REFERAT TOXICOLOGIE

Aflatoxinele si Aflatoxicoza
Sem II

Gheoca Razvan Ionut Grupa 3408

CUPRINS:
Cap I
1.1 1.2 Ce sunt micotoxinele? Factorii care influenteaza dezvoltarea micotoxinelor

Cap II
2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 2.7 2.8 2.9 2.10 2.11 Aflatoxina Detectarea Aflatoxinei in anumite Hrana zilnica contaminata Influena factorilor extrinseci asupra aflatoxinelor Influena factorilor intrinseci asupra aflatoxinelor Efectele asupra animalelor si a omului Patologie Microbiologie Animale non-umane Prag de risc si aparitia Aflatoxicozei Prezenta aflotoxinelor in diverse produse alimentare a. in cereale; b. in seminte oleaginoase si in ulei; c. in legume si fructe; d. in lapte si produse lactate; 2.12 Prevenirea micotoxicozelor

Cap III
3.0 Aflatoxicoza 3.1 Simptomatologia la Pasari 3.2 Simptomatologia la Suine 3.3 Simptomatologia la Caini 3.4 Simptomatologia la Taurine

Cap. I
1.1 Ce sunt micotoxinele?

Termenul de micotoxin vine de la cuvntul grecesc mycos care inseamn ciuperc i de la cuvntul latin toxicum care nseamn otrav. Ele desemneaz metabolii secundari secretai de mucegaiurile care aparin n principal genurilor Aspergillus, Penicillium i Fusarium, prezente n mod natural n aerul ambient, pe pmnt i pe culturi. Micotoxinele sunt considerate ca fiind parte din contaminani alimentari cei mai semnificativi n ceea ce privete impactul asupra sntii publice, securitii alimentare i asupra economiei a numeroaselor ri. Ele se gsesc pe o mare varietate de produse alimentare nainte, n timpul i dup recolt. Afecteaz numeroase produse agricole, anume cereale, fructele, nucile, boabele de cafea, orezul i plantele oleaginoase, care sunt substraturi foarte sensibile la contaminarea cu mucegaiuri i la producerea de micotoxine. Contaminarea produselor de ctre micotoxine se realizeaz n cazul cnd ntrunesc condiiile de mediu pe cmp pentru apariia lor, precum i procedee neadecvate de recoltare, de stocare i de transformare atunci cnd sunt cumulate. Prin diversitatea efectelor lor toxice i a propietilor lor sinergice, micotoxinele prezint un risc pentru consumatorul alimentelor contaminate Micotoxinele sunt metabolii ai mucegaiurilor cu o structur chimic mai mult sau mai puin cunoscut care au capacitatea de a modifica structuri biologice anormale, cu efecte degradante att la om,ct i la animale. Ele pot fi puse n eviden i n sporii acestora sau n substratul pe care cresc fungii. Exist o varietate foarte mare de micotoxine dar nu toate sunt importante din punctul de vedere al siguranei alimentaiei umane. Micotoxinele cele mai importante, cu riscuri seminificative pentru sigurana alimentaiei umane sunt aflatoxinele, fumonisinele, ocratoxinele, patulina, trichotecina i ergotoxina. 1.2 Factorii care influenteaza dezvoltarea micotoxinelor Creterea microbian i producia de toxine este influenat de numeroi factori. Este important s cunoatem modul n care aceti factori influeneaz calitativ i cantitativ, dezvoltarea microorganismelor i

producia de toxine pentru a putea stabili condiiile optime de depozitare a alimentelor.

Pentru a ntelege modul n care celula microbian reacioneaz la condiiile mediului ambient, diferii factori au fost mparii arbitrar n trei mari grupe, cu precizia c n condiiile naturale, bioefectul acestora poate fi cumulativ sau sinergic: o Factori extrinseci-sunt factorii exogeni, ai mediului natural/industrial: temperatura, umezeala relativ a aerului, concentraia de oxigen, radiaii, factori mecanici, factori chimici, .a. o Factori intrinseci-sunt factori dependeni de natura alimentului care influeneaz creterea i activitatea culturilor starter dar i de natura alterrii specifice a produselor alimentare-compoziia chimic i concentraia n nutrieni, pH, rH, structura anatomic, substane chimice . o Factori implicii-sunt factori biologici determinai de relaiile ce se pot stabili ntre diferitele grupe de microorganisme care alctuiesc microbiota alimentului respectiv.

Cap II
2.1 Aflatoxina

Aflatoxina este o substan toxic cu potenial cancerigen mutant i imunorepresiv , produs de anumite tipuri de mucegaiuri. Prima dat aflatoxina a fost identificat la Aspergillus flavus, mucegai de la care i s-a dat i denumirea (A.flavus - aflatoxina). A fost descoperita n 1960, moment ce a marcat aa-numita "revoluie a micotoxinelor". Aflatoxinele sunt produi de metabolizare ai mai multor specii de mucegaiuri avnd ca structur de baz nucleul cumarinic condensat cu unul furanic.Se cunosc 17 aflatoxine: B1, B2 ,B2a ,G1, G2, G1a , M1 ,M2 , GM1, GM2 ,P1, P2, Q1, Q2, aflatoxicolul, aspertoxina. Au fost notate iniial n ordinea descresctoare a activitii biologice i toxicitii, dup cum urmeaz: aflatoxina B1, aflatoxinele G1, G2, aflatoxina B2 (produse n spe de Aspergillus parasiticus, extrem de toxigen, urmat de Aspergillus flavus).

