INFORME DE RESULTADOS DEL EXAMEN PRCTICO

Ciclo Superior de Anlisis y Control de Calidad Mdulo:Ensayos Microbiolgicos FECHA: Del 4/06/2012 al 8/06/2012

Pruebas realizadas: 1.Anlise de agua. a)Muestra A.Recuento de Esporas Clostridium Sulfito Reductores. b)Muestra B.Recuento de Coliformes Fecales(FM) 2.Con cepa de alumno c)Prubeas bioqumicas 3.Reduccin de nitratos. 4.KIA d)Estudio de la movilidad mediante preparacin en gota pendiente. 3)Antibiograma 3.Anlisis de ambientes.

PROGRAMACIN

LUNES(4/06)

MARTES(5/06) MRCORES(6/06)

JUEVES(7/06)

VIERNES(8/06)

Filtracin de membrana Observacin de resultados y expresin Programacin de exames. Prueba bioqumica KIA Observacin de resultados y expresin Prueba bioqumica.Reduccin de nitratos An.de agua: Recuento de esporas de Clostridium Sultito Reductoras Expresin de resultados Observacin a 24h Expresin de resultados

Preparacin gota pendiente Preparacin en caldo M-H Preparacin de AG Realizacin de antibiograma Anlisis de ambiente Expresin de resultados Expresin de resultados

INFORME
1.a)Muestra A.Recuento de Esporas de Clostridium Sulfito Reductoras. -FECHA DE ANLISIS: Del 06/06/2012 al 08/06/2012 -MUESTRA: Muestra de agua del canal de riego cruzando una explotacin ganadera de vacuno debajo de una granja de porcino.La muestra se toma en el centro del canal a unos 50cm de profundidad sin que interfiera el sustrato.Fecha de recogida: da 06/06/2012 a las 07:45am.El transporte al laboratorio se ha realizado dentro de la primera hora desde la recogida y fue mantida refrigerada a 4C hasta realizacin de los ensayos. -OBJETIVO: Determinar la ausencia o no de esporas de Clostridium Sulfito Reductoras en un agua.

-MEDIO DE CULTIVO: Agar SPS -REACTIVOS: No se utilizan en este anlisis -PROCEDIMIENTO: -Da 1: Someter la muestra de agua de 20mL a un choque trmico en un bao a 80C durante 10minutos(tubos boca ancha de 20x25).Aadir el medio agar SPS que mantenemos a 60C en un bao. Incubacin: 37C durante 24h -Da 2: Observacin de resultados a 24h. -Da 3: Expresin de resultados. -EXPRESIN DE RESULTADOS: Presencia de gas Ausencia de esporas de Clostridium Sulfito Reductoras: Menos de 1UFC/20mL de muestra -OBSERVACIONES: No utilic Agar Blanco porque me olvid de pedirlo en la ficha de medios.En lugar de AB utilic aceite de uso alimentario.

1.b) Muestra B. Recuento de Coliformes Fecales(FM). -FECHA: Del 06/06/12 al 07/06/2012 -MUESTRA: Agua embotellada destinada a consumo humano -OBJETIVO: Determinar si la muestra contiene microorganismos contaminantes mediante la tcnica filtracin por membrana.De existir, hacer un recuento de colonias desarrollada Coliformes Fecales: Subgrupo de los Coliformes Totales.Fermentan la lactosa con produccin de cido y gas en 24-48h en temperaturas entre 44 y 45C. -MEDIOS DE CULTIVO: Agar FC( se aade el aditivo cido roslico) -REACTIVOS: No se utilizan -PROCEDIMIENTO: Referencia al tema 8 del moodle -Da 1(6/06/12): Filtramos 100mL de la muestra utilizando un disco de filtro de membrana estril. Depositamos el filtro en la placa de EMB Incubacin: 44,5C 0,22 C 24h. -Da 2(07/06/2012): Observacin de colonias azules.Recuento de colonias -EXPRESIN DE RESULTADOS: Menos de 1 UFC/100ml de muestra -OBSERVACIONES: En lugar de Agar FC utilizamos EMB El error de que haya tantas colonias puede ser que la muestra no fuera previamente diluda.

