Instituto Federal Goiano campus Uruta Curso de Agronomia Disciplina de Microbiologia

Virologia
Prof.: Milton L. Paz Lima

Esquema de Apresentao
Dogma Central e Constituio molecular dos cidos nuclicos Hospedeiros de ocorrncia viral Morfologia da Partcula Etapas da Replicao viral mRNA policistrnicos e monocistrnicos Representao do genoma viral Regies terminais do mRNA Replicao e suas etapas Ciclos de Replicao Diferena entre RNA sensu (+) e (-)

DOGMA CENTRAL DA BIOLOGIA

De acordo com o que tem sido chamado de dogma central da Gentica Molecular, a funo do DNA armazenar informao e pass-la ao RNA, enquanto a funo deste ler, decodificar e usar a informao recebida do DNA para produzir proteinas.

Replicao

DNA

Transcrio

RNA

Traduo

PROTEINA

Rota do Cdigo

CIDOS NUCLICOS

BASES DO DNA E RNA

Bases Purinas (anel duplo) Bases Pirimidinas (anel simples)

A G C T ou U

T ou U C G A

Descrio dos cidos Nuclicos dos Vrus

cido Nucleico

Descrio
cido nuclico de fita dupla, replica usando a transcrio reversa, ou seja, formao de um DNA a partir de um molde de RNA. cido ribonuclico de fita dupla. cido desoxiribonuclico de fita dupla. cido nuclico de fita simples, senso positivo, idntico ao mRNA e pode assim ser traduzido imediatamente pela clula do hospedeiro. cido nuclico de fita simples, senso negativo, complementar ao mRNA e precisa ser convertido em RNA+ pela RNA polimerase, antes de ser traduzido. cido nuclico de fita simples, replica usando a transcriptase reversa. cido nuclico de fita simples.

dsDNA-RT

dsRNA dsDNA ssRNA+

ssRNA-

ssRNA-RT ssDNA

REPLICAO DE VRUS DE RNA

Constituio dos vrus

Maioria dos vrus que infectam plantas

Presena de espcies de vrus em diferentes categorias do Hospedeiro

cido Nucleico Categorias do Hospedeiro F P SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM I B V SIM SIM SIM SIM SIM SIM SIM

dsDNA-RT dsRNA dsDNA ssRNAssRNA+ ssRNA-RT ssDNA

B = Bactrias F = Fungos V = Vertebrados

P = Plantas

I = Invertebrados

Famlia e gneros de vrus de plantas (+) ssRNA

Agrios, 1997

(-) ssRNA

dsRNA

Agrios, 1997

dsDNA

ssDNA

Agrios, 1997

Vrus e RNA fita dupla

Fitoreovirus Phytoreo Fiji

Virus RNA fita simples senso negativo

Com Membrana:
Fitohabdovirus; Tospovirus

Sem Membrana:
Tenuivirus e maize stripe

Virus RNA fita simples senso positivo

Genoma monopartido:
Isomtrico: Luteovirus, Tymovirus Bastonetes: Tobamovirus, Potexvirus, Potyvirus, Carlavirus, Closterovirus.

Genoma bipartido:
Isomtrico: Comovirus, Nepovirus Bastonetes: Tobravirus

Genoma multipatido:
Isomtricos: Ilarvirus, Cucumovirus, Bromovirus Bastonetes: Alfava mosaico virus, Hordeivirus.

Etapas da Replicao viral

Virus 1 Penetrao 2 Desmontagem 3 Traduo precoce 4 Replicao 5 Traduo 6 Montagem acmulo 7 Transporte 8 Transporte por vetor Clula infectada Planta infectada

Policistrnico (procariotos) vs. monocistrnico (eucariotos)

mRNA de Procariotos
Mltiplos stios iniciadores de traduo UTR 5 Protein 1 Protein 2 Protein 3 UTR 3

RNA

mRNA de eucariotos
Unico stio iniciador de traduo UTR 5 m7G Protein 1 UTR AAAA(n) 3

Grande problemas de vrus de RNA de eucariotos: Ribossomos de clulas eucariticas traduzem apenas mRNAs monocistrnicos, enquanto o genoma RNA viral contm ao menos 2 genes.

