1 PROCESOS QUMICOS DE SEPARACIN

Objetivos Mostrar las caractersticas y los fundamentos de la separacin qumica Mostrar como eliminar las matrices y las interferencias Mostrar como hacer preconcentraciones y cambios de fase Bibliografa R. Anderson, Sample Pretreatment and Separation, Analytical Chemistry by Open Learning, John Wiley & Sons, New York, 1987 J.M. Miller, Separation Methods in Chemical Analysis, Wiley, 1975 Z. B. Alfassi, C.M. Wai, Preconcentration Techniques for Trace Elements, CRC Press, Boca Raton, Fl. USA, 1992. B.L. Karger, L.R. Snyder, C. Horvath, An Introduction to Separation Science, Wiley, 1973

1.1.

Introduccin

Como consecuencia del tratamiento de la muestra, los analitos y el resto de los compuestos pueden llegar a formar una mezcla compleja. A partir de la medicin de las seales especcas de los analitos presentes en la mezcla se podr llevar a cabo su determinacin. Si se dispone de mtodos para separar o diferenciar los analitos con medidas qumicas o instrumentales no habr ningn problema para conseguir su determinacin. Pero si como consecuencia de la presencia de otros analitos o componentes mayoritarios de la muestra, la seal del analito resulta indistinguible, entonces ser preciso emplear mtodos para aislar el analito o eliminar los componentes que intereren. Los mtodos de separacin, en general, conllevan una transferencia fsica entre fases y debido a ello se pueden llevar a cabo las siguientes aplicaciones analticas:

1.1. INTRODUCCIN

Separacin de los componentes que intereren. Como se ha dicho antes, si las medidas analticas utilizadas no son capaces de distinguir la concentracin del analito se pueden utilizar las tres posibilidades que se dan a continuacin: 1. Elegir un mtodo o condicin que ofrezca una medida analtica ms selectiva. 2. Cambiar las condiciones del mtodo para que la inuencia de la interferencia pueda corregirse. 3. Aislar el analito del resto de los componentes de la muestra. Llevar a cabo la preconcentracin en el anlisis de trazas. A menudo, la concentracin de las trazas es ms baja que la sensibilidad de las medidas analticas y para poder hacer una determinacin es imprescindible concentrar los analitos. La transferencia de las fases necesaria en algunos anlisis. A veces, debido al estado fsico de la muestra que los sistemas instrumentales pueden admitir, las muestras y los analitos han de ser transferidos de una fase a otra. Puricar los analitos. Simplicar la matriz. A menudo, entre de los pretratamientos de separacin este es el que ms se utiliza dado que hay que eliminar algunos elementos de la muestra para poder hacer la determinacin que se pretende. Por ejemplo, para hacer el anlisis de compuestos orgnicos especiales en muestras de origen biolgico, hay que hacer la limpieza de la muestra 1 con objeto de eliminar los componentes que ms intereren de la matriz. Sea una situacin u otra, el uso de la separacin qumica esta muy extendido y frecuentemente es imprescindible para aplicar algunos mtodos analticos y para determinar muchos analitos. Por dar un ejemplo, se puede examinar la determinacin de diurticos en la orina. Los diurticos (drogas de diferentes familias qumicas) deben ser ingeridos por va oral y despus de pasar a la sangre pueden sufrir cambios metablicos antes de ser expulsados por el rin. El anlisis de esos diurticos (para ver si se han tomado drogas o para esclarecer cuestiones legales) se lleva a cabo en la orina dado que ah es donde ms se concentran. De todas formas, las muestras de orina debe tener un pretratamiento para eliminar los componentes que intereren ms, esto es, las albminas presentes (protenas solubles en el agua), azcares, urea, electrolitos y dems han de ser eliminados de la orina de forma previa a la determinacin y se han de separar los analitos (los diurticos y sus derivados metablicos). Si se quiere hacer esta determinacin en sangre,
1A

