INTRODUO

Thomas H. Morgan, um embriologista que realizou e desenvolveu diversos estudos na rea da gentica, efectuou estudos aprofundados com uma mosca, de pequenas dimenses, de nome cientfico, Drosophila melanogaster, vulgarmente conhecida por mosca da fruta. De entre as muitas vantagens que a Drosophila apresenta para a anlise da gentica, os indivduos apresentam caractersticas facilmente visveis de forma a ser mais fcil determinar os genes envolvidos, os alelos dominantes e recessivos e o respectivo padro de herana, aquando do cruzamento. A Drosophila , na verdade, um excelente material biolgico devido s suas reduzidas dimenses; fcil conservao, alimentao e manuseamento; curto ciclo de vida; descendncia em nmero elevado; fcil distino dos sexos; grande variedade de caracteres de fcil distino e caritipo com apenas 4 cromossomas. Alm do mais, um insecto que pode ser mantido muito facilmente. importante destacar que o ciclo de vida da Drosophila melanogaster apresenta quatro fases: ovo, larvas, pupas e fase adulta. Aquando da realizao desta actividade experimental, foram estabelecidos alguns objectivos, de entre os quais destacarei os mais importantes. Atravs da observao de diversos exemplares de organismos de Drosophila melanogaster, aps a distino de machos e fmeas, de fmeas virgens, da caracterizao de alguns mutantes e da distino das fases do ciclo de vida da Drosophila, foi possvel uma familiarizao com os mtodos de manipulao da mesma. Os conceitos de fentipo de gentipo foram esclarecidos e o mecanismo de transmisso de caracteres hereditrios compreendido.

P ROCEDIMENTO EXPERIMENTAL MATERIAL: - Stock de Drosophila melanogaste do tipo Yellow e Ebony - Funil - Meia de vidro - Gobels - Agulha de dissecao - Pincis - Balo de Erlenmeyer - Lupa binocular - Estufa - Placa trmica - ter - Algodo - Candeeiro 1

- Tinas - Tubos de cultura - Vidros de Petri

MTODOS E TCNICAS necessrio ter determinados cuidados aquando de cruzamentos das Drosophilas, de entre os quais, a utilizao de linhas puras, para que todos os indivduos sejam iguais para uma determinada caracterstica; e de fmeas virgens, para no se correr o risco de terem sido fecundadas pelos machos do seu stock de provenincia; assim como a realizao de cruzamentos parentais recprocos para identificar se algum gene estiver localizado num cromossoma sexual. Primeiro dia: realizar o cruzamento parental. Stimo dia: deve remover-se os progenitores do tubo e elimin-los. Dcimo-quarto dia: deve realizar a observao do fentipo da descendncia F1, contar e distinguir os sexos. Cruzar os indivduos da F1 (F1 x F1) num novo tubo. (Atendendo durao do ciclo de vida dos indivduos que nascerem neste tubo at ao vigsimo-terceiro dia sero certamente F1). Vigsimo-primeiro dia: remover os adultos da F1 do tubo e elimin-los. Vigsimo-oitavo dia: Observar o fentipo da descendncia F2, contar e distinguir os sexos. (Atendendo durao do ciclo de vida dos indivduos que nascerem neste tubo at ao vigsimo-terceiro dia sero certamente F1). Concluir quantos genes esto em jogo, quais os alelos dominantes e recessivos e se algum deles se localiza num cromossoma sexual.

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Isolar as pupas de raa a fim de obter fmeas virgens. Cruzar estas fmeas com machos de outra estirpe. Estas moscas so designadas por progenitores. Rotular os frascos indicando o tipo de cruzamento e a data. Aps 7 a 8 dias, libertar os progenitores. A nossa gerao de moscas, resultante do cruzamento de progenitores designada por F1. - Observar e registar os fentipos e respectivas frequncias por sexo durante 7 a 8 dias aps a ecloso das primeiras moscas. - Cruzar F1 entre si. Rotular os frascos indicando o tipo de cruzamento e data. Aps 7 a 8 dias, libertas as moscas de F1. A nova gerao de moscas designada por F2. Observar e registar os fentipos e respectivas frequncias por sexo durante 7 a 8 dias aps a ecloso das primeiras moscas. Aps cada contagem, colocar em lcool as moscas separadas por fentipos. Formular uma explicao para os resultados do cruzamento efectuado, com base nos conhecimentos de hereditariedade.

CALENDRIO: Dia 0: Isolamento das pupas 1 Dia: Incio do cruzamento parental 8 Dia: Libertao dos progenitores 13 Dia: Incio das contagens de F1. Incio do cruzamento F1F1 15 Dia: Contagens 17 Dia: Contagens 19 Dia: Contagens 20 Dia: Libertao dos pais (F1) 25 Dia: Incio das contagens de F2 27 Dia: Contagens 29 Dia: Contagens 31 Dia: Contagens

Como anestesiar as moscas: 1) Colocar um algodo embebido em ter no balo de erlenmeyer. 2) Colocar o funil com um pouco da meia de vidro na ponta no balo de maneira a que no toque no algodo. 3) Colocar algumas moscas no funil. 4) Quando estiverem imveis, colocar as moscas num vidro de Petri e observar lupa.

