Antibiticos

Antibitico droga com capacidade de interagir com microorganismos mono ou pluricelulares que causam infeces no organismo Bactericida - quando elimina a bactria Bacteriosttico - quando interrompe a reproduo da bactria, deixando ao sistema imunitrio a tarefa de eliminar a infeco Quimioterpico substncia qumica produzida por sntese capaz de inibir o crescimento de microrganismos (ex.: sulfas)

Mais de 20.000 antibiticos descritos Aproximadamente 100 - uso clnico Combinao de sntese microbiana e modificao qumica:
penicilinas, cefalosporinas, dihidroestreptomicina, clindamicina, tetraciclinas, rifamicina
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Caractersticas
ser ativo frente ao patgeno in vivo; no deve produzir reaes indesejveis, ou seja, deve ser relativamente atxico para fagcitos, clulas, tecidos e rgos do corpo; no deve hemolisar o sangue; no deve precipitar as protenas do soro; deve ser solvel em gua ou soro fisilogico; ser relativamente estvel.

Atividade capacidade de um antibitico de inibir o crescimento dos microrganismos Potncia atividade relacionada com a massa Nvel Srico A via de absoro pelo organismo varia com o antibitico: muscular, venosa e oral. Estas substncias concentram-se no sangue e sua dose deve ser suficiente para atingir uma concentrao mnima inibidora O antibitico deve ser ingerido periodicamente de modo a manter a concentrao mnima letal ao patgeno
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Classes Qumicas

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Antibiticos -lactmicos

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Penicilinas

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Penicilinas

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Mecanismos de Ao

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Mecanismos de Ao

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Mecanismos de Ao

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Efeitos de Antibiticos -lactmicos

Enterobacter aerogenes: [A] morfologia normal (cultivo 8h) [B] morfologia em cultivo contendo 2 g/mL de amdinocilina (penicilinas)

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Efeitos de Antibiticos -lactmicos

Escherichia coli: [C] morfologia normal [D] morfologia aps 30 min contato com ceftazidima (celafosporinas) _________________________________________________________________________________ EQB353 Microbiologia Industrial Escola de Qumica / UFRJ

Pesquisa de Antibiticos

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Caractersticas de microrganismos produtores

crescimento rpido em substrato econmico produo das substncias desejadas em quantidades e condies econmicas aprimoramento da capacidade produtora conservao das caractersticas biossintticas, sem grandes riscos de variao baixa produo de substncias que interfiram com a extrao do antibitico ausncia de patogenicidade, etc
Tirotricina; Gramicidina Bacillus brevis Bacillus licheniformis Bacitracina Polimixina Bacillus polimixa ACTINOMICETOS Streptomyces griseus Estreptomicina Streptomyces erytheus Eritromicina Kanamicina Streptomyces kanamyceticus Neomicina Streptomyces fradiae Anfotericina Streptomyces nodosus Streptomyces aureofaciens Tetraciclina BOLORES Penicillium chrysogenum Penicilina Penicillium notatum Ampicilina Penicillium chrysogenum Griseofulvina Penicillium patulum Fumagilina Aspergillus fumigatus Cephalosporium acremonium Celafosporina Variotina Paecitomyces varioti _________________________________________________________________________________ EQB353 Microbiologia Industrial Escola de Qumica / UFRJ BACTRIAS

Quantificao
Teste da Diluio em Tubos

Concentrao Inibitria Mnima (MIC): menor concentrao que capaz de prevenir o crescimento do microrganismo 99% menores valores de MIC maior atividade anticrobiana
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Quantificao

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Quantificao
Tcnica do Halo de Inibio

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Caractersticas da Produo
Processos aerbios Esterilizao de meio e de equipamentos - etapa importante: menos de 2 % das bateladas devem ser perdidas como resultado de infeces por microrganismos resistentes ao antibitico ou com fagos Inculos de 10% do volume a fermentar Controle de Temperatura e pH Contnua adio de nutrientes e precursores Quantidades relativamente elevadas de carbono

sntese de componentes celulares respirao celular produo de substncias aparentemente no so necessrias atividade metablica normal a clula
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Meios de Produo

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Produo de Penicilina
Operao em Batelada Alimentada: adio controlada de um acar facilmente metabolizvel - mantm na fase de produo uma atividade catablica adequada fermentao da penicilina permite manter ao mesmo tempo as condies de fermentao em estado quaseestacionrio e a cultura em estado transiente (i.e., vivel), indispensvel a uma boa produo de antibitico: 1. operar o fermentador entre os limites superior e inferior de atividade catablica (e.g., evitando a represso catablica) 2. operar abaixo dos nveis de inibio/toxicidade por substncias essenciais biossntese (e.g., fonte-N e precursor) 3. reduzir a durao da fase de crescimento (acelerando o crescimento) 4. prolongar a durao da fermentao (manter a biomassa vivel mais tempo) 5. operar em concentraes de biomassa elevadas e constantes (i.e., utilizar eficientemente a biomassa produzida) 6. repr a gua evaporada com a aerao do cultivo (contrariando o aumento de viscosidade do meio e a co-limitao pelo O2) Curto perodo de operao descontnua (ca. 12 h) Adies ao longo da fermentao (ca. 180 a 220 h) T = 25-27C ; pH timo de crescimento = 4.5 a 4.7 ; pH timo de produo = 6.8 a 7.4 Velocidade de aerao = 0,5 e 1,0 m3 de ar / m3 de meio / min (vvm) Agitao = 120-150 rpm Morfologia de pellets pequenos e pouco compactos

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Produo de Penicilina
Penicillium chrysogenum microrganismo estritamente aerbio fonte orgnica de carbono fonte orgnica ou inorgnica de nitrognio mesoflico (24oC) pH entre 4.5 e 4.7 (suportam at 3.5)

Os fungos produtores so caracterizados por variaes constantes: Em geral, quanto maior a produtividade da cepa, maior a sua instabilidade Conservao: 1. repiques sucessivos: s se for para meios diferentes, de modo a diminuir a possibilidade de adaptao ou selecionamento fisiolgico; corir a superfcie do meio contendo os repiques com leo mineral (retarda a dessecao bem como diminui as trocas gasosas com o meio ambiente, diminuindo a atividade metablica do microrganismo) 2. em solo ou areia estril (mantidos a 2-4oC) 3. liofilizao (esporos) 4. congelamento
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Produo de Penicilina

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Produo de Penicilina

precursor

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Cintica de Produo

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Produo de Penicilina

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Resistncia aos Antibiticos

Intrnseca ou adquirida Emprego generalizado e indiscriminado de antibiticos Originada por mutao ou transferncia gentica MUTAES: mutaes pontuais, transposio de segmentos de genes, inseres, delees, inverses TRANSFERNCIA GENTICA: plasmdeos, bacterifagos, transposio de genes (do plasmdeo para o cromossomo)

Controle: preveno de mutantes (doses altas ou terapia combinada) preveno da disseminao de mutantes ( emprego) eliminao de cepas resistentes durante o tratamento (ex: penicilinas resistentes beta-lactamase)

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Mecanismos de Resistncia aos Antibiticos

Modificao no stio alvo do frmaco Perda da permeabilidade celular a um frmaco Produo enzima inibida / metablito antagonista do frmaco Abertura de rota alternativa que contorna a via inibida Menor necessidade do produto gerado pelo sistema inibido

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