2.Pruebas con cepa de alumno 3.Reduccin de nitratos -FECHA: Del 6/06 al 7/06/2012 -CEPA: 3009,Mycobacterium phlei -OBJETIVO: Determinar la capacidad de un organismo de reducir el nitrato en nitritos -MEDIOS DE CULTIVO: Caldo nitrato -REACTIVOS: Reactivo de Griess A y B Zinc -PROCEDIMIENTO: -Da 1: Inocular el caldo nitrato(tubo de 10x15 con campana Durham) con nuestra cepa con una asa curva.Incubar 37C 24h. -Da 2: Aadir al caldo nitrato inoculado 1mL aproximadamente de Reactivo A y luego de Reactivo B.Cambia a color rojo dentro de los 30primeros segundos. -OBSERVACIONES: Deberamos utilizar zinc para determinar si realmente es positivo. -EXPRESIN DE RESULTADOS: No hay presencia de gas Reaccin positiva. 4.KIA -FECHA: Del 6/06 al 7/06/2012 -CEPA:3009,Mycobacterium phlei -OBJETIVO: Determinar la capacidad de un microorganismo para atacar un carbohidrato especfico empleando un medio de crecimiento bsico,con produccin o no de gases junto con la produccin de cido sulfhdrico. -MEDIO DE CULTIVO: Agar hierro de Kliger -REACTIVOS: No se emplean en esta prueba

-PROCEDIMIENTO: -Da 1: Inocular el medio con asa recta por el mtodo de siembra por picadura en el fondo del tubo y siembra por estra en la superficie inclinada. Incubacin a 37C durante 24h -Da 2:Observacin de resultados. -EXPRESIN DE RESULTADOS: cido/cido,gas Utilizacin de lactosa y glucosa.Produccin de gas.

d)Estudio de la movilidad mediante preparacin en gota pendiente. -FECHA: 7/06/2012 -CEPA: 3009,Mycobacterium Phlei -OBJETIVO: Determinar la movilidad caracterstica de la bacteria viva -PROCEDIMIENTO: Echar vaselina por los cuatro bordes del cubreobjetos en un solo lado.Quemar el asa y poner unha gota de agua en el porta.Descargar el cultivo sobre la gota.Se coloca la concavidad hacia abajo y despositar en el cubreobjetos.

-EXPRESIN DE RESULTADOS: La bacteria Mycobacterium phlei tiene movimiento vital.

e).ANTIBIOGRAMA (Tcnica de difusin de Agar o de Kirby-Bauer) -FECHA: Jueves,7/06/2012 -DEFINICIN: Es una prueba en la que se enfrenta la bacteria,inoculada sobre la superficie de un medio slido a una soluin antibitica absorbida en discos de papel de filtro o en pastillas.La ausencia de crecimiento en las inmediaciones del disco crea un halo de inhibicin a su alrededor. -CEPA: Mycobacterium phlei, 3009 -MEDIOS DE CULTIVO: -Caldo de cultivo Mueller-Hinton(M-H) -Agar Mueller-Hinton -REACTIVOS: Discos de celulosa impregnados en diferentes antibiticos. Antibitico Tetraciclina Penicilina Ampicilina [g,U] 30g 10U 10g (mm) 20 No definido 11 Diagnstico R R R I I I S S S

3.Anlisis de ambiente.Investigacin de hongos y levaduras en ambiente de laboratorio -FECHA: Del 7/06 al 8/06/12 -MUESTRA: Ambiente del laboratorio de Microbiologa del instituto. -OBJETIVO: Determinar la presencia de hongos y levaduras en ambiente de laboratorio mediante la tcnica de sedimentacin -MEDIO DE CULTIVO: Agar Saboreaud. -REACTIVOS: No se utilizan en este anlisis. -PROCEDIMIENTO: -Da 1:Fundir el medio(tubo 10x15 ) y emplacar.Dejar la placa en el punto del laboratorio donde se desea realizar la muestra una media hora. Incubacin: 28C durante 24h

-Da 2: Observacin de resultados. -OBSERVACIONES: El medio utilizado fue caldo glucosado. La temperatura de incubacin no era exacta y no se mantuvo el tiempo necesario,unos cuatro o cinco das, de incubacin.El motivo es por falta de tiempo dado que el examen se empez el mircoles y termin el viernes. -EXPRESIN DE RESULTADOS: Para expresar los resultados utilizamos la ecuacin: nUFC/m3=NCx 1000/30x UN Segn da ecuacin el resultados es: nUFC/m3=1x1000/30x 30 =1,1 UFC/m3