PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.

com

PENUNTUN PRAKTIKUM
Ilmu Dasar Keperawatan (IDK II) Pengenalan Alat & Bahan di Lab Mikrobiologi Media & Morfologi Bakteri dan Jamur Cara Mengasingkan Bakteri

ORIENTASI
TOPIK : 1. Alat dan Bahan pemeriksaan laboratorium mikrobiologi 2. Media perbenihan bakteri TUJUAN : 1. Mengetahui berbagai macam Alat dan Bahan pemeriksaan laboratorium mikrobiologi 2. Mengetahui berbagai macam media perbenihan bakteri

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

I. Alat dan Bahan Untuk Pemeriksaan di Laboratorium Mikrobiologi

1. Tabung a. Peragian b. Perbenihan c. Reaksi d. Ulir e. Durham 2. Cawan petri

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

3. Labu / kolf a. Biasa b. Erlenmeyer

4. Pipet a. Pasteur b. ukuran biasa c. Balon

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

5. Saringan Kuman

6. Gelas ukur

8. Sentir bunsen
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

7. Sengkelit

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

9. Untuk bakteri anaerob

Inkubator :
digunakan mengeramkan media yang telah ditanami mikroorganisme dan untuk menyimpan bahan pemeriksaan dimana bakteri terkandung akan mati bila disimpan di dalam lemari es (misal : cairan cerebrospinal)
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

10. Inkubator biasa

11. Inkubator CO2

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

12. MIKROSKOP

Untuk melihat objek atau detail yang terlalu kecil oleh mata

Fungsi :
- Mengidentifikasi mikroorganisme - Mengetahui struktur dan morfologi bakteri, badan inklusi, efek sitopatogenik dan lain-lain - Menghitung jumlah mikroorganisme

Media Perbenihan Bakteri

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Tujuan : 1. Mengetahui cara membiakkan, mengasingkan dan menyimpan bakteri dalam laboratorium untuk waktu yang lama 2. Mempelajari sifat-sifat pertumbuhan / koloni bakteri 3. Mempelajari sifat-sifat biokimia bakteri Pembiakan dan Pertumbuhan Bakteri Media pertumbuhan bakteri digunakan untuk : * Isolasi * Transportasi * Persemaian * Diferensiasi bakteri

Berbagai Media perbenihan :

Misal : + zat warna untuk indikator aktivitas metabolisme bakteri + darah, serum, vitamin untuk bakteri dengan aktivitas tinggi (Medium Diperkaya : Agar Darah )
Perbenihan padat ( agar 1,5 2 %); lempeng dan tabung

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Untuk menghambat pertumbuhan bakteri secara selektif digunakan Medium Selektif : Salmonella Shigella. PEA, EMB(Eosin Methyllen Blue) Untuk membedakan beberapa jenis bakteri digunakan Medium Diferensial : ENDO, EMB

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Agar Salmonella shigella

Agar Endo

Agar Darah

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Agar TCBS

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Agar Muller Hinton

Media selektif: Agar PEA (Phenylethyl Alcohol)

Guna: medium selektif untuk menghambat pertumbuhan bakteri Gram negatif Prinsip: PEA mencegah pertumbuhan bakteri Gram negatif dengan merusak struktur lipid pd membran sel bakteri Gram negatif Keterangan Gambar: Gambar A (agar PEA) & Gambar B (agar nutrien) + Bakteri Gram positif - Bakteri Gram negatif

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Media diferensial: Agar DO (Deoxycholate & Citrate)

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Guna: mengisolasi & membedakan bbrp anggota family Enterobacteriaceae. Prinsip: - DOC mengandung natrium deoxycholate dan sitrat yg bekerja menghambat pertumbuhan bakteri Gram-positive -Juga mengandung gula laktosa yg membedakan bakteri enterik yang melakukan atau tidak fermentasi laktosa Fermentasi laktosa tampak dari warna merah yg ditimbulkan (berhubungan dg pH netral) Reaksi yang tampak pd gambar:. A. Fermentasi laktosa tinggi B. Pertumbuhan bakteri Gram-positive kurang C. Tidak ada fermentasi D. Fermentasi laktosa tinggi

Perbenihan transpor
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Perbenihan semisolid (agar 0,2 0,5 %)

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Perbenihan Cair

Persiapan / Pembuatan media

Persiapan / pembuatan media biasanya dilakukan di ruang khusus (dapur media)

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

1. Timbangan Kasar

Timbangan analitik

Otoklaf :
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Digunakan untuk sterilisasi perbenihan menggunakan uap panas (121 0C, 20)

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Hot Air Sterilizer (Oven) :

