CRESCIMENTO E DESENVOLVIMENTO

PROF. CARLOS MOACIR BONATO PROF. VALDOVINO DAMASIO DOS SANTOS

2002

INTRODUO Crescimento um fenmeno geral dos seres vivos, sendo entendido como aumento quantitativo irreversvel no volume (aumento do protoplasma vivo), seja este uma clula, um rgo, um tecido ou um organismo como um todo. Envolve dois processos; diviso celular e alongamento (expanso). Parmetros para a anlise de crescimento: - Ponto de vista fitotcnico: a) Peso fresco: no um bom parmetro pois, pelo que definimos, crescimento

seria, um fenmeno que envolve um aumento em volume irreversvel e, neste caso, este ndice varia muito com o estado hdrico da planta. A folha, por exemplo, sempre tem um peso fresco mais elevado pela manha do que ao meio dia, o que ocorre devido ao nvel de transpirao. b) Pode ser tomado como parmetro em determinados casos, em que haja Peso seco: devido a problemas relacionados com a variao do contedo de controle total das condies ambiente. Ex: plantas cultivadas atravs de cultura de tecidos. gua, muitas vezes prefervel relacionar o crescimento ao aumento de peso seco da planta ou de partes da planta. A folha que tem peso fresco menor ao meio dia, ter provavelmente um maior peso seco, devido ao fato de estar fotossintetizando e de ter absorvido sais minerais do solo durante toda a manh, entretanto, a matria seca pode ser uma estimativa mais vlida ao que ns denominamos de crescimento do que a matria fresca. Em algumas situaes o peso seco no nos fornece uma indicao adequada sob o crescimento. Por exemplo, quando uma semente, suprida apenas com gua, germina e se desenvolve numa plntula em condies de total escurido, o tamanho e o peso fresco aumentam bruscamente, mas o peso da matria seca diminui, devido as perdas respiratrias de C02. Embora o peso da matria seca total destas plntulas desenvolvidos na escurido seja menor que o da semente original, as partes em crescimento dos ramos e razes tm um aumento em peso da matria seca, devido a translocao das regies de armazenamento para as regies em crescimento. Normalmente os estdios iniciais do desenvolvimento das plntulas envolvem a produo de novas clulas atravs da mitose (diviso nuclear e subseqente citocinese (diviso celular, mas plntulas aparentemente normais podem ser produzidos e partir de algumas espcies na ausncia de mitose ou diviso celular. Quando sementes de alface e trigo so irradiadas com raios gama, atravs de fontes de cobalto e nveis altos o bastante para paralisar a sntese de DNA, a mitose e a diviso celular, mesmo assim, a germinao ainda ocorre. O crescimento continua at as plntulas com clulas gigantes serem 2

produzidas. Estas plntulas, chamados plntulas gama, podem sobreviver mais de trs semanas, morrendo logo aps, provavelmente devido a necessidade de clulas novas. Estas plntulas gama ilustram que, mesmo que se pudesse medir convenientemente o aumento no nmero de clulas, este nmero seria um parmetro pouco real ao crescimento observado. Muitos outros exemplos de crescimento sem diviso de clulas so conhecidos, como o crescimento de certas folhas, ramos e frutos, aps certo estdio de desenvolvimento. H poucos exemplos de diviso celular sem aumento no tamanho mximo da clula, como no caso da maturao do saco embrionrio. Portanto, um aumento no tamanho, o critrio fundamental no crescimento, apesar de que, nem sempre seja fcil medi-lo. Apesar do termo crescimento ser referido como alteraes principalmente quantitativas irreversveis, o carter qualitativo tambm pode ser visualizado, atravs do direcionamento do alongamento celular. Os aspectos quantitativos do crescimento constituem a parte da fisiologia vegetal que mais utiliza recursos matemticos na montagem de tabelas e grficos, evidenciando caractersticas bsicas do fenmeno do crescimento. O crescimento de plantas inteiras, rgos vegetais e colnias de microrganismos pode ser visualizado na clssica curva sigmide (semelhante ao smbolo sigma grego). A curva de crescimento de Zea mays assim se apresenta: Do ponto de vista fisiolgico distingue-se quatro fases: 1. Fase latente: o crescimento dependente da quantidade de reservas contidas na semente - forma-se a plntula; 2. Fase de crescimento exponencial ou logartmico: a planta forma razes aptas para absoro de gua e nutrientes minerais e folhas aptas para realizao de fotossntese - a fase juvenil, de crescimento vegetativo rpido (juvenilidade vegetal) 3. Fase de crescimento exponencial decrescente: decresce a razo de crescimento e a atividade metablica orienta-se para a produo de estruturas reprodutivas (flores, frutos, sementes) - a fase de maturidade vegetal; 4. Fase de equilbrio dinmico: o crescimento nulo ou quase nulo (aparece no grfico um patamar) - nesta fase tudo o que produzido consumido, seguindo-se, aps, a senescncia vegetal. No caso de plantas perenes, como as rvores, observa-se no grfico uma sucesso de sigmas, indicativo dos perodos de repouso e crescimento no decorrer das estaes desfavorveis e favorveis ao crescimento. Caracteristicamente, o processo de crescimento comea vagarosamente, depois chega o momento quando o crescimento atinge seus valores mximos. Nesta fase, o 3

