prostaglandinas e tromboxanos) 4 - Neurotransmissores (norepinefrina, acetilcolina, serotonina, etc) e neuropeptdeos B - Molculas de sinalizao ativas nos receptores intracelulares (citoslicos e/ou nucleares) 1 - Hormnios esterides - Glicocorticides e mineralocorticides - Sexuais (testosterona, estrognios, progesterona) - Vitamina D 2 - Hormnios tireideos (T3/T4) 3 - CO, ON