Aflatoxinele sunt grupate n trei categorii: o aflatoxine majore o aflatoxine monohidroxilate o aflatoxine dihidroxilate. Cercetriile ulterioare au identificat ali 13 metabolii toxici precum: parasiticolul, aflatoxicolul, aflatoxinele GM1, GM2, aflatoxina P1, aflatoxina M2A i altele. Aflatoxinele prezint fluorescen n UV. De altfel, primii patru compui izolai au fost denumii n funcie de culoarea fluorescenei la

254 nm i 366 nm, albastr sau verde, respectiv B (blue) i G (green). Aflatoxinele sunt prezente n multe locuri i sunt puin exigente la cretere: temperatura cuprins ntre 6 si 50C, sursa de carbon i azot i o valoare a aw mai mare de 80%. Din acest motiv, numeroase produse alimentare destinate consumului pot conine aflatoxine n cantiti uneori importante: alune, porumb, gru, fistic, cacao, cafea, manioc, soia. Aflatoxinele au de asemenea un efect puternic teratogen i pot provoca moartea n cteva ore sau cteva zile , n funcie de cantitatea de micotoxin i sensibiltatea animalului. Intoxicaia acut cu aflatoxin se traduce prin moarte i n general cu simptome de depresie, anorexie, diaree, icter sau anemie. Mai presus de orice, leziunile hepatice (necrozele i cirozele) evolueaz n final cu hepatome sau carcinome. Formele cronice ale aflatoxicozelor se traduc printr-o scdere a performanelor de cretere a animalelor, anemie, icter lejer i o evoluie canceroas n final. O doz de 0.2g/kg timp de 470 zile declaneaz un hematom la oareci. Din cauza efectelor negative asupra organismului animal i uman, limitele maxime admise de aflatoxine n produsele alimentare sunt cuprinse ntre 0.05-15 (g/kg) (tabel 1). Aceste substane produc afeciuni grave organismelor superioare, mai ales la nivelul ficatului i al vezicii biliare, dar nu par a avea efecte toxigene asupra bacteriilor. Dimpotriv, bacteriile lactice precum: Lactobacillus delbrueckii (ssp. bulgaricus) i Lactococcus lactis pot degrada aflatoxina B1. Detoxifierea i degradarea acesor toxine poate avea loc n special n stomacul ierbivorelor (n special ovine), sub influena florei microbiene. Tabel 1. Aflatoxine - limitele maxime admise Aflatoxine Nivelul maxim de aflatoxina (g/kg) B1 B1+B2+G1+ M1 G2 Arahide, nuci i fructe uscate Arahidele, nucile i fructele uscate i produsele procesate din acestea, destinate consumului direct sau folosite ca ingredient alimentar Arahidele supuse sortrii sau altui

2.0

4.0

8.0

15.0

tratament fizic,naintede a fi consumate de ctre om sau de a fi folosite ca ingredient alimentar Nucile i fructele uscate supuse sortrii sau altui tratament fizic, nainte de a fi consumate de catre om sau de a fi folosite ca ingredient alimentar Cereale (inclusiv hrica, Fagopyrum sp) Cereale (inclusiv hrica) i produsele procesate din acestea destinate consumului uman direct sau folosite ca ingredient alimentar Cereale (inclusiv hrica) cu excepia porumbului, destinate sortrii sau altui tratament fizic, nainte de consumul de ctre om sau de a fi folosite ca ingredient alimentar Porumbul destinat sortrii sau altui tratament fizic, nainte de a fi consumat de ctre om sau de a fi folosit ca ingredient alimentar Lapte (lapte batut, lapte pentru fabricarea produselor pe baz de lapte i laptele tratat prin cldura, aa cum este definit prin legislatia sanitara veterinara in vigoare Urmatoarele specii de condimente: - Capsicum spp. (fructele uscate ale acestuia, intregi sau macinate, inclusiv chilli, pudra de chilli, cayennesi paprika) - Piper spp.(fructele acestuia, inclusiv piper alb sau negru) - Myristica fragrans (nucoara)

5.0

10.0

2.0

4.0

2.0

4.0

5.0

10.0

0.05

5.0

10.0

- Zingiber officinale (ghimbir) - Curcuma longa (turmeric) Alimentele pentru copii i alimentele pe baz de cereale procesate, pentru sugari i copii de vrst mic Formulele pentru sugari i formulele n continuare inclusiv laptele pentru sugari i laptele n continuare Alimente cu destinaie nutriional special destinate n special sugarilor

0.10

0.02 5 0.02 5

0.10

Aflatoxinele sunt secretate de Aspergillus flavus, i un numar mare de alte mucegaiuri, diferit penicilinii i chiar Rizopus i au ca principal producator A. flavus. Acestea se dezvolt n semine de oleoginoase, produsele secundare de la fabricarea uleiului (srot, tre), arahide, cereale, produse de origine animal (brnzeturi fermentate, preparate de carne). S-au constatat hepatite acute la copiii care au fost alimentai cu nlocuitori de lapte obinui din semine oleaginoase atacate de fungi. Tipurile de mucegaiuri Aspergillus se dezvolta in gramezile de balegar, in fan, in cereale, in plantele aflate in descompunere, in alimentele depozitate, transportate, stocate si prelucrate necorespunzator. Conditiile de stocare ale cerealelor si plantelor pentru alimentatie influenteaza dezvoltarea acestor mucegaiuri, care cresc foarte bine in medii cu umiditate si temperatura ridicate, in lipsa ventilatiei.