crescimento exponencial ou logartmico, sendo representado no grfico por uma reta, quando se usam os logaritmos das medidas. H depois um retardamento do crescimento, evidenciado por um reduzido ngulo da curva com o eixo das abscissas. Isso acontece porque comea a haver predomnio da respirao em relao fotossntese, ou seja, h maior consumo do que produo; comea tambm a absciso de rgos - o organismo vegetal entra em senescncia. As curvas mostradas so ideais e somente so obtidas quando o material vegetal cresce em condies uniformes e as medidas so tomadas a intervalos relativamente longos de tempo. Na natureza, as flutuaes irregulares so superpostas na curva de crescimento por flutuaes de fatores ambientais (luz, temperatura, suprimento mineral e hdrico, etc.). Se as medidas forem tomadas em intervalos curtos de tempo, de hora em hora, p. ex., as alteraes na curva de crescimento vo se tornar evidentes. Em plantas inferiores, como algas unicelulares, o crescimento pode estar ocorrendo em todas as clulas, mas em plantas superiores, os meristemas situados nos pices vegetativos tomam a funo de crescimento. Meristemas e Crescimento ao Nvel de rgos Vegetais Nos meristemas esto ocorrendo 3 eventos, em seqncia ou concomitantemente: - diviso celular; - distenso ou alongamento celular - diferenciao celular. O crescimento se faz ento por aumento do nmero e do tamanho das clulas, em processo de diferenciao, conforme as funes que exercero. O aumento de volume ocorre por sntese citoplasmtica, seguida de duplicao dos cromossomos, desintegrao do nuclolo, migrao polar, reorganizao do novo ncleo e nuclolo, formao da nova parede, a partir da lamela mdia, na qual est presente pectato de clcio e magnsio. Durante a distenso celular a parede primria se mantm elstica, ocorre a vacuolizao com entrada dgua, sntese de protenas, lipdeos, cidos nuclicos, enzimas e outros componentes, alm do aumento do nmero de organelas. A diferenciao celular se d pelo aparecimento de modificaes leves ou profundas na estrutura celular, como um preparo para a clula exercer funes especializadas. Desta forma, algumas clulas alongadas perdem o contedo protoplasmtico, com simultnea lignificao da parede originando elementos condutores (vasos); outras clulas aumentam as clulas parenquimticas do mesofilo e outras ainda, mais achatadas, tem a parede externa recoberta por cutina, originando clulas epidrmicas cuticularizadas. Aps a diviso celular, normalmente uma clula permanece meristemtica e a outra sofre diferenciao, levando a formao de um tecido adulto especializado, o qual, aps desempenhar sua funo, entra em senescncia e morre. Os meristemas so responsveis pela formao de todos os tecidos diferenciados ou adultos das plantas. Denominam-se meristemas primrios os grupos de clulas embrionrias 4

ou descendentes diretos das clulas embrionrias e meristemas secundrios os grupos de clulas originados por dediferenciao de tecidos adultos. Quanto localizao denominam-se: a) meristemas apicais, situados nos pices caulinares e radiculares, responsveis pelo crescimento em extenso (crescimento primrio), resultando em um aumento da altura da planta, ramificao da parte area, extenso do sistema subterrneo; b) meristemas laterais, situados como anis junto aos tecidos vasculares e corticais dos caules e razes, compreendendo o cmbio vascular, responsvel pela formao do xilema, floema e cmbio cortical (felognio), responsvel pela formao do feloderma para dentro e sber para fora (ambos constituindo a periderme); os meristemas laterais proporcionam o crescimento secundrio em dimetro de rgos cilndricos (caules e razes) em dicotiledneas, assim, a atividade de ambos os cmbios proporcionam o crescimento diamtrico de modo concomitante e as tenses internas so amortecidas e compensadas; c) meristemas intercalares, situados nos interns e bainhas de monocotiledneas, que permitem o alongamento de caules (colmos) e o crescimento da bainha em torno dos caules de gramneas. As razes crescem longitudinalmente por ao de um meristema subapical, assim denominado porque est revestida pela coifa, uma estrutura de proteo contra o atrito com as partculas do solo. As clulas perifricas da coifa, uma estrutura de proteo contra o atrito com as partculas do solo. As clulas perifricas da coifa so continuamente descamadas e ao mesmo tempo substitudas por outras adicionadas pelo meristema radicular. Diferenciam-se em regies de diviso celular, alongamento e de maturao (Ver figura abaixo)

Diagrama ilustrando os estdios iniciais do desenvolvimento primrio do pice da raiz. A regio de divises celulares estende-se por uma distncia considervel, atrs do meristema apical. Estas divises celulares se sobrepem com o crescimento celular e tambm com a maturao, ou diferenciao celular. A distncias variveis do meristema apical, as clulas esto crescendo e diferenciando-se em clulas especficas de acordo com a posio na raiz. Os trs meristemas primrios - protoderme, meristema fundamental e procmbio - so delineados prximo ao meristema apical. Os elementos de tubos crivados do protofloema amadurecem antes (mais prximo do meristema apical) dos elementos de protoxilema. A endoderme completa sua diferenciao (com estrias de Caspary) antes do protoxilema e do desenvolvimento dos plos radiculares.

A formao de razes laterais proporcionada pela atividade do periciclo (anel de clulas interno endoderme). Por incentivo hormonal, as clulas do periciclo sofrem divises periclinais e anticlinais num grupo de clulas, que aumentam em nmero e tamanho; aparece ento, uma protuberncia na superfcie da raiz. As clulas da endoderme tambm podem se dividir originando um primrdio de raiz lateral, que cresce e atravessa gradualmente o crtex, at atingir a superfcie, irrompendo de dentro para fora da raiz principal. A passagem dessa raiz em formao atravs do crtex, pode ser auxiliada por uma ao enzimtica desintegradora sobre as clulas corticais que esto na faixa de passagem. Ao fim do processo da emergncia da raiz lateral, acabar surgindo uma ligao vascular entre a raiz principal e a lateral. O crescimento em dimetro das razes se faz por ao do cmbio vascular e do cmbio cortical; o cmbio vascular se origina de clulas procambiais que permanecem indiferenciadas entre o floema primrio e o xilema primrio; o cmbio cortical (felognio) 6

