Produo de Biomassa

Introduo
Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Produo de Biomassa Cn(H2O)n Substrato + O2 + NH3 Amnia + P, S, K, Na, Mg, Ca, Fe Sais Minerais So convertidos por multiplicao celular em: (CHNO)n Biomassa + CO2 Dixido de carbono + H2O gua + H Calor de reao

Oxignio

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Composio qumica de microrganismos

Composto
Protenas Glicdios Lipdios Ac. Nuclicos Cinzas

% em peso seco
Bactrias 50-60 6-15 5-10 15-25 4-10 Leveduras 35-45 30-45 5-10 5-15 4-10 Fungos 25-40 40-55 5-10 2-10 4-10

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Vantagens: Tempo de gerao curto Bactrias: 30 min a 2 h Leveduras: 1 a 3 h Algas: 2 a 6 h Fungos filamentosos: 4 a 12 h Elevado teor de vitaminas Alto contedo protico Variedade de fonte de carbono utilizada Facilidade em realizar alteraes genticas Instalaes Independe de fatores climticos
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Quantificao celular

Protena para alimentao humana ou animal; Indstria de alimentos (ex. fermento); Remdios;

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Etapas do processo

Hoechst/Uhde SCP processo em metanol

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Etapas do processo: Cultivo do microrganismo Esterilizao Aerao Equipamento Forma de Conduo Recuperao da Biomassa Centrifugao (Leveduras e Bactrias) Filtros rotatrios (Fungos Filamentosos) Secagem Quebra da parede celular (para SCP)

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Caractersticas bsicas: No ser patognico Valor nutritivo (para SCP) No formar compostos txicos Baixo custo de produo Velocidade de crescimento Contedo protico Suplementao de nutrientes Meio de cultura Separao e secagem

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Bactrias: Alta velocidade de crescimento Extensa variedade de fontes de carbono Contedo protico alto Perfil de aminocidos bom; ricas em cistina e metionina
Gneros: Bacillus, Hydrogenomas, Methanomonas, Methylomonas, Pseudomonas

Recuperao da biomassa Contedo de cidos nuclicos elevado Possibilidade de produo de endotoxinas (Gram -)

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Bactrias: Substratos: hidrocarbonetos, Metanol Processos Chia Yee Solvent Works (Taiwan, 1963) Pseudomonas; Substrato: Hidrocarbonetos parafnicos; T = 36-38C; pH = 7,0; Em contnuo: clulas com 73,6% de protena; Separao em centrifuga, secagem em tambor; remoo de leo com solvente; moagem em moinho Esso Research and Engineering Co. (1968) Pseudomonas; Substrato: Hidrocarbonetos purificados (retirada dos aromticos); T = 25-40C; Separao por centrifugao, decantadores ou filtros; secagem em spraydrying;

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Fungos Filamentosos: Alta contedo protico Perfil de aminocidos bom; baixo aas sulfidrilados Os cogumelos constituem um dos mais antigos alimentos humanos Gneros Fusarium e Rhizopus em cultivos submersos foram usados como alimento humano durante a 2 guerra mundial Mycoprotein: aprovado pelo governo ingls para consumo humano Alto contedo de cidos nuclicos Alguns produzem compostos txicos Crescimento mais lento que leveduras e bactrias Matria-prima amilcea (mais cara)

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Algas: Algas tm sido usadas como alimento humano desde tempos imemoriais Baixo custo de produo Alto contedo protico Alta digestibilidade Teor balanceado de aminocidos Alto teor de vitaminas (tiamina, riboflavina, cobalamina) e carotenides
Gneros: Chlorella, Scenedesmus e Spirulina

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Algas: Meio de cultivo (quimioautotrfico ou fotoautotrfico) gua do mar Lagos salinos guas oriundas de sistemas de tratamento de efluentes Meio de cultivo sinttico (NaHCO3; K2HPO4; NaNO3; NaCl; MgSO4.7H2O; FeSO4.7H2O; K2SO4; CaCl2.2H2O; soluo de micronutrientes) No precisa esterilizar e sem controle de temperatura

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Algas: Processo de produo Batelada simples em lagos abertos Quantidade de iluminao profundidade 20 a 30 cm

Typical Commercial Microalgae Production Facility, Kona, Hawaii.

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Algas: Recuperao Centrifugao/Coagulao (baixa densidade celular) Filtrao rotativa Secagem (Baixa presso, spray drying, ao sol, secagem em camadas de areia)

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Algas:

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Leveduras Alta velocidade de crescimento pH 3.5 a 5.0: evita contaminao Facilidade de recuperao por centrifugao Perfil de aminocidos bom Alto contedo vitamnico e complexo B Rendimentos elevados

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Leveduras Melao a principal matria-prima para a produo de leveduras tais como S. cerevisiae e C. utilis um subproduto da produo do acar de cana e beterraba O melao apresenta K, Mg, P, Zn, Fe, Cu, alm de vitaminas (biotina, c. pantotenico, inositol, tiamina) e aminocidos (asparagina, c. asprtico, alanina, cido glutmico e glicina)

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Leveduras de panificao So empregadas linhagens selecionadas de S. cerevisiae em funo: Caractersticas fisiolgicas estveis Fermentao vigorosa do acar na massa Crescimento rpido Manuteno de boa qualidade sem autlise Alto rendimento no fermentador

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Leveduras de panificao Processo em mltiplos estgio Aerbio Batelada alimentada

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Leveduras de panificao Preparo do mosto: Melao diludo ([acar]i = 0,5 a 1,5 %p/v) Acidulado (pH 4,5 a 5,0) Aquecido Clarificado por filtrao ou sedimentao Esterilizado (vapor sob presso) Fortificado (sais de amnio, uria sais de fsforo ou c. fosfrico, vitaminas) e retirada de SO3 (aerao em temperatura alta)

