Informe practica 5 microbiologa ambiental

PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO

Presentado por:
Wilmer Venegas Zambrano (2096316)
Ing. ambiental





Presentado a:
Prof. RAFAEL GABRIEL BARRAGAN GONZALEZ






Universidad Santo Tomas
Microbiologa ambiental
Bogot DC
25/03/2012
Informe practica 5 microbiologa ambiental



El crecimiento de microorganismos in vitro requiere de la presencia de nutrientes y
condiciones medioambientales adecuados para un buen desarrollo, para ello se utilizan
los medios de cultivos.
Durante el desarrollo de la practica se realizaron dos sesiones, la primera sesin se hiso la
identificacin, aplicacin, funcin de algunos medios de cultivo, por otra parte, durante la
segunda sesin se realizo un post entrenamiento para el manejo asptico y utilizacin de
algunos medios de cultivo.
ANLISIS Y CONCLUSIN DE RESULTADOS
1 sesin:
En el laboratorio, se clasificaron diferentes medios segn su estado fsico, composicin y
utilizacin, obteniendo los siguientes resultados:



Medio de cultivo


pH
Uso Estado fsico Composicin Origen
C
o
m

n


E
n
r
i
q
u
e
c
i
m
i
e
n
t
o

S
e
l
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c
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v
o

D
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C
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N
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m
i
-
s
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n
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c
o

s
i
n
t

t
i
c
o

Agar para recuentos
en placa
7.0 X X X X
Bacto_caldo de soja
tripica
7.3 X X X X
Baird-parker agar
base
6.8 X X X X
Sabourad doxtrose
agar
5.6 X X X X
Estndar plate count
agar (APH)
7.0 X X X X
Brain heart infusin
agar
7.4 X X X X
Eosin methy lene blue
agar
6.8 X X X X
Oxytetracycline
glucose yeast
7.0 X X X X
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En la tabla anterior se determino su estado solido, lquido o semislido gracias a una
conversin de su agar por la relacin (P/V) peso a volumen. Se sabe que si su
concentracin de agra promedia entre 1 y 1.6 su estado es solido
15 gr ---------------------> 1L
Gr = %? ---------------------> 100ml Gr = %?

Gr = % =
15 gr-1 m|
1 m|
= 1. 5 gr = % (pu)

Segn el estado fsico pueden ser
Solido 15%
Semislido 1.5%
Lquidos 0%

El agente solidificante son los que les dan el nombre
Agar: es el agente sodificante, es el que le da la consistencia

Segn su uso
Comunes: requerimiento mnimo para microorganismos poco exigentes
Enriquecimiento: exceso de nutrientes
Selectivos: utilizan un factor de seleccin, seleccionan que microorganismos crece
o no.
Diferenciales: permite reconocer de acuerdo a las propiedades que los
microorganismos tengan
Segn su composicin :
Definidos
Complejos: tiene sustancias orgnicas que no estn bien definidas.
Segn su origen:
Naturales: Su composicin no contiene qumicos
Semisinteticos: se mesclan componentes artificiales y componentes naturales
Sintticos: Se usan compuestos qumicos



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2 Sesin

En nuestra segunda sesin realizamos la preparacin de 2 medios de cultivo un
caldo TSB y un medio de cultivo solido DCA.

TSB
En la preparacin de nuestros medios de cultivo lquido utilizamos 30 tubos con
5ml de medio para cada uno, esto nos da que la cantidad total que se utilizo fue de
150ml de agua. A su vez se sabe que este medio necesita 30gr de agar para un
litro, al realizar la conversin se encontr que.

Gr = % =
3 gr-15 m|
1 m|
= 4. 5 gr = % (pu)
Esto significa que necesitamos 4.5gr de TSB para los 150ml totales.
A continuacin realizamos la mezcla cuidadosamente en los tubos de ensayo y lo
llevamos en la autoclave por 40 minutos.

DCA
En la preparacin de nuestro medio de cultivo solido utilizamos para 160ml totales
de agua 3.76gr de medio. Este medio lo mezclamos cuidadosamente y procedimos
a calentarlo en el mechero de bunsen para que tuviera una disolucin total. Luego
los servimos en las cajas de petri. Teniendo en cuenta las tcnicas aspticas
correspondientes para mantener su medio y no afectarlo con el nuestro, para esto
lo realizamos cerca del mechero.

CUESTIONARIO
1) Qu es un medio de cultivo?

Medio de cultivo:

Ambiente nutritivo diseado para el crecimiento de microorganismos, donde se
dan condiciones de humedad, p H, y temperatura adems de la presencia o
ausencia de oxigeno, y disponibilidad de nutrientes.



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2) Cul es la importancia de Bacillus stearothermophilus para la comprensin del
concepto de esterilizacin?

Su importancia se debe a que es una bacteria termfila y es utilizada como un
indicador biolgico en el proceso de esterilizacin por vapor debido a su
termoresistencia. La presencia o ausencia de la bacteria, indica el grado de
esterilizacin.
3) Investigar acerca de otros tipos de medio de cultivo utilizados para
microorganismos auttrofos.


Tipos de medio de cultivo

Medios de cultivo qumicamente definidos: En este medio se conoce la
composicin qumica exacta. En el caso de un organismo quimioheterotrofo, el
medio debe contener factores de crecimiento orgnicos que acten como fuente
de carbono y energa.
Medios De transporte: Est preparado para servir de almacenamiento temporal a
especmenes transportados. Manteniendo su viabilidad y su concentracin.
Medios inhibidores: Cuando las sustancias aadidas a un medio selectivo impiden
totalmente el crecimiento de una poblacin microbiana, se denomina inhibidor.
Los medios inhibidores se consiguen habitualmente por adicin de sustancias
antimicrobianas o de cualquier otra que inhiba completamente el desarrollo de
una poblacin determinada.
Medios diferenciales: Distinguen diferencias metablicas de distintas especies o
gneros de bacterias; en este se incorpora una sustancia que solo pueda ser
metabolizada por las bacterias de inters.

Medios de conservacin: Se utilizan para conservar una cepa que, por diversas
razones nos interese mantener. Fundamentalmente se utilizan como controles de
calidad de las pruebas y reactivos utilizados en laboratorio. En el laboratorio se
pueden conservar las cepas de tres formas:
a) haciendo pases peridicos de placa a placa,
b) mediante liofilizacin de una suspensin bacteriana, y
c) congelando las cepas en leche descremada estril al 0,1%.
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DIAGRAMA DE FLUJO




Bibliografa
Gerard J. Tortora, B. R. (2007). Introduccion a la microbiologia (9 ed.). Espaa: medica
panamericana.
Google, i. (s.f.). Google. Recuperado el 23 de 09 de 2011, de www.google.com
Murray, P., Roshental, K., & Pfaller, M. (2009). Microbiologia Medica (6 ed.). Espaa:
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Stanier, R., Ingrajand, J., & Wheelis, M. (2007). The Microbial World (2 ed.). Espaa:
Revert, S.A.