situa-se abaixo da epiderme e origina a periderme da raiz, formada de feloderme para dentro e sber para fora. O tecido suberoso caracteriza-se por intenso depsito de suberina nas paredes celulares, impermeabilizando-as e causando a morte das clulas do tecido, o qual vai exercer funes de revestimento e proteo. Os caules crescem longitudinalmente por ao de um meristema apical (gema apical), geralmente protegido por folhas modificadas (escamas e catfilos) contra ao do intemperismo e do ataque de fitfagos ou herbvoros, principalmente insetos.No pice caulinar localizam-se os primrdios foliares que originaro as folhas e os primrdios de gemas nas axilas das folhas; os primrdios de gemas, so futuras gemas laterais, que se desenvolvero em ramos laterais, de padro semelhante gema apical (ver figura)

Organizao tnica-corpo. (a), (b) Detalhe do pice do sistema caulinar de Coleus blumei. Coleus tem uma tnica com duas camadas, representadas pelas camadas L1 e L2 do meristema apical. A camada inicial do corpo representada pela camada L3. O corpo corresponde zona de clulas-mes centrais. (c) divises anticlinais e periclinais. As divises celulares das camadas da tnica so quase exclusivamente anticlinais. Aquelas da camada inicial do corpo so tanto anticlinais quanto periclinais. Dividindo-se periclinalmente, estas clulas da camada inicial adicionam clulas ao corpo.

O meristema apical dominante sobre os meristemas abaixo situados, as gemas axilares ou laterais, as quais tem a funo de formar folhas e ramos; as inflorescncias podem se desenvolver diretamente do caule (caulifloria) ou nas extremidades dos ramos. As posies do caule onde ocorrem as folhas so denominados ns e as posies desfolhadas interns. O pice caulinar da maioria das plantas florferas apresenta o tipo de organizao denominado tnica-corpo (ver figura). As duas regies tnica corpo, so comumente distinguveis pelos planos de diviso das clulas que nelas ocorrem. A tnica consiste em uma ou mais camadas de clulas localizadas perifericamente superfcie do meristema (divises anticlinais) e contribuem para o crescimento em superfcie. O corpo consiste em uma massa de clulas localizadas abaixo da camada da tnica; as clulas dividem-se em vrios planos (periclinais e anticlinais), aumentando o volume da estrutura.

Seo longitudinal do pice do sistema caulinar de Coleus blumei, uma eudicotiledneas. As folhas em Coleus so opostas umas s outras luz nossa, cada par sucessivo estar em ngulo reto como o par anterior (filotaxia decussada); assim, as folhas de um n marcado esto em ngulos retos com o plano da seo.

O sistema tnica-corpo, tem uma rea de clulas com vacolos conspcuos denominada de zona de clulas mes centrais, circundado pelo meristema perifrico, e tendo abaixo o meristema da medula. A protoderme se origina da camada mais externa da tnica, enquanto o procmbio e parte do meristema fundamental (o crtex e algumas partes da medula) so derivadas do meristema perifrico. O resto do meristema fundamental formado em parte pelo meristema da medula. O crescimento caulinar em dimetro se d de forma idntica ao das razes, por atividade dos meristemas laterais cambiais. H caules que aparentemente no crescem, como o caso de muitas hortalias e tais plantas so ditas acaules (Ex. Daucus carota, Plantago sp). Meristemas intercalares permitem alongamento de interns e crescimento de bainha foliar (monocotiledneas). Assim, como na raiz, o meristema apical do caule origina os meristemas primrios 8

protoderme, meristema fundamental e procmbio, que originaro, por sua vez, a epiderme, a crtex e os tecidos vasculares primrios, respectivamente. O meristema apical dominante sobre os meristemas abaixo situados, as gemas axilares ou laterais, as quais tem a funo de formar folhas e ramos; as inflorescncias podem se desenvolver diretamente do caule (caulefloria) ou nas extremidades dos ramos. As posies do caule onde ocorrem as folhas so denominados ns e as posies desfolhadas internos. Meristemas intercalares (na base do entrens) permitem alongamento de internos e cresci mento da bainha foliar (monocotiledneas). As folhas originam-se de divises periclinais de um grupo de clulas nas partes laterais do meristema apical; forma-se uma protuberncia chamada primrdio foliar, que j obedece filotaxia da espcie; em posio axilar aos primrdios foliares, formam-se os primrdios de gemas axilares. O tamanho e a forma de uma folha sero determinados por vrios fatores, tais como o tamanho do primrdio, a velocidade de diviso e alongamento celular, a durao do perodo de crescimento, etc. O primrdio assume uma forma afilada e quase circular em seo transversal, mas desenvolve um lado achatado perto do pice. Esta regio afilada ser a futura nervura central ou pecolo da folha e contm as clulas meristemticas das quais surgir o limbo foliar, por expanso lateral; o formato das margens ser determinado pelos meristemas marginais e os tecidos internos da folha pelos meristemas submarginais. Controle do crescimento e desenvolvimento vegetal O controle do crescimento e desenvolvimento vegetal se faz em trs nveis: 1 - nvel intracelular ou gentico, que parte do princpio que cada espcie possui em suas clulas um programa impresso no sistema de fitas DNA/RNA. Estudos nesse sentido so feitos em meio de cultura de tecidos, considerando que cada clula ou grupo de clulas deve possuir a potencialidade para regenerar um novo indivduo. Fragmentos de meristemas so colocados em meio de cultura apropriados e depois so tratados com hormnios vegetais ou substncias reguladoras do crescimento visando a obteno de indivduos viveis. 2 - nvel intercelular ou das correlaes, que parte do princpio de que h uma interdependncia entre clulas, tecidos e rgos vegetais e que estes exercem mtua influncia no crescimento. No campo, essa correlao pode ser demonstrada com a poda de gemas apicais, o que faz cessar a dominncia desta sobre as gemas axilares, as quais passam a se desenvolver. Em laboratrio, foi demonstrado que pontas de razes de tomateiro s crescem em placas onde se coloque alm de gua, nutrientes minerais e acar, tambm as vitaminas B1 (tiamina) e B6 (piridoxina), normalmente produzido pelas folhas e transportadas via floema at as razes. 3 nvel extracelular ou ambiental, que leva em conta o fato da planta estar sendo submetida continuamente ao dos fatores ambientais e que estes influenciam 9