2.2

Aflatoxina a fost detectata ocazional in anumite alimente:

o Laptele, branzeturile ,ouale si carnea pot contine aflatoxina deoarece animalele si pasarile au consumat furaje contaminate. o Cereale, alune, nuci, migdale, smochine, paprika, piper, condimente, seminte de bumbac, alte tipuri de alimente si furaje. Multe alimente vechi si, mai ales, fructele pot sa dezvolte mucegaiuri. Fructele prelucrate sub forma de sucuri pot imprastia aceste aflatoxine. Prima dat problemele provocate de aflatoxine au fost depistate n Anglia, unde n anul 1960 au murit n cteva luni peste 2.000 de curcani. Sau fcut cercetri i rezultatele au scos la iveal c psrile fuseser infectate cu o ciuperc microscopic ce provenea de la hrana animalelor:

nite turte de arahide care fuseser aduse de la un singur depozit care, se pare, nu respecta condiiile de igien impuse. Ce este mai ru este faptul c, odat ce un animal a mncat hran infectat (porumb sau alte cereale) el poate transmite toxina mai departe la omul care consum carnea animalului respectiv. De la acel incident, n toat Europa de vest s-au impus msuri clare pentru depozitarea alimentelor, tocmai pentru a preveni astfel de cazuri dramatice. Conform cercetatorilor americani, cel mai inalt risc de contaminare cu aflatoxina il au cerealele, alunele si seminele de bumbac. i frunzele de tutun stocate i prelucrate necorespunztor ar putea conine aflatoxin, sporind n acest fel gradul de toxicitate pentru fumtori, i aa expusi multiplelor riscuri ale viciului lor. mbolnviri acute la oameni (aflatoxicoze) au fost raportate n ri ca Taiwan, India, Kenya. Simptomele sunt : dureri abdominale, vom, edem pulmonar, convulsii, com i uneori chiar moartea prin edem cerebral. Apar leziuni la nivelul ficatului, rinichilor i inmii. Expunerile prelungite chiar la doze mici de aflatoxin pot favoriza apariia cancerelor. Unele studii apreciaz c potenialul cancarigen al aflatoxinei este foarte mare. Aflatoxinele sunt specifice rilor cu clim cald deoarece ele incubeaz i au o producie maxim la temperaturi ridicate. Aflatoxina B1 prezint cea mai mare toxicitate. n laptele vacilor care consum furaje contaminate cu aflatoxine , apar aflatoxine M n dou fraciuni M1 si M2. n general aflatoxinele au greuti moleculare mici, sunt termostabile, dar sensibile la aer i lumin. Ele pot fi considerate hepatotoxice, hepatocancerigene i mutagene; animalele tinere sunt mai sensibile dect cele vrstnice, cea mai mare sensibilitate o prezint nsa bobocii de ra. Aflatoxinele sunt distruse de ctre radiaiile UV, acizi, baze tari, de hipoclorii, de permanganatul de potasiu, de apa oxigenat, de clor, de ozon, de alcali i sunt uor oxidabile. Nu sunt solubile n ap,ci n solveni organici, dar acetia nu pot fi folosii pentru ndeprtarea micotoxinelor, deoarece prin extracie se pierde valoarea alimentar a produsului. Efectele cancerigene sunt nu numai la nivelul hepatic, ci i la stomac, plmni. Aflatoxina B1 se poate cupla n vitro cu ADN-ul, provocnd mutaii inreversibile. Intoxicaiile cu aflatoxine se manifest prin stare hemoragipar, dizenterie, uneori icter; mediul cel mai favorabil pentru formarea acestora il constituie porumbul si arahidele. Aflatoxinele se

gsesc i n carne, ou, pete, crevei, cu predilecie n diferite organe (la porc n ficat).

2.3

Jumatate din hrana zilnica e contaminata

Un studiu numit "Siguranta alimentara", publicat in anul 2002 in colectia franceza "Stiinte si tehnici alimentare", arata ca Romania se afla printre tarile infectate cu microtoxine. Din produsele autohtone analizate de francezi, jumatate musteau de asemenea substante ucigase. Capitolul "Romania" din acest document e intitulata "Studiile Dutton - 1996" (adica studiile au fost facute inca de la acea vreme), iar oamenii de stiinta occidentali situeaza tara noastra in zona afectata de ceea ce ei au numit, cu 15 ani in urma, "sindromul balcanic". Inca de atunci se stia ca populatiile Romaniei, Bulgariei si tarile fostului spatiu iugoslav consuma cereale puternic infectate cu ciuperci producatoare de micotoxine, de tip "aflatoxina", in special cele care ataca rinichii. In anul 2004, in Romania exploda un scandal legat de importarea unui lot de boia de ardei (paprika) din Ungaria, infectat cu aflatoxina. Produsul a fost retras imediat de pe piata. Sunt i ri care au reuit s ntoarc de la vam alimentele cu probleme. 21 de produse au fost ntoarse n ara de origine: ciuperci radioactive n Ucraina, alune n coaj cu pmnt i insecte n China i orez cu aflatoxine n Pakistan. De altfel, prezena aflatoxinelor n diferite produse, att pentru consumul uman ct i pentru cel animal, au fost principala cauz de interzicere a unor importuri. Au fost depistate i n migdale din SUA, fasole din Nigeria, halva din Liban sau miez de nuc din Australia. 2.4 Influena factorilor extrinseci asupra aflatoxinelor

