CEPHAS CENTRO DE EDUCAO PROFISSIONAL HLIO A.

DE SOUZA

TESTES DE CARACTERIZAO DE CARBOIDRATOS

Curso: Qumica Industrial Componente: Bioqumica Nomes: Lgia Nishiama Theodoro Vernica Garcia

Turno: Noite Professor: Edgard N 19 N 28

Md.: II Data: 02/05/12

Rosemere Aparecida de Arajo N 26

So Jos dos Campos 2012

1. OBJETIVOS

Caracterizao de carboidratos pelo mtodo de reao Molisch e identificao de cetoses e aldoses pelo mtodo de reao de Seliwanoff.

2. INTRODUO TERICA

Os carboidratos perfazem a mais abundante classe de biomolculas da face da Terra. Sua oxidao o principal meio de abastecimento energtico da maioria das clulas no fotossintticas. Alm do suprimento energtico, os carboidratos atuam como elementos estruturais da parede celular e como sinalizadores no organismo. Carboidratos so poliidroxialdedos ou poliidroxicetonas ou substncias que liberam tais compostos por hidrlise. O termo sacardeo derivado do grego sakcharon que significa acar. Por isso, so assim denominados, embora nem todos apresentem sabor adocicado. O termo carboidratos denota hidratos de carbono, designao oriunda da frmula geral (CH2O)n apresentada pela maioria dessas molculas. Podem ser divididos em trs classes principais de acordo com o nmero de ligaes glicosdicas: monossacardeos, oligossacardeos e polissacardes

Os monossacardeos ou simplesmente ose, so carboidratos no polimerizados, que no sofrem hidrlise. Possuem em geral entre trs e sete tomos de carbono. O termo inclui aldoses, cetoses, e vrios derivados, por oxidao, desoxigenao, introduo de outros grupos substituintes, alquilao ou acilao das hidroxilas e ramificaes.

As aldoses possuem o grupo carbonila na extremidade da cadeia de carbono (sendo ento um grupo aldedo) e as cetoses possuem o grupo carbonila num outro carbono, que no numa extremidade (sendo ento um grupo cetona).

possivel distinguir glicdios de outros tipos de compostos explorando a sua reatividade qumica. Os cidos fortes (4 a 6 N a 100 C ou mais concentrados a temperaturas mais baixas) causam a desidratao dos monossacardeos e tambm de oligossacardeos ou polissacardeos devido hidrlise cida das ligaes glicosdicas. As pentoses so convertidas em furfural por ao do cido sulfrico concentrado e as hexoses, em hidroximetilfurfural. Estes aldedos cclicos podem sofrer reaes de condensao com um elevado nmero de fenis e aminas aromticas originando produtos corados. A velocidade de desidratao e a cor do produto formado depende da natureza do acar. possvel identificar tais compostos, atravs dos testes de caracterizao como o de Molisch, do fenol-cido sulfrico, de Seliwanoff, e Bial.

Reao de Molisch Identificao de Carboidratos: O teste de Molisch permite fazer a distino entre um glicdio e um outro

tipo de composto. O H2SO4 concentrado, por uma ao de desidratao sobre os hidratos de carbono, produz compostos que condensam com o -naftol para formar produtos corados. Um teste negativo uma muito boa indicao da ausncia de um hidrato de carbono. Um teste positivo apenas indica a presena provvel de um hidrato de carbono.

Reao de Seliwanoff Reao para distino entre aldoses e cetoses: Este teste permite diferenciar aldoses de cetoses, que sob ao

desidratante de cidos concentrados so transformados em derivados do furfural, que por sua vez se condensam com o resorcinol formando um composto vermelho de composio incerta. A reao com cetoses mais rpida do que com as aldoses permitindo diferenci-los. Este teste especfico para a frutose.

3. MATERIAIS UTILIZADOS E REAGENTES

Tubos de ensaio gua destilada Pipeta de pasteur Soluo de amido 1% Soluo de sacarose 0,1 mol/L Soluo de frutose 0,1 mol/L Soluo de glicose 0,1 mol/L

cido sulfrico concentrado cido clordrico concentrado Alfa-naftol Resorcinol lcool etlico absoluto Bquer Balo volumtrico de 100 mL

4. PROCEDIMENTO Reao de Molisch Identificao de Carboidratos Preparao do reativo: Pese 1,0 g de alfa-naftol em um bquer, transfera para um balo volumtrico de 100 mL e adicione lcool etlico absoluto at completar o menisco. Agite para homogeneizar, rotule a soluo. Prepare cinco tubos de ensaio e coloque 1,0 mL das seguintes solues aquosas de carboidratos em cada tubo: Tubo 1 1,0 mL de gua (branco); Tubo 2 1,0 mL de soluo de amido 1%; Tubo 3 1,0 mL de soluo de sacarose 0,1 mol/L; Tubo 4 1,0 mL de soluo de frutose 0,1 mol/L; Tubo 5 1,0 mL de soluo de glicose 0,1 mol/L. Adicione 1,0 mL do reativo de Molish em todos os tubos e agite. A seguir coloque 2,0 mL de cido sulfrico concentrado (H2SO4) vagarosamente pelas paredes dos tubos sem agitar. Reao de Seliwanoff Identificao de Cetoses Preparao do reativo: Pese 0,5 g de resorcina em um bquer, transfira para um balo volumtrico de 100 mL e adicione lcool etlico absoluto at completar o menisco. Agite para homogeneizar, rotule a soluo. Prepare quatro tubos de ensaio e coloque 1,0 mL das seguintes solues aquosas de carboidratos em cada tubo: Tubo 1 1,0 mL de gua (branco); Tubo 2 1,0 mL de soluo de sacarose 0,1 mol/L; Tubo 3 1,0 mL de soluo de frutose 0,1 mol/L; Tubo 4 1,0 mL de soluo de glicose 0,1 mol/L. Adicione 1,5 mL de cido clordrico concentrado (HCl) e mais 1,0 mL do reativo de Seliwanoff em todos os tubos e agite. Aquea em banho-maria fervente por 15 segundos.