decisivamente na execuo do programa de crescimento da espcie. Assim, fatores fsicos, qumicos e biolgicos, agindo atravs da gravidade, natureza e propriedades do solo, luz, temperatura, abundncia ou escassez de gua e nutrientes minerais, grau de atividade das comunidades microbianas, competio intra e interespecfica, herbivoria, agentes patolgicos e manejos das culturas, tero efeito determinante no crescimento e desenvolvimento vegetal. Desenvolvimento um fenmeno paralelo ao crescimento, sendo entendido como aumento qualitativo; biologicamente falando refere-se a um incremento de caracteres, pode ser visualizado, descrito, fotografado mas no medido; consiste na aquisio de capacidade funcional. Pode ser definido tambm como uma sucesso de alteraes irreversveis ou fases do ciclo de vida de uma clula, um rgo ou um organismo, ou seja, um conjunto das diferentes fases que leva formao do corpo total da planta. SUBSTNCIAS DE CRESCIMENTO Diferenas entre hormnio animal e hormnio vegetal (fitormnios): 1. Complexidade: hormnios vegetais so bem mais simples que os hormnios animais (ex: etileno x insulina). 2. Peso molecular: os hormnios animais apresentam elevado peso molecular e os vegetais baixo peso molecular. 3. Especificidade: os hormnios animais so altamente especficos (um hormnio para cada ao), enquanto que, nos vegetais os hormnios podem ter vrias aes (ex: auxinas) 4. Penetrabilidade: o hormnio animal de difcil penetrao, ao contrrio acontece com o hormnio vegetal. 5. Stio de produo e ao: os hormnios vegetais so produzidos em um local podendo ter ao neste mesmo local, ou serem transportados e agirem em outro local. Os hormnios animais nunca agem no local em que foram produzidos. Substncia de crescimento: para um composto ser considerado uma substncia de crescimento deve ser sintetizado pela planta, agir em baixas concentraes, promover resposta amplificada, no deve ter valor energtico, calrico ou nutricional, podendo ou no agir no local de sntese. Regulador de crescimento: termo geral que se aplica a substncias sintticas ou naturais Principais grupos substncias de crescimento so: auxinas, giberelinas, citocininas, etileno, cido abscsico, brassinosterides, cido saliclico, poliaminas, cido saliclico e jasmonatos.

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AUXINAS 1. Conceituao e sntese histrica As auxinas so substncias quimicamente relacionadas com o cido indolil-3-actico (AIA), que promovem o crescimento das plantas, principalmente atravs do alongamento celular. As primeiras experincias com substncias de crescimento foram realizadas por Darwin (1880), com coleptilos de alpiste (Phalaris canariensis); verificou-se que, quando iluminados unilateralmente, inclinam-se em direo luz. Verificou-se posteriormente que substncias transportadas do pice para as regies inferiores do coleptilo causavam o movimento de curvatura. Foi Went (1928) que, utilizando cubos de gar colocados sobre coleptilos decapitadas de aveia, conseguiu demonstrar efeitos de crescimento de forma quantitativa. Um esquema completo dos experimentos iniciais com auxinas so mostrados no esquema abaixo. A pesquisa sobre a natureza qumica das auxinas teve a contribuio de Nielsen (Copenhagen, 1930), trabalhando com extrato do meio de cultura do fungo Rhizopus suinus e de Kogl & Haagen Smit (Universidade de Utrecht, 1934), que conseguiram isolar e identificar a substncia ativa no Avena-teste. Estudos de Thimann (EUA, 1935), comprovaram a identidade do AIA. Verificou-se ainda que a substncia era conhecida desde 1904, quando de sua sntese na Alemanha, desconhecendo-se, entretanto, na poca, sua atividade biolgica.

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Sumrio dos experimentos iniciais com auxinas. Dos experimentos de fototropismo em coleptilo, Darwin concluiu que o estmulo ao crescimento produzido no pice do coleptilo transmitido para a zona de crescimento. Em 1913, P. Boysen-Jensen descobriu que o estmulo do crescimento passa atravs de materiais como a gelatina mas no de barreiras impermeveis a gua como a mica. Em 1919, A. Pal obteve evidncias que a promoo do estmulo do crescimento foi devido substncia de natureza qumica. Em 1926, F.W. Went mostrou que a substncia que promove o crescimento pode se difundir em blocos de gelatina. Ele tambm fez experimentos para quantificar a auxina.

2. Estrutura qumica e biossntese O cido indolil-3-actico, caracteriza-se pela presena de um anel de indol e seu precursor identificado o aminocido triptofano.

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Estrutura de algumas auxinas naturais. Embora o cido-indolil-actico (AIA) ocorrer em todas as plantas, outros compostos relacionados s plantas tm atividade auxnica. Em ervilha, por exemplo, contm o cido 4cloroindolil-3-actico. Outros compostos que no so indolils, tais como o cido fenilactico, tambm possu atividade auxnica. Ainda no claro, a funo destas auxinas naturais no desenvolvimento das plantas.