Representao do Genoma Viral

Cpia Complementar 3' do vrus de RNA (-) senso RNA Transcrio (produo de RNA) Cadeia de cido Nuclico (+) sense RNA 5'
Cap or VPg

5'

ORF 1

ORF 2

ORF3 poly A

3'

Open Reading Frame (ORF)

Traduo (produo de proteina)

Proteinas

Representao do Genoma Viral

Gene da polimerase; Gene da protena da capa protica ; Gene da protena de transmisso;Gene da protena de transporte

Tipos de Regies Terminais das Molculas

5
(+)

TMV, TYMV, BMV, CMV AMV, TSV TEV, CpMV, TRSV SBMV, PLRV TNV TSWV RDV Cap VPg

(+)

(+)

WWW

(+)

(+)

(-)

tRNA-like Poly-A

(+) (-)

WWW

Funes das protenas virais

1 Penetrao 2 Separao 3 Prim. Traduo Informaes genticas dos virus (RNA / DNA)
Vetor Clula em contato com o ambiente Sistema de traduo da proteina

4 Replicao 5 Traduo 6 Maturao

Replicase (polymerase/helicase)

Sistema de traduo da proteina

Proteina(s) da capa

7 Transporte 8 Vetor de transporte

Proteina(s) de movimento

Fator de transmisso

REPLICAO DE VRUS DE RNA

REPLICAO DO RNA VIRAL

5VPg

RNA GENMICO SENSO POSITIVO

RNA (- SENSO)

5VPg

5VPg

RNA GENMICO SENSO POSITIVO

RNA GENMICO SENSO POSITIVO

traduo

AAAAA

REPLICAO DE VRUS DE RNA

RNA fita-simples sentido (-):

1. Transcrio primria da cadeia de RNA (-) pela RDRP e produo de RNAm e RNA (+) 2. Traduo do RNAm, acumulao de produtos. 3. Transcrio secundria das molculas de RNA (-), traduo, acumulao de protenas estruturais. 4. Montagem do nucleocapsdeo e maturao, empurrando-o para a membrana da clula hospedeira o que origina uma "vescula de exocitose" em que ocorre a formao do envelope lipdico com as protenas virais especficas na sua superfcie.

REPLICAO DE VRUS DE RNA TRANSCRIO, TRADUO, REPLICAO

3

genoma senso negativo

transcrio mRNAs (positivos)

AAA AAA AAA AAA AAA

replicao

Cpias completas 5 (+) 3

(-)

= cap

REPLICAO DE VRUS DE RNA Necessitam sintetizar o mRNA

GENOMAS DE RNA DUPLA FITA

RNA polimerase deve estar empacotada no virion.

mRNA de senso positivo
AAA

RNA genmico dupla fita

Parede celular rgida

Infeco inicial: penetrao do vrus na clula

Vrus so depositados na clula atravs de uma ruptura da parede celular causada por fora mecnica: Causada por furo (afdeo, mosca-branca, trips, nematide) ou mastigao (besouro) Dano mecnico durante manejo de plantas

penetrao

ENDOCITOSE SEM MEDIAO DE RECEPTOR

incomum que vrus vegetais tenham protenas que fazem um papel na adeso especfica a receptores celulares. Os vrus mais complexos (Rhabdovirus, Tospovirus, Phytoreovirus) provavelmente tem protenas que interagem com clulas em seus vetores. Esses vrus replicam no vetor!

Replicao de um vrus ssRNA senso (+)

Tranduo de grandes quantidades de protenas virais

Quando o genoma viral j um mRNA

Desmontagem e traduo precoce 5 (+) 3 5 3 (+) 3

5 (+)

RI
3 (-) 3 5 3 Polimerase viral helicase (-)

RI
Replicative Intermediate

(-)

RF

(+) (-)

O ciclo de infeco de um vrus ssRNA senso (+): TMV

Transduo precoce replicase 126K 183K Traduo Desnudamento/ desmontagem RF Forma Replicativa (-) Fator da hospedeira

Parede celular
Traduo precoce

(+) Fita molde RNA

(+) Replicao

Penetrao

penetrao

(-)

(+)

mRNAs prognie RNA (+)

Transporte p/ clulas vizinhas e outras partes Movimento das pelo plasmodesma plantas
modificado Complexo Protena de movimento/RNA

126K 30K 17.5K 183K

Traduo

Montagem e acmulo
Prognie vrus

movement Protena de protein movimento

Incio da multiplicao: Desmontagem e traduo precoce

early translation

Parede celular
co-translational disassembly

Vrus ssRNA senso (+) 1. Vrus deve ser desencapsidado para liberar o RNA 2. RNA deve ser traduzido primeiro: Por que?
Para sintetizar a polimerase viral, a qual essencial para a replicao do genoma viral

Binnendringen in de cel

penetration

Qual o fator complicador?

O RNA desencapsidado (desprotegido) rapidamente degradado pela enzima RNAse nas clulas

TMV