RESULTADOS Cruzamento Parental: yellow X ebony

Utilizei dois machos e trs fmeas para o cruzamento parental, que deram origem a cinco machos e trs fmeas, F1. Todos com o corpo de cor esverdeada.

Cruzamento Recproco: yellow X ebony

Utilizei dois machos e trs fmeas para o cruzamento parental, que deram origem a dez machos e uma fmea, F1. Os machos de corpo de amarelo e as fmeas de corpo escuro.

Cruzamentos F1: esverdeadas X esverdeados

No obtive descendncia.

yellow

ebony

No obtive descendncia.

Calendrio: Cruzamentos parentais: 17/01/2012 Eliminao dos adultos do cruzamento parental: 24/01/2012 Contagem dos descendentes: 31/01/2012 Cruzamentos F1: 31/01/2012

INTERPRETAO DOS RESULTADOS :

Legenda:

C: gene dominante no mutado c: gene que codifica o corpo escuro - mutado Y: gene dominante no mutado y: gene que codifica o corpo amarelo - mutado
Corpo amarelo

Corpo escuro

Corpo esverdeado

No primeiro cruzamento entre machos yellow e fmeas ebony, como os indivduos escolhidos eram de linhagens puras, pude facilmente concluir que eram homozigticos para a caracterstica. Aquando da obteno de indivduos da gerao F1, o gentipo do macho e da fmea parentais s poderia ser, respectivamente: CcXYY e ccXY+XY . Como os machos F1 e as fmeas F1 eram homozigticos para as duas caractersticas e apresentam o corpo esverdeado, possvel compreender que obtiveram um fentipo intermdio. As Drosophilas da estirpe yellow apresentam o corpo amarelo, que codificado por um gene mutante recessivo localizado no cromossoma X. As Drosophilas da estirpe ebony apresentam o corpo escuro, codificado por um gene mutante que se localiza no cromossoma 3.

CXY CY cXY cY

cXY CcXYXY CcXYY ccXYXY ccXYY

cXY+ CcXY+XY CcXY+Y ccXY+XY ccXY+Y

No cruzamento recproco, nas mesmas condies, os machos de F1 apresentavam o corpo amarelo e as fmeas de F1 corpo escuro. Conclui que os gentipos dos machos parentais seria ccXY+Y e das fmeas parentais seria CcXYXY. Os resultados observados foram os esperados, visto que surgiram um quarto de machos yellow (CcXYY) e um quarto de fmeas ebony (ccXY+XY).

cXY+ cY

CXY CcXY+XY CcXYY

cXY ccXY+XY ccXYY

O reduzido nmero de descendentes justificam-se pela diminuta capacidade reprodutiva de ambas as espcies mutadas. Tambm o cruzamento de indivduos F1 no foi bem-sucedido por falta de descendentes. H diferentes possveis causas para tal: ou houve um erro na seleco de machos e fmeas; ou o meio de cultura foi contaminado; ou at mesmo a diminuta capacidade reprodutiva das espcies mutadas. Mesmo assim, foi-me possvel apresentar uma previso do gentipo dos indivduos resultantes do cruzamento entre indivduos esverdeados.

cXY cY

cXY ccXYXY ccXYY

Quanto ao cruzamento entre os machos yellow e as fmeas ebony iria obter:

CXY CY cXY cY

cXY CcXYXY CcXYY ccXYXY ccXYY

cXY+ CcXY+XY CcXY+Y ccXY+XY ccXY+Y

CONCLUSO

Embora tenha tido alguns problemas na obteno dos resultados esperados, a aprendizagem foi plena. A actividade laboratorial permitiu o contacto e melhor conhecimento da Drosophila melanogaster e a compreender o porqu da sua importncia e relevncia no que toca aos estudos da Gentica e tcnicas de manipulao laboratorial. S o simples facto de esta actividade laboratorial ter a capacidade de transpor aquilo que est no manual de estudo, de nos dar a oportunidade de analisar e compreender e no apenas adquirir conhecimento terico, torna a actividade muito interessante no ponto de vista da nossa formao pessoal e profissional. igualmente muito interessante compreender que todos os mecanismos associados informao gentica que um determinado organismo possui, possa ser posta em causa com a observao de mutantes, o que esteve muito presente nesta nossa actividade. Foi uma excelente forma de consolidar conhecimentos no que toda transmisso das caractersticas hereditrias descendncia.

BIBLIOGRAFIA http://biocientistas.blogspot.com/2007/12/drosophilas-melanogaster.html http://www.sc.didaxis.pt/hereditariedade/drosophila.htm http://drosophila-m.blogspot.com/ http://www.mokidros.ibmc.up.pt/index.html