H vrias evidncias indicando que o triptofano o precursor do AIA: 1) aplicao de triptofano em pices de coleptilo sofre rpida transformao em AIA; 2) plantas deficientes em Zn apresentam pequeno crescimento, pois Zn importante para sntese de triptofano; 3) aplicao de serina tritiada e indol com carbono radioativo em ervilha, resultam em triptofano e AIA marcados, pois serina e indol so precursores do triptofano. Outros compostos indlicos mostraram-se ativos no Avena-teste, tais como o cido indolil-3 acetonitrila, cido indolil-3-acetaldedo e cido indolil-3-pirvico.

Biossntese de auxinas dependente de L-triptofano.

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3. Ocorrncia, metabolismo e transporte de auxinas As auxinas so de ocorrncia ampla no reino vegetal, sendo encontradas principalmente em rgos que esto em crescimento ativo, tais como as regies meristemticas dos pices radiculares e caulinares, folhas jovens, coleptilos e sementes em desenvolvimento. So sintetizadas em regies de crescimento ativo, como o meristema apical do caule, gemas axilares ou laterais, folhas jovens e meristemas das razes. A sntese de auxinas influenciada por fatores do meio tais como a luz e a temperatura. Verifica-se assim que a sntese em rgos clorofilados maior em presena de luz do que no escuro. Em plantas perenes de regies temperadas os nveis de auxina variam com as estaes do ano, ocorrendo maiores concentraes durante a primavera e menores concentraes durante o outono e inverno. A sntese tambm influenciada por fatores internos da planta, como por exemplo, a idade fisiolgica: maior em tecidos ou rgos que esto em crescimento ativo e muito baixa em tecidos j diferenciados. Os nveis de AIA nos tecidos vegetais so controlados por variaes nas velocidades de sntese, inativao e degradao. Assim, atravs de processos ou reaes enzimticas a molcula de AIA pode se ligar a outras molculas, produzindo compostos inativos, como o AIA-aspartato e o AIA-glutamato. As auxinas so catabolizadas pela ao da AIA-oxidase, sendo um dos produtos finais, o metileno-oxindol. Ocorre tambm fotoxidao da molcula de AIA, na qual substncias como a riboflavina, absorvem a energia utilizada para ativar a oxidao do AIA. Movimento da Auxina na Planta O movimento da auxina na planta est resumido na figura abaixo. O transporte das auxinas em rgo areos polar, e se faz do pice para a base (baspeta), o que j foi verificado por Went (1926), porm em rgos senescentes, pode ser fracamente acrpeto (da base para pice). O transporte pelo floema, primariamente atravs das clulas do parnquima em contato com os feixes vasculares, independe da ao da gravidade e do gradiente de concentrao. Nas razes o transporte tambm polar, porm na direo da base para o pice, isto , acrpeto.

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Modelo quimiosmtico do transporte polar de auxina. Aqui mostrada uma clula em uma coluna de clulas transportando auxina. A parede celular mantida em um pH cido pela atividade da H +-ATPase da membrana plasmtica. A auxina (AIA ou IAA) entra na clula passivamente na forma no dissociada (IAAH) ou na forma dissociada (aninica) em cotransporte com prtons pelo transporte ativo secundrio com auxlio de uma permease. No citossol, no qual o pH neutro, a forma aninica predomina. Os nions saem da clula via carreador de nions de auxina e so concentradas no final da sada de cada clula na rota longitudinal. A velocidade de transporte das auxinas em rgos areos e razes de cerca de 5 a 15 mm/h, o que muito superior a uma simples difuso. H, ento, uma acelerao fisiolgica, contra o gradiente de concentrao, o que sugere que o processo no puramente fsico, mas requer energia metablica. A ausncia de oxignio, presena de inibidores da respirao, temperaturas baixas, reprimem ou inibem o fluxo de auxinas. Tambm substncias competidoras das auxinas (anti-auxinas) bloqueiam o sistema de transporte de hormnios. Ex. TIBA, NPA, morfactina (ver figura abaixo)

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Estrutura de inibidores do transporte de auxinas. O mais ativo o PBA. Curcumina (composto fenlico) e ginestena (flavonides) so compostos naturais de plantas.

4. Auxinas sintticas Logo aps a descoberta do AIA, os fisiologistas passaram a pesquisar outros compostos de natureza qumica similar que possussem atividade fisiolgica semelhante. Assim foram produzidas outras substncias indlicas, tais como o cido indolil-3-propinico (AIP) e o cido indolil-3-butrico (AIB), sendo que este ltimo tem a capacidade de promover a formao de primrdios radiculares, til no enraizamento de estacas para propagao vegetativa; verificou-se que o AIB ocorre naturalmente em folhas de milho e de vrias dicotiledneas. Posteriormente foram descobertas novas substncias que, embora possussem estrutura qumica diferente do AIA, apresentavam propriedades semelhantes, como os derivados do cido fenoxiactico: cido 2,4-diclorofenoxiactico (2,4-D), cido 2,4,5triclorofenoxiactico (2,4,5-T) e cido 2-metil-4-clorofenoxiactico (MCPA). Essas substncias so utilizadas na agricultura como herbicidas seletivos, isto , em concentraes relativamente altas eliminam as dicotiledneas, protegendo cultura de cereais, como o trigo. Entre outras auxinas sintticas citam-se o cido naftaleno-actico (ANA), o cido ###naftoxi -actico (NOA), o cido 2,4,6-triclorobenzico (TCBA). 16

Estrutura de algumas auxinas sintticas. A maioria destas auxinas sintticas so utilizadas como herbicidas na horticultura e na agricultura. As mais amplamente utilizadas so provavelmente o dicamba e o 2,4D, os quais no esto sujeitos a quebra pela planta e so muito estveis.