menudo se le llama clean-up

1.2. GENERALIDADES DE LA SEPARACIONES ANALTICAS

ha de obtenerse antes el suero para hacer la misma separacin y determinacin de los analitos. En cualquier caso, las separaciones que se llevan a cabo tienen las consecuencias mencionadas con anterioridad: se simplicar la matriz, se har el aislamiento de los diferentes analitos y los analitos se obtendrn en un medio ms concentrado. El uso de la separacin de los analitos est muy extendido, pudindose considerar un conjunto de operaciones ms que una operacin individual y en este Captulo no se har ms que presentar una panormica del tema. En los siguientes captulos se presentarn los detalles de las operaciones de separacin analticas ms utilizadas. De todas maneras, hay que tener en cuenta que a menudo habr de volverse a la situacin inicial. Esto es, que en la cadena de pasos del anlisis se puede hacer una separacin preliminar tras el tratamiento de la muestra, despus utilizar otras formas de separacin para adecuar los analitos y por ltimo realizar otra separacin en conjunto con la determinacin instrumental de los analitos. Dado que los objetivos de cada paso y los medios para lograrlos son variados, hay que entenderlos en el lugar que les corresponde y dentro del conjunto de condiciones que se presentan en el proceso general del anlisis.

1.2.
1.2.1.

Generalidades de la separaciones analticas

Modelo general de la separacin

El modelo de separacin que se presenta a continuacin es lo mas general posible para as no tener que seguir todos los mtodos de separacin. El modelo se puede resumir de esta manera: en un sistema de dos fases en el que se quieren separar los componentes (si fuese necesario por medio de transformaciones qumicas) stos estn distribuidos entre las dos fases. Por lo tanto, hay que separar las fases para llevar a cabo la separacin. Dicho en otras palabras, las separaciones analticas se pueden describir en los siguientes tres pasos (Figura 1.1 en la pgina siguiente): transformacin qumica de los componentes que se quieren separar (no es necesaria en todos los casos). distribucin de los componentes entre las fases. separacin fsica de las fases (o mecnica). Las transformaciones qumicas se resumen en la aplicacin de reacciones qumicas conocidas, por ejemplo, la formacin de complejos metlicos con los ligandos orgnicos, aunque esto no

1.2. GENERALIDADES DE LA SEPARACIONES ANALTICAS

(a) Transformacion quimica

1.2. GENERALIDADES DE LA SEPARACIONES ANALTICAS

sea siempre necesario. La distribucin entre las fases es un equilibrio qumico y las fases pueden ser lquidos, gases y slidos. Por ltimo, la separacin fsica de cada fase conlleva el aislamiento de cada una de ellas. Por ejemplo, la determinacin de Ni(II) se puede hacer precipitndolo con dimetilglioxima (DMG) o extrayndolo con PAR. Para ello, se mezcla la fase acuosa de la disolucin de Ni(II) con el reactivo orgnico correspondiente (DMG disuelto en agua o PAR en hexano) y despus se distribuir el Ni(II). En el primer caso se obtendr un precipitado de Ni-DMG en una nueva fase slida y en el segundo el complejo Ni-PAR es mucho ms soluble en el hexano que en agua. Por ltimo, la separacin de las fases puede hacer mediante una ltracin del precipitado o una decantacin de las dos fases lquidas.

1.2.2.

Formas de separacin

Segn se lleven a cabo los tres pasos mencionados anteriormente, las separaciones podrn tomar distintas formas. 1. Separaciones sencillas. Estas son las ms simples, esto es, despus de juntar lo ms cerca que se pueda las dos fases necesarias y de permitir un cierto tiempo para la distribucin de los componentes se lleva a cabo la separacin de las dos fases. Por ejemplo, si se quieren hacer separaciones por extraccin lquida o por intercambio inico es suciente mezclar los dos disolventes inmiscibles o mezclar la disolucin acuosa con el cambiador inico en un recipiente adecuado (por ejemplo en un tubo de precipitacin o en un embudo de extraccin). A menudo, a esta forma de trabajo se la conoce como batch. 2. Serie de separaciones sencillas. Cuando la forma arriba descrita no es suciente, debido a que, por ejemplo, los rendimientos no son sucientes, se puede emplear el mismo mtodo ms de una vez hasta que se logre el rendimiento adecuado. Debido a ello, este mtodo no consiste ms que en repetir una serie de veces el mtodo anterior (transformacin qumica distribucin de fases separacin transformacin qumica distribucin de fases separacin...). 3. Separaciones continuas. En este mtodo, en general, se encuadran las separaciones cromatogrcas y las destilaciones. En las primeras se trata de la separacin de analitos variados de una mezcla compleja donde una de las dos fases es un uido mvil y la otra una fase estacionaria. La distribucin qumica se lleva a cabo de forma ininterrumpida debido a procesos qumico-fsicos diferentes, en unas reas fsicas muy concretas y de un modo dinmico. La destilacin se utiliza para la separacin de componentes voltiles y como