a) Temperatura - are influen asupra speciei de mucegai, dar i asupra produselor de metabolism. Procesele metabolice se desfoar n limite stricte de temperatur, specifice fiecrui microorganism. Acest factor poate favoriza sau inhiba dezvoltarea microorganismelor, iar n anumite cazuri poate chiar determina moartea acestora. Efectul temperaturii asupra dezvoltrii microorganismelor se datorete influenei pe care aceasta o exercit asupra: o strii de agregare a apei, n funcie de care se mrete sau se micoreaz disponibilitatea apei;

o vitezei reaciilor enzimatice; o plasticitii membranei celulare i citoplasmei; o macromoleculele pe care le pot denatura; Mucegaiurile se dezvolt la temperaturi diferite. Exist pentru fiecare specie, un grad de temperatur la care dezvoltarea se face cu cea mai mare intensitate. Aceast temperatur se numete temperatura optim de dezvoltare. Deasupra i sub temperatura optim, dezvoltarea mucegaiurilor slbete, i cnd atinge un anumit punct, superior sau inferior, nceteaz de a se mai dezvolta chiar dac mediul nutritiv ramne acelai. Temperatura optim pentru creterea mucegaiurilor este cuprins ntre 25-30C iar limita maxim este de 40-45C (tab.10). Exist totui mucegaiuri care se pot dezvolta fr probleme la temperaturi de 55C Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatus, dar i mucegaiuri care sunt capabile s se dezvolte la temperaturi de 0C, Penicillium cyclopium. b) Umiditatea - cantitatea de ap existent n mediul ambiant i n substraturi este unul din factorii importani pentru dezvoltarea mucegaiurilor i pentru producia de aflatoxine. n atmosfer exist o umezeal relativ de 70-90% i prin pstrarea alimentelor, n timp, n funcie de temperatur i compoziia produsului are loc o absorbie a vaporilor de ap din aer, instalndu-se o stare de echilibru, cu creterea cantitii de ap liber i a indicelui de activitate a apei. Este tiut faptul c mucegaiurile apar dup o cretere accidental a umiditii. ns, nu doar cantitatea de ap influeneaz ci i forma de prezentare a acesteia (liber sau legat). o Apa liber este apa din interiorul celulelor i poate fi eliminat fr a interveni n procesele vitale. o Apa legat face parte integrat din celule. Pentru germinare, sporii de mucegai au nevoie ca ap s se gseasc n form liber. Exist dou uniti relaionate cu cantitatea de ap: o umiditate relativ de echilibru (HRE): este cantitatea de ap care dispun microorganismele, fiind echilibrul ntre coninutul de ap liber al produsului i vaporii de ap existeni n mediul ambient. Se exprim n procente i variaz de la un produs la altul n funcie de coninutul acestuia n glucide sau materie gras. o apa disponibil sau activitatea apei (aw) este relaia existent ntre apa liber din alimente i capacitatea microorganismelor pentru

proliferare. Activitatea apei ne indic care este cantitatea de ap disponibil pentru dezvoltarea microorganismelor(tabel 1) Tabel 1. Valori ale aw necesare pentru dezvoltarea unor mucegaiuri i pentru producia de micotoxine Mucegai Aw Micotoxin aw Aspergillus flavus 0.78 Aflatoxine 0.83 Aspergillus 0.70 Aflatoxine 0.80 parasiticus Penicillium 0.85 Patulina 0.99 expansum Penicillium patulum 0.83 Patulina 0.95 Aspergillus clavutus 0.85 Patulina 0.99 Aspergillus 0.77 Ochratoxine 0.88 achraceus Aspergillus 0.77 Acid penicilic 0.90 ochraceus Penicillium 0.82 Ochratoxine 0.90 cyclopium Penicillium 0.83 Ochratoxine 0.90 viridicatum Penicillium citrinum 0.80 Citrina 0.88 Penicillium martensii 0.79 Acid penicilic 0.99 Se observ c majoritatea mucegaiurilor se dezvolt plecnd de la valori ale aw-0.7. n general sunt rare cazurile n care anumite mucegaiuri germineaz la valori ale aw cuprinse ntre 0.6 i 0.7. Totui producia de micotoxine este nul sau foarte sczut la valori ale aw mai mici de 0.85, iar creterea mucegaiurilor toxicogene se poate realiza ntr-un interval al aw cuprins ntre 0.70-0.85. c) Tensiunea superficiala - microorganismele sunt influenate de tensiunea superficial a mediului n care se gsesc. Substanele care coboar tensiunea superficial ntrzie sau mpiedic dezvoltarea mucegaiurilor, aceste substane pot s aib, de asemenea, influen asupra morfologiei i sporulrii.