Regulao das auxinas O nvel de auxina mantido por mecanismos endgenos na planta, e os limites variam com a parte da planta. Os mecanismos para manter na planta nveis aceitveis de AIA so: sntese dependente ou no de triptofano, conjugao, transporte, oxidao ou degradao e compartimentalizao como mostrado no esquema abaixo.

Fatores que interferem no nvel de auxina livre nas clulas das plantas. As rotas de biossntese de auxina dependentes e no dependentes do triptofano podem conduzir a um incremento na concentrao de AIA livre.

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A degradao (tanto carboxilativa como no carboxilativa) conduz somente o decrscimo na concentrao de auxina, enquanto que a conjugao reversvel e podem conduzir a um aumento ou um decrscimo na concentrao de AIA. Tanto o transporte como a compartimentalizao pode aumentar ou diminuir a concentrao citosslica de AIA, dependendo da direo do movimento do fitormnio.

As auxinas podem estar na forma livre (ativa) ou com substncia de baixo peso molecular (PM) como steres de glicose, galactose, mioinositol, aminocidos e protenas. Na forma conjugada perde sua funo auxnica. Pode haver em algumas plantas acmulo de 50 a 90% de AIA na forma conjugada. Em milho 90% da forma conjugada volta a ter atividade (reversvel por hidrlise). A conjugao muito importante pois determina a homeostase celular, reserva, e transporte sem ataque de enzimas. EFEITOS FISIOLGICOS DA AUXINA O efeito da AIA nas plantas vai depender de alguns fatores como: Estdio de desenvolvimento do tecido ou rgo Concentrao de auxina Tipo de AIA (natural ou sinttica) Interao com outros fitormnios Tipo de tecido e uso de tecidos (intactos ou cortados)

Crescimento e/ou alongamento celular: aumenta o tamanho das clulas pela extenso da parede celular; as clulas sofrem alongamento por alterao da plasticidade e pela incorporao de material parede celular. O alongamento celular resultante das alteraes das propriedades mecnicas da parede celular, principalmente no arranjo das microfibrilas de celulose. A hiptese que melhor explica a ao das auxinas no crescimento celular a teoria do crescimento cido. Nas duas figuras seguintes pode-se verificar as hipteses de como o crescimento ocorre.

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Pores de epictilo, hipoctilo e coleptilo so congelados e desconsolados e colocados sob estresse constante. (A) quando a soluo que banha a poro congelada-descongelada alterada do pH 7,0 para 4,5, o alongamento ocorre quase que imediatamente. (B) Se a poro inativada por aquecimento, nenhum alongamento ocorre independentemente do pH. Todavia, quando as expansinas so adicionadas, o alongamento restaurado no pH acidificado. Nenhuma hidrolases de plantas nem endotransglicolase do xiloglucano capaz de causar o efeito "in vitro".

Crescimento do caule: o crescimento se faz por diviso celular das clulas do meristema apical, aumento de volume celular por vacuolizao e alongamento das clulas . Vrios hormnios agem sobre a distenso celular, destacando-se as auxinas, que so encontradas em altos nveis nas regies do caule que esto crescendo ativamente. Em caules de bambu, durante a vacuolizao e distenso, as clulas aumentam mais de 10 vezes seu tamanho original.

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Modelo atual para a extruso de prtons induzido por auxina (AIA). De acordo com a hiptese 1, a auxina inicia a rota de transduo de sinal que resulta na produo de um mensageiro secundrio que ativa diretamente a prton ATPase pr-existente na membrana plasmtica (passo 1). A hiptese2 sugere que um segundo mensageiro induzido por auxina (AIA) ativa a expresso dos genes (passo 2) que codifica a prton ATPase da membrana plasmtica (passo 3). A protena sintetizada pelo retculo endoplasmtico rugoso (passo 4) e encaminhadas via rota secretria para a membrana plasmtica (passos 5 e 6). O aumento de extruso de prtons resulta de um aumento no nmero de prtons sendo bombeados pela membrana. Independentemente de como o bombeamento aumentar, o relaxamento da parede induzido por cido sugerido se mediado por expansinas.

Crescimento de folhas: A aplicao de auxinas promove o crescimento das nervuras e inibe a expanso do mesfilo. Folhas bem jovens funcionam como centros ativos de sntese de auxinas, tendo elevados teores de hormnio, que vai decrescendo com a idade da folha. Crescimento da raiz: o AIA estimula o crescimento radical em baixssimas concentraes da ordem de 10-8 g/l, inibindo a partir de 10-7. Todavia, como se observa na figura abaixo a sensibilidade do tecido varia com a parte da planta considerada.

O AIA presente nas razes tem como origem a parte area da planta, movimentandose na direo base-pice e tem como funo principal a promoo do alongamento uniforme 20

da raiz. Produo de razes adventcias: Verifica-se que estacas formam razes mais facilmente quando tem folhas ou gemas em desenvolvimento do que quando desprovido delas. Isto sugeriu que um hormnio formador de razes se translocaria das gemas para a parte basal das estacas, promovendo o enraizamento. Entende-se que a ao hormonal se faz estimulando a formao de novos centros meristemticos por dediferenciao celular ou ativando os meristemas existentes. Ex. AIB. Reativao da atividade cambial em plantas lenhosas: Em rvores de regies temperadas, o cmbio permanece inativo durante o inverno; quando na primavera comea a atividade de diviso celular na base das gemas, uma onda de atividade cambial se desenvolve gradualmente a partir do pice em direo as partes inferiores dos ramos e caules. As auxinas produzidas pelas gemas em desenvolvimento estimulam a atividade cambial na primavera. Em troncos cortados pode se reconhecer os anis de crescimento primaveril e estival, conseqncia das fases de atividade e repouso do cmbio vascular. A remoo das gemas paralisa a diviso celular no cmbio e aplicao de auxina exgena na parte superior de ramos sem gemas, resulta na ativao baspeta do cmbio.