1.3. FUNDAMENTOS CUANTITATIVOS

antes, debido a una serie ininterrumpida de procesos de evaporacin y condensacin, se lleva a cabo la separacin. 4. Tcnicas de captura. Al igual que con la cromatografa, una fase es un uido en movimiento y la otra es estacionaria. La primera lleva los analitos y despus de pasar por la segunda, los analitos se quedan atrapados all. Si se usa este mtodo, adems de separar los analitos se consigue su preconcentracin.

1.3.

Fundamentos cuantitativos

Con cualquiera de los mtodos arriba citados, la caracterstica ms signicativa que se le pedir al mtodo de separacin es que sta sea lo mas efectiva posible (que proporcione el rendimiento mximo posible). Dado que las separaciones son equilibrios de distribucin entre dos fases, pueden aplicarse expresiones termodinmicas y cinticas. En este sentido, se utilizan las siguientes ecuaciones:

Constante de distribucin o reparto (Kd ). La relacin de las concentraciones de los componentes entre las dos fases limitar la extensin y condiciones del equilibrio. [A] f ase 1 [A] f ase 2

Kd =

(1.1)

Considerando las bases termodinmicas pertinentes deberan de utilizarse actividades pero la estimacin de stas, sobre todo en las fases orgnicas, es muy complicada y es por ello que est mucho ms extendida la utilizacin de concentraciones. La utilizacin de esta constante es muy extendida en la extraccin lquida, el intercambio inico y tambin en algunos casos en cromatografa. En las separaciones basadas en precipitaciones se utiliza el producto de solubilidad. Coeciente de distribucin (D). En muchos sistemas qumicos dado que adems de la distribucin concurrirn otros equilibrios qumicos, los componentes que se distribuyen podrn aparecer en otras especies en las dos fases. Para tener todo esto en cuenta, en vez de una constante de distribucin se utiliza el coeciente de distribucin, esto es, una relacin entre todas las especies que forma el componente en cada fase. De todas las maneras, considerando los fundamentos termodinmicos aludidos anteriormente, esto no es ms que una relacin entre los balances de masa de cada fase.

1.3. FUNDAMENTOS CUANTITATIVOS

D=

([A] + [AL1 ] + [AL2 ] + ... + [ALn ]) f ase 1 ([A] + [AX1 ] + [AX2 ] + ... + [AXk ]) f ase 2

(1.2)

Segn la denicin, por lo tanto, D depender de las condiciones qumicas de cada fase. Dependiendo del mtodo de separacin, el valor de la constante de distribucin puede ser diferente. Por ejemplo, en una extraccin lquida para obtener una separacin adecuada Kd tiene que ser superior a 1000 para garantizar la cuantitatividad. En cromatografa los valores de Kd estn dentro del intervalo 0.1 - 1. Factor de separacin (SA/B ). Cuando se han de separar dos componentes A y B, un parmetro muy signicativo es el factor de separacin. Este parmetro es la relacin entre la constante de distribucin o el coeciente de distribucin de cada componente. Kd(A) Kd(B) DA DB

SA/B =

SA/B =

(1.3)

En los mtodos de separacin sencillos es preciso obtener un factor de separacin de alrededor de 10.000 para lograr una separacin efectiva. Para ello hay que utilizar mtodos selectivos, bien sea mediante un valor de Kd adecuado o usando condiciones adecuadas en D. En cromatografa, sin embargo, rara vez se encuentran valores superiores a 2. Caractersticas cinticas. Si los parametros arriba mencionados se obtienen mediante consideraciones termodinmicas, es absolutamente necesario tener en cuenta las caractersticas cinticas, sobre todo, en las dos siguientes situaciones: 1. Algunos iones metlicos tienen una conguracin electrnica estable y sus procesos de formacin son muy lentos. Entre otros se encuentran Cr+3 , Co+3 y Pt+2 2. En sistemas continuos, sobre todo en las cromatografas, dado que el proceso de distribucin es dinmico, nunca se completa el equilibrio qumico. Esto tiene una efectividad especial en la distribucin de los componentes (la anchura de los componentes en la columna cromatogrca) y, por lo tanto, en la adecuacin de la separacin.