d) Presiunea osmotica - presiunea osmotic poate provoca modificri brute ale structurii celulare (plasmoliza, turgescena) i modificri ale morfologiei microorganismelor. Mucegaiurile sunt microorganisme osmofile (se pot dezvolta pe medii cu presiune osmotic mare) i din acest motiv, ele pot altera produsele alimentare care conin o cantitate mare de zahr (miere, dulcea, etc.). Ele se pot dezvolta pe produse care conin max. 70% zahr. e) Lumina - aciunea luminii depinde de specia microorganismelor. n general se poate spune c lumina este duntoare mucegaiurilor. Aciunea vtmtoare a luminii crete cu scderea luminii de und a razelor luminoase. Din spectrul luminos cele mai vtmtoare sunt razele violete, iar din spectrul invizibil, radiaiile ultraviolete. Aciunea duntoare a razelor ultraviolete depinde de intensitatea i durata lor de aciune asupra mucegaiurilor, acestea putnd fi mpiedicate sau oprite din activitatea lor, ori complet distruse. Cnd aciunea luminii se exercit asupra unei culturi i nu numai asupra unui singur microorganism, se deosebete alturi de aciunea direct, i aciunea indirect asupra mediului de cultur. Astfel, n mediile de cultur care au fost expuse la lumin solar sau la radiaiile UV, s-a gsit ntotdeauna ap oxigenat, rezultat din oxidarea apei, oxidare produs de raze, care constituie un toxic pentru microorganism. Prin urmare, aciunea luminii asupra microorganismului, se exercit fie direct, asupra celulei nsi, fie indirect, prin producerea apei oxigenate. 2.5 Influena factorilor intrinseci asupra micotoxinelor

a) Natura substratului -in general, substratul optim este cel glucidic. Mucegaiurile nu sunt exigente din punct de nutriional, ele hrnindu-se cu micro i macro elementele care exist n substratul unde se dezvolta. b) Influenta pH-ului asupra dezvoltarii mucegaiurilor-aciunea pHului asupra creterii microorganismelor se situeaz la trei nivele: 1. mediu 2. permeabilitatea membranei 3. activitatea metabolic Aciunea pH-ului este legat de conservatorii sau inhibitorii familiei acizilor organici, acizi slabi. Mucegaiurile suport un interval mare de valori ale pHului 2.5-7.5, suportnd mai bine un mediu acid dect unul alcalin. Este bine

de specificat faptul c mucegaiurile pot modifica pH-ul, folosind ca surs acizii organici ai alimentelor. c) Bacteriile - Barrios si colaboratorii (1996) au artat c inocularea bacteriilor lactice cu trei zile naintea inoculrii lui Aspergillus parasiticus provoac o diminuare a creterii i produciei de micotoxine. Acest fenomen are un efect de competiie pentru substrat i pH. d) Microflora - Aziz N.H. si colaboratorii au studiat efectul microflorei netoxice a porumbului n producia de aflatoxine de ctre Aspergillus flavus. Au artat c Tricoderma viride inhib creterea mucegaiului i reduce sau anuleaz producia de aflatoxin B1 chiar dac boabele de porumb au fost sau nu sterilizate. Dac inocularea lui Tricoderma viride este ulterioar inoculrii lui Aspergillus, nivelul de aflatoxin B1 se diminuiaz semnificativ. Aceast diminuare atinge cam 31%. Efectul microflorei acioneaz asupra acumulrii toxinelor. n termen ecologic, exist o competiie pentru substraturi: doar sursele foarte competitive i care posed un vast spectru de substraturi metabolizabile se dezvolt. n plus, anumite surse pot degrada micotoxinele. Un efect inhibitor al microflorei spontane a fost de asemenea demonstrat de ONeil K.si col. (1996). Analiznd producia de trichotecine i zearalenon de Fusarium culmorum pe porumb, ei au artat ca pe boabele sterilizate prin nclzire sau radiaii, cantitatea de micotoxin este superioar fa de cea prezent pe grnele nesterilizate.Aceast diferen apare deoarece n primul caz substratul este lipsit de microorganisme, flora spontan fiind prezent n cel de al doilea caz. Marin si colaboratorii (1998) au studiat influena unei flore competitive n creterea i producia de fumonisine de ctre Fusarium moniliforme i Fusarium proliferatum. La o temperatur de 15-25C i o valoare a aw de 0.98, colonizarea mediului de ctre cele 2 specii de Fusarium este mult mai mic dect Aspergillus flavus i Aspergillus ochraceus, dar n acelai timp, producia de fumonisine este stimulat de aceste dou mucegaiuri. e) Insectele -insectele intervin indirect n producia de aflatoxine, ele fiind vectorii sporilor. n plus, insectele ptrund n zonele interioare ale grnelor prin rnile pe care le produc. Contaminarea dup recoltare a alunelor i porumbului cu Aspergillus flavus este corelat cu un atac al insectele. Acestea pot fi prezente n spaiile de depozitare crend o

contaminare important i n consecin constituie o cauz a prezenei micotoxinelor.

2.6

Efecte asupra animalelor i omului

Consecinele consumului de alimente contaminate cu aflatoxin asupra sntii omului sunt estimate indirect pe baza efectului observat la animale. Ingestia n timp scurt a unei cantiti mari de aflatoxine duce la apariia unei intoxicaii acute. Aflatoxicoza acut se poate manifesta prin hemoragii, insuficien hepatic acut i chiar moartea. Doza mortal difer de la animal la animal i depinde de muli factori cum ar fi cantitatea de aflatoxin ingerat, vrsta animalului, starea de sntate i starea de nutriie. Consumul unei cantiti mai mici, dar timp mai ndelungat, duce la apariia intoxicaiei cronice. Efectele i simptomele sunt n general greu de pus n eviden att din cauza intensitii reduse, dar mai ales din cauza caracterului lor nespecific. Aflatoxicoza cronic trebuie suspectat cnd n lipsa altor cauze evidente, animalele au tulburri digestive persistente nsoite de cretere anevoioas n greutate. Consumul de alimente contaminate cu micotoxine poate avea urmri severe, cum ar fi ciroza i carcinomul hepatic o form particular de boal canceroas a ficatului. Studiile epidemiologice efectuate n India i n unele ri din Africa au artat o asociere ntre consumul de alimente contaminate cu aflatoxine i creterea incidenei cancerului de ficat. Micotoxinele pot ajunge n organismul uman nu numai prin consumul de cereale sau produse alimentare preparate din cereale sau semine contaminate ci i prin consumul de lapte, carne sau ou provenite de la animale hrnite cu furaje contaminate. 2.7 Patologie