Auxina induz regenerao do xilema em torno do ferimento em tecidos do caule de melo (Cucumis sativus). O colmo foi ferido, e as folhas e gemas acima do local de ferimento foram removidas para evitar a produo de auxina endgena. Imediatamente aps o ferimento, uma pasta de lanolina contendo auxina foi aplicada no intern acima do ferimento. Novos elementos de vasos foram formados acima do ferimento (exceto). A auxina se direcionou para o local do ferimento atravs das clulas vasculares. A diferenciao polar de novos tecidos vasculares ao redor no stio de ferimento aparentemente devido a abundncia de elementos de vasos no stio apical do ferimento.

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Dominncia apical: seria o efeito inibitrio da gema apical sobre as gemas laterais. O crescimento de ramos laterais est sob controle do pice vegetativo. O domnio das gemas apicais sobre as gemas laterais ou axilares se faz pela contnua produo de AIA. A poda ou eliminao da gema apical "desperta" as gemas axilares em dormncia e da brotam ramos, folhas e flores. Experimentalmente verifica-se que a poda da gema apical seguida de aplicao de AIA em pasta de lanolina, mantm as gemas axilares dormentes. Por outro lado, quando a gema apical eliminada por agentes naturais como fogo, geada ou ataque de animais, as gemas laterais, quando subsistem, desenvolvem-se em seguida. Uma possvel explicao da dominncia apical aceita que as auxinas produzidas nos pices proporcionam eficiente transporte de nutrientes para essa regio, em detrimento das gemas laterais, que ficam carentes de substrato para crescimento. A aplicao de inibidores do transporte de auxinas nas proximidades da gema apical exerce feito semelhante ao corte da gema. A aplicao de citocininas nas gemas laterais (gemas) resulta no desenvolvimento desses meristemas e sua liberao do controle apical; as citocininas tem ao antagnica em relao s auxinas e contribuem para formao de feixes vasculares.

(a) Esquema mostrando o movimento da auxina do meristema em direo a base da planta. (b) Efeito da remoo do pice na formao (local de sntese de AIA) de gemas laterais.

Desenvolvimento floral: As auxinas e giberelinas contribuem para o crescimento da flor; o ovrio uma fonte de auxinas e a sua remoo provoca, em geral, absciso floral. Desenvolvimento do ovrio em fruto: Aps a polinizao, ocorre um rpido crescimento do ovrio, devido em parte s altas concentraes de auxinas presentes no plen. Formadas as sementes, elas prprias produzem auxinas que estimulam o crescimento e desenvolvimento da parede do ovrio para transform-lo em fruto. Na maioria das plantas a polinizao e a fecundao resultam no desenvolvimento do ovrio em fruto, do vulo em semente, e de tecidos associados (receptculo da ma, p. ex.), em anexos do fruto. A maior parte do desenvolvimento do fruto resulta do alongamento celular, que geralmente controlado por auxinas.

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A auxina, produzida por embries em desenvolvimento, promove a maturao da parede do ovrio e o desenvolvimento de frutos carnosos.(a) Morango normal (Fragaria ananassa), (b) morango no qual todas as sementes foram removidas, e (c) se morango no qual uma linha horizontal de sementes foi removida. Se uma pasta contendo auxina for aplicada ao (b), o morango poder crescer normalmente. Cada semente de morango na verdade um fruto no carnoso do tipo aqunio. A auxina produzida pelos embries contidos em cada aqunio promove o desenvolvimento do receptculo da inflorescncia do morangueiro formando o pseudofruto carnoso que denominamos morango. Partenocarpia: nos frutos partenogenticos (sem sementes), o desenvolvimento ocorre sem fecundao e s vezes at sem polinizao. Na partenognese vegetativa o desenvolvimento do ovrio ocorre sem polinizao nem fecundao, provavelmente devido ao alto nvel de auxinas e de outros reguladores endgenos, presentes no ovrio que permitem seu crescimento sem estmulo externo. Exemplos tpicos de partenognese so as frutas desprovidas de sementes de laranja baiana, abacaxi e banana. Na partenognese estimulativa, o desenvolvimento do ovrio no necessita de fecundao mas somente de polinizao. O estmulo da polinizao poderia ser substitudo pela aplicao de auxina ou de uma enzima que promoveria a converso de triptofano em AIA, como ocorre no estigma floral de certas variedades de tabaco. Frutos partenocrpicos podem ser obtidos em pimento, tomate, quiabo, berinjela e uva; frutos com sementes abortadas podem ser obtidas em cereja, pssego e uva. Absciso de folhas, flores e frutos: A queda de folhas de plantas decduas pode ocorrer em resposta a sinais do meio ambiente, tais como dias curtos ou baixas temperaturas no outono, ou devido a condies adversas ao desenvolvimento vegetal. A folha jovem tem capacidade de sintetizar nveis de auxina relativamente altos; durante a senescncia, a sntese de auxinas no limbo foliar diminui consideravelmente; antes da folha cair, forma-se no pecolo a camada de absciso. Esta camada forma-se transversalmente ao pecolo, por ao do etileno, o qual, em vista da baixa concentrao de auxinas, provoca a sntese e o transporte de enzimas que atuam na parede celular (celulases) e na lamela mdia (pectinases). A dissoluo parcial ou total da parede celular e da lamela mdia forma a regio de absciso por afrouxamento de ligao entre as clulas e enfraquecimento do feixe vascular. A ao de um vento leve ou o pousar de um inseto pode causar absciso. A 23

absciso de frutos muito semelhante absciso foliar, somente que nos frutos e em algumas folhas, ocorre antes da absciso um aumento no nvel de cido abscsico, que no caso, poderia promover a sntese de etileno e possivelmente a sntese das enzimas que atuam na parede celular e lamela mdia. Fototropismo: o movimento do rgo da planta em resposta ao fluxo direcional ou gradiente de luz. A explicao de como ocorre o processo est descrito abaixo da figura a seguir.