En cualquier caso, la transferencia de masa ente las fases se puede apreciar en la Figura 1.2 en la pgina siguiente. Hay que tener en cuenta la velocidad de difusin del componente en cada fase y la distancia entre las fases para poder lograr unos resultados cinticos cuantitativos.

1.4. TCNICAS ANALTICAS DE SEPARACIN

A
FASE 1

f1

f2

FASE 2

Figura 1.2: Propiedades cinticas signicativas de la transferencia de masa entre fases.

1.4.
1.4.1.

Tcnicas analticas de separacin

Tipos de muestras

Las matrices de las muestras pueden ser orgnicas (incluidas las biolgicas) o inorgnicas. Adems, se puede hacer una clasicacin de las matrices segn su estado fsico: matrices slidas, semi-slidas (geles, coloides, suspensiones, etc.), lquidas o gaseosas. Segn las caractersticas de la matriz se podrn escoger diferentes mtodos de separacin. Por ejemplo, cuando se tenga una muestra de gas se utilizar el anlisis mediante cromatografa de gases (GC). No obstante, cuando se tengan algunos compuestos trmicamente lbiles o que tengan tendencia a ser absorbidos en supercies metlicas es mucho ms adecuado usar la tcnica de HPLC2 que la tcnica de GC. Para ello hay que utilizar mtodos especiales de captura o atrapamiento. Por ejemplo, la muestra de gas se hace: i) pasar a travs de un soporte slido y los componentes all atrapados ese disuelven en un disolvente adecuado; ii) burbujear a travs de una disolucin. Cualquiera de las dos alternativas citadas pueden realizarse a temperatura ambiente o mediante trampas criognicas, bien mediante CO2 (l) (-20 C) o mediante N2 (l) (-150 C). Los trabajos de preparacin de los lquidos y los slidos son mas fciles que los de los gases. A menudo, antes de usar cualquier clase de cromatografa, especialmente si se trata de muestras lquidas, no hay ms que hacer una dilucin. Si la muestra es slida los procedimientos pueden ser ms complejos. Algunas veces, la muestra se puede disolver fcilmente y se puede proceder con la separacin despus de diluirla. Otras veces, sin embargo, hay que extraer o lixiviar los analitos de la matriz slida antes de hacer la separacin. Entre estos procedimientos se encuentran la extraccin con Soxhlet, la extraccin mediante microondas, la extraccin mediante uidos supercrticos y
2 Las

siglas corresponden (en ingls) a High Performance Liquid Chromatography y aunque este trmino se utilice por doquier como sinnimo de cromatografa lquida no es del todo adecuado. Por lo tanto, se procurar utilizar el trmino cromatografa liquida dado que tiene un signicado ms amplio que HPLC.

1.4. TCNICAS ANALTICAS DE SEPARACIN

la extraccin mediante disolventes a altas presiones. Una vez que los analitos se han extrado o lixiviado cuantitativamente, la fase lquida obtenida puede ser objeto de nuevos procesos de tratamiento o puede realizarse la determinacin directa de los analitos.

Tabla 4.1. Procedimientos de tratamiento segn el tipo de muestra.

Tipos de muestra
Gases orgnicos voltiles

Mtodo
Captura en fase slida

Fundamentos de la tcnica
La muestra de gas se la hace pasar por un tubo que tiene un absorbente empaquetado (silica-gel silica o carbn activado). Los analitos atrapados se liberarn por medio de un disolvente fuerte.