Expunerea la nivel nalt la aflatoxin poate produce o necroz hepatic acut, care rezult, mai trziu, n ciroz, sau carcinom hepatic. Insuficien hepatic acut se manifest prin hemoragie, edem, modificri n digestie i absorbie sau in metabolismul substanelor nutritive i modificri psihice sau chiar com.

Nicio specie de animale nu este imuna la efectele toxice acute ale aflatoxinelor inclusiv oamenii; cu toate acestea, oamenii au o toleran extraordinar de mare la expunerea cu aflatoxin i rareori evita producerea aflatoxicozei acuta.

Expunerea subclinica, cronica nu duce la fel de dramatic la simptomele aflatoxicozei acut. Copiii, cu toate acestea, sunt deosebit de afectati de expunerea la aflatoxin, care duce la o cretere pipernicita i la o dezvoltare ntrziat. Expunerea cronica, de asemenea, prezinta un risc ridicat de a dezvolta cancer hepatic, sub form de metabolit, aflatoxina poate intercala n ADN-ul i bazele de alchilat prin fraciunea epoxidic a sa . S-a constatat ca acest lucru poate provoca mutaii ale genei p53, o gena importanta n prevenirea avansarii ciclului celular, atunci cnd exist mutatii in ADN, sau semnalizari de apoptoza. Aflatoxina acioneaz ca mutagen, nu numai mutatii ADN n mod aleatoriu, dar n mod special mutatii ale genei p53 la baza 249 pentru a provoca tumori hepatice (249 este un reziduu de arginin, prin urmare, extrem de important pentru a interaciona cu ADN-ul. Uoare mutaii care afecteaz relaia dintre Arginina pozitiva i ADN negativ pot afecta grav efectele suprimarii tumorii a p53 i rolul su n apoptoza). Cercetarile medicale indic faptul c o diet obinuit, inclusiv cea bogata in legume, cum ar fi morcovi, pstrnac, elin i ptrunjel, reduce efectele cancerigene ale aflatoxinei. 2.8 Microbiologie

Aflatoxinele sunt nca recunoscute ca fiind cele mai importante micotoxine. Acestea sunt sintetizate numai de anumite specii de Aspergillus dintre care A. Flavus si A. Parasiticus sunt cele mai problematice. Expresia bolilor legate de aflatoxina este influentata de factori precum vrsta, hrana, sexul, specia si posibilitatea expunerii concurente la alte toxine. La mamifere principalul organ tinta este ficatul, deci aflatoxicoza este in principal o boala hepatica. Conditiile de crestere a riscului de aflatoxicoza la om include disponibilitatea limitata a produselor alimentare, conditiile de mediu care favorizeaza cresterea mucegaiului pe produsele alimentare, precum si lipsa sistemelor de reglementare pentru monitorizarea si controlul aflatoxinei .

A. Flavus si A. Parasiticus sunt tipare sarace care cresc pe un numar mare de substraturi, n special n conditii de umiditate ridicata. Aflatoxinele au fost izolate din toate recoltele de cereale majore, precum si din alte surse diverse, cum ar fi untul de arahide si marijuana. Produsele de baza ,n general, contaminate cu aflatoxine includ cassava, ardei, porumb, seminte de bumbac, mei, alune, orez, sorg, seminte de floarea soarelui, nuci de copac, de gru, si o varietate de condimente destinate pentru uz alimentar uman sau animal. Cnd sunt prelucrate, aflatoxinele intra ,n general, in suplimentele alimentare n cazul n care acestea au fost gasite n ambele alimente atat pentru animale de companie cat si umane, precum si n materii prime pentru animale agricole. Podusele transformate de Aflatoxina sunt uneori gasite n oua, produse lactate si in carne atunci cnd animalele sunt hranite cu cereale contaminate. 2.9 Animalele non-umane

Aflatoxina poate duce la boli de ficat la cini; cu toate acestea, nu toti cinii expusi la aflatoxina vor dezvolta boli hepatice. Ca si n orice expunere toxica, dezvoltarea aflatoxicozei este un eveniment de doza. Unii cini care sunt predispusi sa dezvolte boli de ficat se vor recupera, iar cei expusi la doze mari pentru perioade lungi de timp nu se vor mai putea vindeca. Nivelurile scazute de expunere al aflatoxinei necesita consum continuu pentru cteva saptamni sau luni pentru ca semnele de disfunctie hepatica sa apara. Unele articole au sugerat ca nivelul toxic din produsele alimentare de cine este de 100-300 ppb si necesita o expunere continua si un consum constant pentru cteva saptamani sau luni pentru a dezvolta aflatoxicoza . Nu exista informatii disponibile care sa sugereze ca, cinii recuperati vor reactiona din nou mai trziu la o boala aflatoxina-indusa. Nu exista antidot specific pentru aflatoxicoza. Ingrijirea sistematica si sustinatoare a fost adaptata la severitatea bolii hepatice si poate include fluide intravenoase cu dextroza, vitamina K activa, vitamine din complexul B, si restrnsa, dar de inalta calitate, o dieta bazata pe proteine cu continutul de carbohidrati adecvat. La 20 decembrie 2005, Diamond pet food a descoperit aflatoxina ntrun produs fabricat la facilitatea lor n Gaston, Carolina de Sud . Diamond a amintit n mod voluntar n 23 de state 19 produse formulate cu porumb si