5. RESULTADOS E DISCUSSES Experimento 1 Molisch: Tubo 1 (branco) - Ao adicionar a soluo, o reagente e o cido a cor ficou amarela, mostrando que no havia carboidrato na mistura. Ento ela considerada a prova (branco) para a determinao das outras solues amostras. Nos tubos 2 e 5, formaram-se duas fases: amarela na parte superior e esverdeado na parte inferior com um anel castanho no tubo 1 e um anel avermelhado no tubo 5. Nos tubos 3 e 4 formou-se uma colorao violeta em toda soluo. Nos testes foi verificada a presena de carboidratos em todas as solues, pois todas ficaram com a colorao roxa, alguns mais intensos, outros menos, caracterizando a presena de carboidrato na soluo. Experimento 2 Seliwanoff: Tubo 1 (branco) - Ao adicionar a soluo, o reagente e o cido a cor no alterou, mostrando que no havia carboidrato na mistura. Ento ela considerada a prova (branco) para a determinao das outras solues amostras. Nos tubos 2 e 3, formaram-se uma colorao avermelhada logo de imediato em toda soluo, comprovando a presena de monossacardeos, e por fim determinando o tipo de reao, que foi uma cetose. No tubo 4 no houve reao, determinando o tipo de reao que foi uma aldose. Nesse procedimento 2 inclui-se mais uma soluo amostra (tubo 5) feita com uma amostra a mais de frutose (reagente mais novo) para verificar as diferentes reaes entre o reagente novo dentro do prazo de validade - e o outro com prazo de validade vencido a bastante tempo. Houve uma divergncia entre as duas solues de frutose, pois a mais nova no teve uma reao imediata como a outra soluo (de prazo vencido), foi preciso aquecer um pouco em gua fervente para acontecer a reao. Nesse caso deveria ser o contrrio, pois a concentrao de cetose nessa soluo de frutose deveria ser maior, portanto a reao seria imediata, porm pode haver

variao no produto seco, dependendo do meio em que est, pois a cetose pode virar aldose e vice-versa. Como vimos na Introduo aos Carboidratos, os monossacardeos mais importantes so os formados por cinco ou seis tomos de carbono (pentoses e hexoses, respectivamente). Por serem molculas muito ricas em grupamentos hidroxila (-OH), os monossacardeos podem ser facilmente desidratados por ao de cidos fortes concentrados, como o cido sulfrico (H2SO4). O cido rompe facilmente as ligaes glicosdicas presentes em molculas de polissacardeos, quebrando-os e fornecendo seus monossacardeos. Esses, por sua vez, so desidratados e podemos ter como produto: o furfural, quando o monossacardeo desidratado for uma pentose, e o hidroximetilfurfural (HMF), quando for uma hexose. Tanto o furfural quanto o HMF so substncias incolores, impedindo que a reao seja visualizada. Para resolver esse problema, adiciona-se um composto fenlico ao meio ( alfa-naftol, conhecido como reativo de Molisch). O fenol reage como os produtos incolores, e provoca o aparecimento de um anel de colorao lils.

Vimos que esses dois produtos, isoladamente, so incolores. Assim, adiciona-se um composto fenlico ao meio para que seja desenvolvida colorao visvel (nesse caso, vermelha). A reao de Seliwanoff s diferencia-se da reao de Molisch nos reagentes utilizados: o cido que causar a desidratao do carboidrato o cido clordrico (HCl) e o fenol que reage como o furfural e HMF o resorcinol. Esse teste permite diferenciar aldoses de cetoses porque a reao com a cetose mais rpida e mais intensa. Isso porque a formao do furfural mais fcil que a formao do hidroximetilfurfural.

6. CONCLUSO Concluiu-se que atravs da utilizao do reagente de Molisch com o secante cido sulfrico nas solues amostras, pode-se verificar a presena de carboidrato nas solues. Todas apresentaram um anel ou a colorao violeta como reao final, exceto no branco. Enquanto que o reagente de Seliwanoff permite diferenciar aldoses de cetoses, que sob ao desidratante de cido clordrico so transformados em derivados do furfural, que por sua vez se reage com o resorcinol formando um composto vermelho, indicando a presena de cetose ( tubo 2,3 e 5).

7. BIBLIOGRAFIA JUNIOR, E., F., WILMO, QUIMICA NOVA NA ESCOLA. Disponvel em: <http://www.qnesc.sbq.org.br/online/qnesc29/03-CCD-2907.pdf>. Acessado em: 27 de abril. Testes para identificao de glicdios. Disponvel em:

<https://dspace.ist.utl.pt/bitstream/2295/50842/1/TESTESGLICIDOS_alunos.pdf>. Acessado em: 27 de abril. Caracterizao de carboidratos. Disponvel em:<http://intermed99.vilabol.uol.com.br/bioquimica2.html>. Acessado em: 27 de abril

SANTOS, Janaci, Monossacardeos e Oligossacardeos. UFRPE. Disponvel em: <http://www.ebah.com.br/content/ABAAAAsc0AF/monossacarideosoligossacarideos>. Acessado em: 29 abr 2012.

Caracterizao de carboidratos. Disponvel em: <http://pt.scribd.com/doc/59755459/Caracterizacao-de-carboidratos-123>. Acessado em: 01 mai 2012.