Notas
El ujo de los gases suele ser la clave para la efectividad de la captura. Hay que tener en cuenta la formacin de aerosoles, la acumulacin excesiva, etc. Las bases de esta tcnica son la purga y la trampa. Una cuestin especial a tener en cuenta es el hecho de que con el ujo no se formen espumas o aerosoles. Para mejorar la captura se pueden aadir complejantes y se puede disminuir la temperatura con el mismo propsito.

Captura en lquidos

La muestra de gas se hace pasar por una disolucin donde se quedarn atrapados los componentes solubles. El resto de los componentes del gas saldrn fuera borboteando.

Lquidos

Extraccin en slida Fase

El lquido se hace pasar por la fase slida y all quedarn retenidos los analitos (o los interferentes). Los analitos se pueden liberar por medio de un disolvente fuerte. Si estn juntos los analitos y los interferentes se pueden separar por medio de disolventes de fuerzas diferentes.

Hay muchas fases slidas para separar los componentes orgnicos, inorgnicos o biolgicos selectivamente. Especialmente se utilizan en los anlisis de drogas, carbohidratos, catecolaminas, etc. y en la preconcentracin de compuestos que estn en fases acuosas.

Extraccin Lquidolquido

El componente se distribuye entre fases lquidas inmiscibles.

Hay que tener especial cuidado con la formacin de emulsiones. Para romper las emulsiones se utilizan los siguientes mtodos: sales inertes o adicin de complementos orgnicos, adecuacin del pH, adicin de reactivos formadores de pares ionicos, etc.

1.4. TCNICAS ANALTICAS DE SEPARACIN

Tipos de muestra

Mtodo
Dilucin

Fundamentos de la tcnica
En el anlisis de HPLC no hay que saturar la columna (para evitar una acumulacin excesiva) y se han de diluir las muestras lquidas para poder mezclarlas con el disolvente de la fase mvil

Notas
El disolvente no tiene que ser demasiado fuerte y tiene que mezclarse con la fase mvil del HPLC. En las preparaciones farmacuticas, la dilucin y el anlisis suelen ser la nica forma de preparacin de la muestra que se necesita.

Evaporacin

El lquido se evapora despus de proceder a un calentamiento suave a presin atmosfrica y con borboteo de aire o gas inerte. Tambin se puede hacer a vaco.

No se debera evaporar demasiado rpido porque pueden producirse prdidas de analitos. No calentar despus de secar la muestra. Mejor si se utiliza gas inerte (N2 ) y por medio de sistemas automticos (Turbovap).

Destilacin

La muestra se calienta a la temperatura de ebullicin del disolvente. Los compuestos ms voltiles se concentran en el vapor y una vez condensados se pueden recoger.

Se puede emplear fcilmente con disoluciones de temperatura de ebullicin baja. Algunos compuestos se descomponen a temperaturas altas. Se puede hacer a vaco para evitar estos problemas. Para concentrar la disolucin que resulta de la dilisis se utiliza la extraccin en fase slida. La dilisis se utiliza para el anlisis de compuestos qumicos del exterior de la clulas que estn en las bras animales y vegetales. Mtodos alternativos son la ultraltracin o la smosis inversa.

Microdilisis

Se coloca una membrana semipermeable entre las dos fases lquidas y algunos analitos pasarn de una fase lquida a la otra, donde se concentrarn.

Liolizacin

Se congela la muestra acuosa trabajando a vaco, el agua se sublima y se obtienen los analitos concentrados.

Se pueden perder componentes voltiles. Los componentes inorgnicos se concentrarn.

10

1.4. TCNICAS ANALTICAS DE SEPARACIN

Tipos de muestra
Suspensiones

Mtodo
Filtracin

Fundamentos de la tcnica
Se hacer pasar el lquido por un papel de ltro y las partculas de la suspensin se quedan en el ltro.

Notas
La ltracin es un procedimiento muy recomendable para la fase mvil de HPLC, para protejer la columna y evitar sobrepresiones. Las membranas utilizadas tienen que ser compatibles con el disolvente. Los ltros de tamao de poro grandes (>2 m) se pueden utilizar para lograr ujos altos y para eliminar partculas de tamao grande y los de poros de tamao pequeo (<0.2 m) para eliminar las bacterias.