fabricate n instalatia de Gaston. Testarea a mai mult de 2.700 de esantioane de produs finit efectuate de catre laboratoare a confirmat faptul ca doar doua coduri pe data cu formula pentru caine adult Best by cu datele de 3 aprilie, 4 aprilie, 5 aprilie si aprilie 11 au fost potential toxice.

2.10 Pragul de risc Susceptibilitatea omului la aflatoxin nu este foarte bine cunoscut datorit raritii cazurilor. Date estimative cu privire la doza de risc pentru oameni au fost obinute cu ocazia unor intoxicaii colective izbucnite, una n India n 1974 n cursul creia au fost afectate aproape 400 de persoane din care o treime au murit, i alta n Kenia n 1982, unde au fost spitalizate 20 de persoane dintre care au decedat 12. Investigaiile din aceste focare de aflatoxicoz au dus la concluzia c ele s-au datorat ingestiei repetate a unei cantiti de 38-55 micrograme de aflatoxin / kg corp, mai multe zile la rnd. Studiul unui caz individual interesant, o persoan care a ncercat s se sinucid prin ingestie repetat de aflatoxin, a dus la concluzia c, administrarea unei doze de 12 micrograme / kg corp, timp de mai multe zile la rnd, produce greuri i dureri de cap, fr alte consecine mai grave. Examenul medical efectuat dup 14 de la tentativa de sinucidere nereuit, a artat c intoxicaia nu a avut efecte negative serioase nici pe termen lung. 2.11 Prezenta Aflatoxinelor n diverse produse alimentare a. Aflatoxinele n cereale Aflatoxinele au fost puse n evidenta n pine, produse de panificatie, crupe de porumb si n unele tipuri de pine dietetica. Porumbul recoltndu-se la o umiditate ridicata poate favoriza aparitia mucegaiurilor (Aspergillus flavus) chiar nca din cmp. Orezul poate fi contaminat cu micotoxine, inclusiv aflatoxine, dar prin autoclavare aflatoxinele sunt inactivate. Este de remarcat faptul ca fermentarea aluatului reduce n mica masura cantitatea de aflatoxine, coacerea nu are nici un efect asupra lor, dar adaosul n aluat de substante oxidante ( tipul bromatilor) pot determina reduceri importante n aflatoxine.

b. Aflatoxinele n seminte oleaginoase si n ulei Si semintele oleaginoase (arahidele etc.) pot fi atacate de mucegaiuri (inclusiv Aspergillus flavus) care dau nastere aflatoxinelor momentele critice fiind recoltarea si depozitarea, conditii de clima, de pastrare etc. Umiditatea arahidelor (apa) n perioade ploioase poate ajunge la 30% recomandndu-se uscarea imediata a acestora pentru a preveni contaminarea cu aflatoxine. La obtinerea uleiului prin presare cantitatea mare de micotoxine ramne n turte, numai 5% trece n ulei, respectiv aflatoxinele din ulei reprezinta 10% din cantitatea existenta n boabe, ceea ce nu reprezinta un pericol mare. Prin prajire la arahide se reduce continutul de substante toxice. Floarea soarelui respectiv semintele sunt si ele mediu bun pentru dezvoltarea aflatoxinelor. Uleiul din seminte de floarea soarelui, contine cantitati mici de aflatoxine, deoarece prin procesul de rafinare, (tratare cu alcali) si filtrare (prin placi de celuloza-azbest) se reduce cantitatea de toxine, iar daca se executa decolorarea n prezenta acidului citric detoxifierea este mai completa.

c. Aflatoxinele din legume si fructe Si pe fructele uscate se pot forma aflatoxine. Zaharul are efect de protectie asupra micotoxinelor, ceea ce a facut ca patulina sa existe si n gemuri. Arahidele mucegaite contin aflatoxine (micotoxine), care au actiune toxica si puternic cancerigena asupra ficatului de aceea, trebuie prenita mucegairea lor. Arahidele rancezite se exclud din alimentatie. d. Aflatoxinele n lapte si produsele lactate Furajele cu continut mare de aflatoxine determina la vaci, prezenta n lapte a unui metabolit al aflatoxinei B1, denumit milktoxin, care este detectat chiar din primele zile de la ingerare, declansnd o degerescenta a celulelor ficatului. Cantitatea de toxina este mai mare n lapte iarna fata de primavara. Si n laptele praf cercetarile au pus n evidenta existenta unui numar mare de mucegaiuri, ca urmare a depozitarilor n conditii necorespunzatoare. Prezenta Aflatoxinelor n diverse produse alimentare