Experimentos de Briggs e colaboradores, demonstrando deslocamento lateral de AIA em pices de coleptilos de milho iluminados unilateralmente. A auxina capaz difundir-se foi coletada em blocos de gar. As unidades indicam as quantidades relativas de AIA presentes em cada bloco. (a), (b) A mesma quantidade de AIA coletada de coleptilos intactos, mantidos no claro ou escuro. (c), (d) Se os coleptilos forem divididos ao meio por um delgado pedao de vidro, mas permanecendo intactos, a mesma quantidade de AIA coletada como em (a) e (b). (e) Se as duas metades e o bloco de gar abaixo forem completamente separados, as mesmas quantidades de auxina so coletadas nos lados escuro e iluminado.(f) Quando o coleptilo no dividido completamente at o pice, mais auxina difunde-se da metade obscurecida do que da metade iluminada. Esses resultados apiam a idia de que a iluminao unilateral induz um movimento de AIA da metade iluminada para a metade obscurecida do coleptilo.

Gravitropismo: o movimento do rgo da planta em resposta a gravidade. O gravitropismo pode ser positivo ou negativo. Abaixo so colocadas algumas figuras com explicaes de como o movimento gravitrpico.

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Respostas gravitrpicas do sistema caulinar de uma planta jovem de tomate. A planta em (a) foi deitada e mantida imvel; a planta em (b) foi colocada de cabea para baixo e mantida nessa posio por meio de um anel e suporte. Embora originalmente retilneo, o caule dobra-se e cresce para cima em ambos os casos. Se a planta for mantida na horizontal e lentamente girada ao redor de seu eixo horizontal, nenhuma curvatura (resposta gravitrpica) ocorre, isto , a planta continuar a crescer horizontalmente. Voc pode explicar as diferenas entre o crescimento de uma planta girada horizontalmente e o das plantas mostradas aqui?

Modelo proposto para a redistribuio de auxinas durante o gravitropismo em razes de milho. (A) A auxina sintetizada na parte area e transportada para a raiz no estelo. Quando a raiz est disposta verticalmente, os estatlitos da coifa dirigem-se para o final basal da clulas. A auxina (AIA) (transportada acropetamente na raiz via estelo) distribuda igualmente em todos os lados da coifa. A auxina (AIA) ento transportada

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basipetamente dentro do crtex para a zona de alongamento, aonde regulado o alongamento celular. (B) Nas razes dispostas horizontalmente os estatlitos dirigem-se para o lado da clulas da coifa, disparando o transporte polar de auxina para o lado inferior da coifa. A maior parte da auxina na coifa ento transportada basipetamente no crtex para a parte inferior da raiz. A alta concentrao de auxina na poro inferior da raiz inibe o crescimento neste lado, enquanto a concentrao de auxinas do lado superior estimula o crescimento naquele lado. Como resultado as razes dirigem-se para baixo.

Amiloplastos. (a) Fotomicrografias de uma seo longitudinal mediana da coifa da raiz primria do feijo comum (Phaseolus vulgaris). As setas apontam para os amiloplastos (plastdios que contm amido) sedimentar atos prximo as paredes transversais da coluna central de clulas (columela) da coifa. (b) Eletromicrografia das clulas da como bela de maconha, semelhante quela mostrada em (a). Os amiloplastos (setas) so visveis da base de cada clula, prximo s paredes transversais. Os gros de amido so claramente visveis dentro dos amiloplastos.

A resposta da gravidade dos amiloplastos nas clulas da columela de uma coifa. (a) Os amiloplastos so normalmente sedimentados prximos s paredes transversais numa coifa de uma raiz crescendo verticalmente para baixo. Quando a raiz colocada de lado, (b) e (c), os amiloplastos deslizam para baixo em direo s paredes normalmente verticais, que esto agora paralelas superfcie do solo. Esse movimento dos amiloplastos pode desempenhar um importante papel da percepo da gravidade pelas razes.

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Enraizamento de estacas: devida sua ao no sistema radicular a auxina dependendo da relao com auxina produz razes. Devido a este fato a auxina, principalmente o cido indolil butrico, muito utilizado comercialmente para induzir ao enraizamento de estacas, como mostrado abaixo.

Formao de razes pela exposio das estacas em auxina.

Efeito herbicida e na sntese de etileno: A auxina utilizada em alta concentrao estimula a produo de etileno. A produo de etileno por sua vez causa amarelecimento, absciso foliar e epinastia. As auxinas sintticas mais usadas o 2,4D(2, 4 diclorofenoxiactico) e o ANA (cido naftaleno actico). MECANISMOS DE AO As auxinas agem em clulas receptoras denominadas de clulas alvo. Quando as auxinas se acoplam das clulas alvo, h uma amplificao do sinal e subseqentemente um efeito fisiolgico. As respostas podem ser rpidas ou lentas. Se a auxina atinge a clula alvo, em aproximadamente 10-15 min h resposta fisiolgica. A longo prazo as auxinas induzem a sntese de RNAm e outros.

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