Centrifugacin

Se pone la muestra en un tubo cerrado de centrifuga y se centrifuga a velocidad alta. El lquido sobrenadante se decanta.

La centrifugacin por medio de tubos suele dar problemas de eliminacin cuantitativa de slidos

Sedimentacin

Se le deja a la muestra el tiempo que necesita en un tanque de sedimentacin para que sedimente

Este procedimiento es muy lento. Segn la velocidad se pueden obtener slidos con tamaos de partcula diferentes.

1.4.2.

Tcnicas analticas de separacin

Los procedimientos de separacin son muy utilizados en los anlisis qumicos y su desarrollo instrumental y qumico est en la base de la adecuacin y el avance de los mtodos analticos. Debido a ello, es adecuado cambiar ligeramente de punto de vista y examinar por encima las tcnicas de separacin que se utilizan hoy en da.

Extraccin lquida. Consiste en la distribucin entre dos fases lquidas inmiscibles. Esta tcnica se utiliza sobre todo en la forma de una nica extraccin o de una serie de extracciones nicas seguidas. La aplicacin ms notable es la separacin de metales aunque tambin se utiliza en la separacin de compuestos orgnicos. Esta tcnica se puede mejorar adecuando las condiciones qumicas de la fase acuosa, sobre todo el pH y mediante ligandos orgnicos.

11

1.4. TCNICAS ANALTICAS DE SEPARACIN

Precipitacin. Esta tcnica se utiliza dado que es la base de la gravimetra. En esencia no es ms que la formacin cuantitativa de especies insolubles y su uso mas extendido se da sobre todo en el anlisis inorgnico. Aun as, la preconcentracin y separacin de algunas trazas se logra mediante la coprecipitacin. Los reactivos inorgnicos coprecipitantes son el hidrxido, sulfuro, sulfato, uoruo y fosfato. En las coprecipitaciones por medio de compuestos orgnicos se utilizan ms reactivos y a menudo son ms selectivas que las de los inorgnicos. Entre otros los ms utilizados son oxalato, oxina, dimetilglioxima, cupferrn, dietilditiocarbamato, PAN (1-(2-Piridilazo)-2-naftol), etc. Intercambio ionico. Por medio de la complejacin supercial o mediante adsorcin se produce un intercambio entre los iones metlicos de una disolucin y los iones que lleva la fase slida del intercambiador de iones (fundamentalmente una resina orgnica). Una vez que este intercambio se adecua a un procedimiento qumico puede ser el mtodo para la separacin de unos cuantos iones. Separaciones electroqumicas. La separaciones electroqumicas conllevan, en primer lugar, la acumulacin del analito en un electrodo. Luego mediante un proceso de disolucin fardico 3 el analito acumulado reacciona y se disuelve. El primer proceso, la concentracin, suele ser largo oscilando ente algunos segundos y 30 minutos. De todas maneras, hay que tener en cuenta que as se logra la separacin de componentes electroactivos y una preconcentracin de muchos niveles de magnitud. Estas separaciones se aplican de dos modos. El primero y ms antiguo, se utiliza solo para los iones metlicos y es una electrodeposicin catdica sobre un electrodo de mercurio. De esta forma, la amalgama obtenida se volver a disolver despus de aplicarle una corriente andica, siendo esto lo que se conoce como voltametra de disolucin andica (DAV4 ). El segundo modo de estas separaciones se basa en un mecanismo no fardico, esto es, la adsorcin de los componentes se refuerza en la celda electroqumica, a menudo sin que ocurra un cambio del estado de oxidacin. Como antes, no obstante, cuando se cambia la corriente elctrica los componentes se disolvern dando una seal elctrica. El nombre de esta tcnica es voltametra de disolucin adsortiva (Adsortive Stripping Voltametry). Adsorcin/Desorcin. El reparto de compuestos entre las fases slido/lquido o slido/gas puede ser una forma de separacin. El primer paso de este mtodo de separacin es la absorcin de los compuestos. Para ello existe ms de un mecanismo: absorcin, adsorcin, adsorcin qumica, condensacin capilar, etc. El adsorbente que ms se utiliza es el carbn
3A 4 El

menudo a esto se le llama en ingls stripping nombre de la tcnica en ingls es Anodic Stripping Voltametry (ASV).