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Leveduras de panificao

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Leveduras de panificao Levedura prensada Adio de emulsificantes (leos vegetais) para dar consistncia desejada e adio de lcoois (etlico, proplico, isoproplico) ou amido de cereal para proteo contra contaminaes 68-72% de umidade; 27-30% slidos; 50-56% protena, 89% N, 1-1,4% P Refrigerao (0-4C) Levedura seca ativa 8% de umidade Clulas so secas em condies controladas de T e umidade de modo que as enzimas no sejam deterioradas

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Levedura alimentar S. cerevisiae e C. utilis so propagadas em diferentes substratos e comercializadas como fonte de protenas e vitaminas do complexo B para suplementao humana ou raes animais As leveduras resultantes dos processos exclusivamente destinados a sua propagao so denominados leveduras 1as, enquanto que as obtidas como subprodutos de outra indstria so denominadas leveduras 2as (recuperadas de cervejarias e destilarias) Componentes da levedura forrageira Protena > 45% Ca 0,1 -0,5% Gordura 2% P 1,5% Tiamina 6 a 100 mg/kg Fibras 2% Riboflavina 10 a 50 mg/kg Cinzas 7-8%

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Levedura Alimentar Obteno de levedura secundria

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Levedura Alimentar Obteno de leveduras secas em uma destilaria

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Levedura Alimentar

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Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Levedura Alimentar

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Quantificao celular

Mtodos Diretos
Determinao do nmero de clulas Contagem ao microscpio; Contagem de colnias formadas; Nmero mais provvel Contagem eletrnica (Contador Coulter, Citometria de fluxo) Determinao da biomassa microbiana Peso Seco; Turbidimetria; Volume de Centrifugado; Viscosidade

Mtodos Indiretos
Constituintes celulares Concentrao total de N ou C; ATP; DNA, RNA; Contedo protico; Dosagem de elementos do meio de cultura Substrato; Consumo de O2; Produo de CO2;

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Quantificao celular

Mtodos Diretos Determinao do nmero de clulas

Contagem ao microscpio;

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Quantificao celular

Mtodos Diretos Determinao do nmero de clulas

Contagem ao microscpio;

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Quantificao celular

Mtodos Diretos
Determinao do nmero de clulas Contagens de colnias formadas;

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Quantificao celular

Mtodos Diretos

Determinao do nmero de clulas

Contagens de colnias formadas;

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Quantificao celular

Mtodos Diretos Determinao do nmero de clulas

Nmero mais provvel (NMP);

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Quantificao celular

Mtodos Diretos Determinao do nmero de clulas

Contagem eletrnica.

Contador Automtico de Clulas - Coulter

Citmetro de Fluxo

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Quantificao celular

Mtodos Diretos Determinao do nmero de clulas

Contagem eletrnica Citometria de Fluxo.

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Mtodos Diretos Determinao do nmero de clulas

Contagem eletrnica Processamento Digital de imagens (PDI).

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Mtodos Diretos
Matria seca;

Determinao da biomassa microbiana Turbidimetria ou espectrofotometria.

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Quantificao celular

Mtodos Diretos Determinao da biomassa microbiana

Volume de Centrifugado; Viscosidade

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Quantificao celular

Mtodos Indiretos Constituintes celulares

Concentrao total de N ou C; ATP; DNA; Contedo protico;
C H O N S P Mg K, Ca Na, Fe Outros

Composio elementar
Composto

% em peso seco Bactrias 46-52 10 20 10-14 0,2-1 2-3 0,1-0,5 0,1-0,5 0,01-0,1 traos Leveduras 46-52 10 20 6-8,5 0,01-0,03 0,8-2,6 0,1-0,5 0,1-0,5 0,01-0,1 traos Fungos 45-55 10 20 4-7 0,1-0,5 0,4-4,5 0,1-0,3 0,1-0,5 0,01-0,1 traos

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Quantificao celular

Mtodos Indiretos
Constituintes celulares Concentrao total de N ou C; ATP; DNA, RNA; Contedo protico;

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Quantificao celular

Mtodos Indiretos Dosagem de elementos do meio de cultura

Substrato; - Cn(H2O)n - YsoO2 - YsnNH3 Yss S1 + YsxX + YscCO2 + Ysp P1 + YswH2O = 0
1 1

X = CHaObNcSdPe; S. cerevisiae: CH1.6O0,40N0,22P0,02

Consumo de O2; Produo de CO2; - Cn(H2O)n - YsoO2 - YsnNH3 Yss S1 + YsxX + YscCO2 + Ysp P1 + YswH2O = 0
1 1

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Introduo -

Quantificao celular

Mtodos Indiretos Dosagem de elementos do meio de cultura

Consumo de O2; Produo de CO2;

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Quantificao celular

Fase lag
Rearranjo do sistema enzimtico (sntese de enzimas);

Fase intermediria
Aumento gradativo da concentrao celular

X = cte = Xo

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Quantificao celular

Fase log ou exponencial

Clulas plenamente adaptadas; Velocidades de crescimento elevadas; Consumo de substrato;

Fase de reduo de velocidade

Diminuio da concentrao de substrato limitante; Acmulo de produto(s) no meio

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Quantificao celular

Fase estacionria
Trmino do substrato limitante; Acmulo de produtos txicos; Concentrao celular constante em seu valor mximo.

Fase de declnio
Reduo do crescimento celular; Consumo de material intracelular (lise).

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Quantificao celular