Digunakan untuk sterilisasi alat-alat gelas dan lainnya yang tahan dengan pemanasan kering (dry Heat) - 160 0C selama 60 - 170 0C selama 40 - 180 0C selama 20

LEMARI PENDINGIN (REFRIGERATOR)

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Alat ini digunakan untuk : - Menyimpan media steril yang siap pasti, agar isi dan mutu media tersebut tidak berubah - Menyimpan untuk sementara waktu bahan/spesimen yang belum sempat diperiksa agar tidak mengalami perubahan - Menyimpan cakram antibiotika yang belum terpakai agar tidak mengalami perubahan

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

MORFOLOGI KOLONI BAKTERI DAN CARA MENGASINGKAN BAKTERI

Tujuan :
1. Mengetahui jenis-jenis bakteri berdasarkan morfologi koloninya 2. Mengetahui hal-hal yang perlu diperhatikan dalam mempelajari koloni bakteri 3. Mengetahui bahwa sifat-sifat koloni dapat dipakai untuk membantu identifikasi bakteri

Bakteri akan memberikan pertumbuhan koloni yang berbeda pada media perbenihan bila dilihat secara makroskopik. Perbedaan ini disebut karakteristik pertumbuhan, yang selanjutnya akan digunakan sebagai dasar penggolongan taksonomi.

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam mempelajari suatu koloni bakteri , baik pada agar lempeng dan agar tabung : 1. Ukurannya (diameternya) 2. Ada atau tidaknya pigmen 3. Menonjol atau rata 4. Keruh atau bening, suram atau mengkilat 5. Permukaan rata (Smooth) atau tidak rata (Rough) 6. Pinggiran rata atau tidak 7. Menjalar atau tidak 8. Konsistensi (Berlendir atau tidak)

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

1. Koloni S (Smooth) : E. coli, Salmonella, Vibrio, Shigella, Staphylococcus 2. Koloni R (Rough) : Bacillus subtilis 3. Koloni menjalar : Proteus sp. 4. Koloni beranyaman : Bacillus mycoides 5. Koloni berlendir/mukoid : Klebsiella sp.

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Koloni smooth

Koloni rough

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Koloni Menjalar

Koloni Beranyaman

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Koloni Mukoid

KOLONI BERPIGMEN

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Keterangan :
1. Staphylococcus aureus 2. Staphylococcus citreus 3. Staphylococcus epidermidis 4. Serratia marcescens 5. Chromobacterium violaceum 6. Pseudomonas aeruginosa

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Serratia marcescens

Micrococcus luteus

Chromobacterium violaceum

Pseudomonas aeroginosa

Bakteri yang dibiakkan pada agar darah lempeng, perlu diperhatikan keadaan sekeliling koloni apakah terbentuk zona hemolisis atau tidak. Zona berwarna hijau atau keruh, disebut hemolisis tip alfa (hemodigesti) 2. Zona jernih tidak berwarna, disebut hemolisis tip beta (hemolisis) 3. Tidak ada zona, disebut hemolisis tip gamma (non hemolisis) 1.

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

MIKOLOGI
Ciri ciri :
a. Dinding sel : glukan , manan dam khitin b. Sel eukariota ; Tidak berklorofil ; Bersifat heterotrof c. Uniseluler : Yeast /ragi / khamir Multiseluler : mold (kapang) d. Reproduksi : seksual dan aseksual e. Perbenihan : agar Sabouraud f. Pewarnaan : KOH 10 % ; PAS (Peridic Acid Schiff); LPCB Perak metenamin (gomori) ; g. Pertumbuhan : Suhu (28 oC 35 oC) ; pH (4,5 6,5)

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Morfologi koloni

1. Ragi Koloni bulat bakteri, cembung, halus dan licin

Membentuk koloni basah, warna putih kekuningan Biakan candida albicans pada agar sabouraud

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Biakan Aspergillus niger pada agar sabouraud

2. Kapang

Sel memanjang dan bercabang

Koloni : kering, padat seperti kapas

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

B. CARA MENGASINGKAN BAKTERI

Untuk mempelajari koloni bakteri dan dapat mengasingkannya dari suatu biakan / bahan pemeriksaan, perlu didapatkan koloni-koloni yang terpisah. Pemisahan koloni bakteri dapat dilakukan dengan memakai sudip gelas berbentuk L untuk menggoreskan bahan di seluruh permukaan perbenihan atau memakai sengkelit dengan membuat garis-garis sejajar (Penipisan Koch)

Tujuan :
Mengetahui cara mengasingkan bakteri dari suatu bahan pemeriksaan / biakan

CARA MENGASINGKAN BAKTERI (Penipisan KOCH)

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Tujuan :
Mengetahui cara mengasingkan bakteri dari suatu bahan pemeriksaan / biakan

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com