12

1.4. TCNICAS ANALTICAS DE SEPARACIN

activo dado que algunos metales y compuestos orgnicos son atrapados mediante la adsorcin. La liberacin de los compuestos atrapados, esto es, la desorcin, se puede llevar a cabo trmicamente. De todas maneras, aparte del carbn activo se pueden utilizar la celulosa, el quitosano, la espuma de poliuretano o los copolimeros de estireno-divinilbenceno. Absorcin. Entre los compuestos gaseosos hay algunos que presentan reacciones irreversibles cuando se hacen pasar por lquidos o slidos. Gracias a esto, se puede lograr la separacin del CO2 , SO2 o NH3 de otros compuestos. Formacin de especies voltiles. Existen diferentes modos para hacer las separaciones entre los estados lquido/gas. Mediante la evaporacin se separan los compuestos voltiles. En la destilacin la separacin se logra segn la temperatura de ebullicin. La captura en fro, en cambio, es la condensacin de algunos compuestos voltiles. Estos mecanismos se aplican cada vez ms para adecuar la formacin de algunos compuestos voltiles y para conseguir determinaciones instrumentales ms selectivas. El ejemplo ms claro de esto es la determinacin de los metales voltiles mediante tcnicas atmicas. El anlisis de los metales voltiles se basa en la formacin de los hidruros de estos metales. Esta formacin se logra fcilmente con metales como As, Bi, Ge, Pb, Sb, Se, Sn y Te. De esta forma, por una parte, la determinacin de los metales en la fase gaseosa se ver libre de numerosos interferentes presentes en la disolucin y, por otra parte, la sensibilidad de la determinacin ser mayor. En general, con las especies voltiles se pueden aplicar varias de las tcnicas mencionadas anteriormente. Sin embargo, las ms usadas son la purga y la trampa y el espacio de cabeza5 . Flotacin. Las tcnicas de otacin de espuma son tcnicas que se basan en la adsorcin de burbujas. La separacin por medio de esta tcnica consiste en la desigualdad de la actividad supercial de los compuestos a separar. Los materiales activos supercialmente (tensoactivos) pueden ser iones, molculas, partculados o coloides y se pueden quedar selectivamente adsorbidos en las burbujas. En la medida en que la otacin progresa las burbujas forman espuma por encima del lquido y ah se enriquece el compuesto que se quiere separar. Separaciones basadas en membranas. Una membrana semipermeable que separa dos fases lquidas puede conducir a la separacin de algunos compuestos de la primera fase despus de pasar a la 2a fase. Los mecanismos de este transporte pueden ser tan simples como el gradiente de concentracin o ms complejos como el transporte acoplado con otro compuesto.
5 En

ingls Head Space.

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1.4. TCNICAS ANALTICAS DE SEPARACIN

Cromatografa. Como se ha dicho antes, una fase mvil y otra estacionaria son la base de la cromatografa. Gracias a las caractersticas fsicas y qumicas de estas fases se pueden hacer variadas separaciones de compuestos. En la base de esta separacin aparecern algunas tcnicas que ya se han mencionado: distribucin lquida, adsorcin, intercambio de iones, uidos supercrticos, segn el tamao (exclusin molecular), etc. Electroforesis. Aunque hoy en da se puede considerar una tcnica derivada de la cromatografa, en su inicio no era as dado que no haba una fase estacionaria. En esta tcnica, aparte de las migraciones producidas por la fase mvil se aaden las migraciones de los iones producidas por el campo elctrico. Como consecuencia de ello, se logra una separacin en funcin de la movilidad y la carga elctrica de los compuestos. Hoy en da las fases estacionarias usadas en la electroforesis se emplean para mejorar la efectividad de la fase mvil. Ultracentrifugacin. Las molculas coloidales se mueven con diferente velocidad de un sitio a otro bajo una fuerza centrifuga dependiendo de su masa. As se pueden lograr separaciones. Esta tcnica se utiliza en bioqumica, sobre todo para separar las protenas y molculas parecidas.

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