primavara. Si n laptele praf cercetarile au pus n evidenta existenta unui numar mare de mucegaiuri, ca urmare a depozitarilor n conditii necorespunzatoare. 2.12 Prevenirea micotoxicozelor Experii consider c cea mai eficient metod de evitare a urmrilor micotoxicozelor este prevenirea infestrii cu fungi a culturilor agricole. Msurile de poliie sanitar prevd supravegherea produselor alimentare cu risc de contaminare micotoxic (cereale, nuci etc). Exist numeroase procedee de analiz biochimic a alimentelor cu scopul depistrii micotoxinelor n produsele alimentare. Europa are cel mai riguros sistem de reglementare al prezenei micotoxinelor n alimente i multe dintre rile candidate au o legislaie chiar mai detaliat n ce privete contaminarea cu micotoxine dect rile comunitare. n Romnia, nivelul maxim admis de aflatoxin B1 permis n produsele alimentare este de 5 micrograme / kg. Studiile au artat printre altele c efectul carcinogen se datoreaz unor compui care apar n organism ca urmare a transformrii aflatoxinei, pe parcursul metabolizrii ei. Cercetri fcute de veterinari americani, sugereaz c unii aditivi alimentari cum este BHT (butil-hidroxitoluen, sau E 321) ar putea fi folosii n viitor ca msur de protecie fa de efectele nedorite ale alimentelor contaminate cu aflatoxin.

Cap III
3.0 AFLATOXICOZA Organele tinta: ficatul, rinichii. Altereaza coagulabilitatea sangelui; Inhiba hematopoeza=> anemie; Imunosupresie: ca urmare a actiunii asupra organelor hematopoetice;

SIMPTOMATOLOGIA 3.1 Pasari: ~ mai sensibile decat mamiferele; ~> bobocii de rata, puii de curca,de gaina; Forma acuta: Inapetenta,apatie,stare generala rea,diaree sangvinolenta,tulburari locomotorii,convulsii,opistotonus,pedalari,extensia fortata a membrelor. Forma cronica:Tablou clinic necaracteristic,slabire,icter,diaree,se asociaza cu boli de natura infectioasa sau parazitara,scade productia de oua.

TABLOUL ANATOMOPATOLOGIC Hepatoza,rinichi hemoragici ,degenerescenta renala- ex.marele rinichi alb,hemoragii musculare in muschii pectorali, ai gambei. 3.2 Suine > sensibili: tineretul de 2-14 saptamani;scroafele gestante. Forma acuta: Semne nervoase: ~ inapetenta ~ tremuraturi musculare ~ ataxie ~ excitatie/depresie; Semne respiratorii: ~ dispnee ~ jetaj ~ tuse.

Semne renale: ~ poliurie -> oligurie ~ dureri lombare (nefrita dureroasa sau edem perirenal) ~ avort. !! Moartea in 1-3 zile.

Forma subacuta: ~ inapetenta ~ icter ~ diaree hemoragica, ~ ataxie ~ pareza trenului posterior ~ depresie. Forma subacuta: ~ icter ~ anemie ~ slabire. TABLOUL ANATOMOPATOLOGIC: Forma acuta: ~ steatoza hepatica ~ proliferarea canaliculilor biliari ~ gastroenterita hemoragica. Forma cronica: ~ ciroza hipertrofica granulara ~ ciroza icterigena granulara ~ ciroza atrofica ascitogena.

3.3 Caini Forma acuta: ~ sindrom gastrointestinal acut grav ~ uneori hemoragic ~ ascita. Forma cronica: ~ apatie ~ inapetenta ~ icter

~ diaree ~ anemie. Tabloul anatomopatologic: Hepatomegalie aspect lutos,edemul vezicii biliare,ascita. Histologic: ~ hepatoza grasa, ~ necroza centrolobulara, ~ hiperplazia parenchimului hepatic, ~ proliferarea canaliculilor biliari. 3.4 Taurine: Destul de rezistente > sensibili viteii. Forma acuta Semne digestive: ~ sindrom diareic, tenesme, prolabarea mucoasei rectale. Semne nervoase: ~ apatie ~ tremuraturi musculare ~ bruxism ~ miscari in manej ~ caderi in decubit,

Semne hematologice: ~ diateza hemoragica, ~ cresterea timpului de coagulare ~ scaderea productiei de lapte.

Forma cronica: Icter,scaderea in greutate,ataxie. Ovine - mai rezistente. Pastravi carcinom hepatic.

Om carcinom hepatic.

DIAGNOSTICUL: Diagnosticul diferential: ~ metale grele: Cu, Hg ~ compusi cumarinici ~ alti aspergili; TRATAMENTUL: ~ nu exista tratament specific ~ scoaterea furajelor ~ furaje bogate in proteine si sarace in lipide = favorizeaza vindecarea ~ protectoare hepatice ~ antihemoragice.

Bibliografie:
1. 2. 3. 4. http://ro.wikipedia.org/wiki/Cornul_secarei http://www.safefoodonline.com/Uploads/Aflatoxin_Group.pdf; http://www.ecomagazin.ro/aflatoxine-si-aflatoxicoze/ http://www.forum.santamia.ro/showthread.php/aflatoxina-uncompus-cancerigen-alimentatia-noastr247.html?s=9e3dcf310b79d2aade03c5a78a8edd3a& http://facultate.regielive.ro/referate/merceologie/referat_expertiza_m erceologica_aflatoxina-32676.html http://www.madr.ro/pages/cercetare/contaminare_porumb_cu_aflato xine http://www.unitbv.ro/faculties/medicina/ CLEMANSA TOFAN, Microbiologie alimentar, Editura AGIR, Bucureti

5. 6. 7. 8.

9. http://www.madr.ro/pages/cercetare/contaminare_porumb_cu_aflatoxine. pdf