El efecto de la infeccin por Helicobacter pylori en la velocidad de crecimiento en los nios pequeos de las comunidades urbanas pobres en Ecuador

Andrey I. Egorova, 'b, Semperteguib Fernando, c, d, Bertha Estrella b, c, d, Egasc Josefina, e, Elena N. Naumovab'f, Jeffrey K. Griffiths bf INFORMACIN DEL ARTCULO Objetivo: caracterizar los efectos potenciales de las infecciones por Helicobacter en la velocidad de crecimiento en nios con bajo nivel socioeconmico jvenes en un pas en desarrollo. Mtodos: Los nios fueron reclutados en los suburbios pobres de Quito, Ecuador. Normalmente nutridos, moderadamente y sustancialmente los nios desnutridos (que se define utilizando el peso para la edad de las puntuaciones Z en la contratacin) forman capas iguales. Seis medidas de altura y peso fueron recogidos durante un ao. Inscripcin y salir de las muestras de suero fueron analizadas para IgG anti-Helicobacter y salir de las heces diarreicas no la prueba del antgeno de Helicobacter. Resultados: De los 124 participantes (edad de matricularse de 19 9 meses), 76 (61%) de antgeno fecal excretada en la salida (estaba infectado). De stos, 44 eran seropositivos al menos una vez (infecciones crnicas) y 32 seronegativos probado dos veces (las infecciones nuevas o en fase aguda). La velocidad de crecimiento lineal ajustado durante el seguimiento en los nios con las nuevas infecciones se redujo en un 9,7 (3,8, 15,6) mm / ao en comparacin con los controles no infectados y 6,4 (0,0, 12,9) mm / ao en comparacin con los nios con infecciones crnicas. Los efectos de las infecciones por Helicobacter en el crecimiento ponderal no fueron significativas. Conclusin: Estos resultados sugieren que la velocidad de crecimiento lineal se reduce en los nios pequeos durante la fase inicial de la infeccin por Helicobacter. 1. Introduccin Helicobacter pylori es un importante patgeno que puede causar gastritis, lceras gstricas y duodenales, gstricas y cncer.1 Esta bacteria est adaptada exclusivamente a la infeccin crnica por el estmago humano. Se provoca una respuesta de tipo Th1 predominantemente inmunolgico, que puede ser responsable de la gastritis sntomas.2, 3 infecciones suelen propagarse a travs de contactos de persona a persona, pero el agua 2 transmitidas por la transmisin tambin puede occur.4 En los pases en desarrollo, adquirir la mayora de la gente la infeccin a principios de childhood.2, 5 La adquisicin de la infeccin es a menudo seguida de sntomas transitorios gastritis aguda y el cido gstrico secretion.2 deprimida, 6,7 Helicobacter se ha demostrado que altera la absorcin de nutrientes y vitaminas, 8,9 y retardar el crecimiento en los nios en el desarrollo de pases6 ,10-13 Las personas infectadas por Helicobacter excretan antgeno de Helicobacter. Las pruebas de antgenos en heces tiene una excelente sensibilidad y especificidad en comparacin con otras pruebas invasivas de diagnstico en nios.14-18 tambin induce la infeccin por Helicobacter fuertes anticuerpos responses.19 Los experimentos con animales han demostrado que el desarrollo de una respuesta de anticuerpos reduce symptoms.20 gastritis en los seres humanos, IgG seroconversin ocurre varios meses despus de la infection.21, 22 Este lapso de tiempo entre la infeccin y la seroconversin de IgG se ha utilizado para definir las fases agudas (antes de la seroconversin) y crnica (despus de la seroconversin) de infeccin.23-25 Los anticuerpos tambin persisten tras la erradicacin espontnea de Helicobacter, que algunas veces se produce en children.26 El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos de las infecciones pylori tanto crnicos como agudos H. en el crecimiento lineal y ponderal en los nios pequeos ecuatorianos. 2. Mtodos Este estudio prospectivo se est dentro de un estudio ms amplio de los efectos de micronutrientes (vitamina A y / o zinc) la suplementacin en los nios pequeos (manuscrito en revisin). El estudio de los padres se registr en www.ClinicalTrials.gov (NCT00228254). Para que el estudio de los padres, los nios de 6 a 36 meses fueron reclutados en los suburbios pobres de Quito, Ecuador, en las sesiones de reclutamiento de la comunidad en abril-mayo de 2002 y 2003. Peso para la edad y talla para la edad de las puntuaciones de desviacin estndar o Z-score (WAZ y HAZ) se estimaron utilizando los EE.UU. los datos del Centro Nacional de Estadsticas de Salud de referencia. Los nios desnutridos fueron intencionalmente ms de muestra: sustancialmente desnutridos (WAZ <-2), ligeramente mal alimentado (-2 <WAZ <-1), y los nios normalmente criadas (WAZ> 1) forman una tercera parte cada uno de la poblacin de estudio . Nios con desnutricin severa (peso <60% del valor normal ajustado por edad) fueron excluidos del estudio y se refiri a los centros de rehabilitacin nutricional. Despus de la

contratacin, los nios fueron asignados al azar a la intervencin o de los grupos de placebo, y fueron seguidos durante aproximadamente un ao a partir de junio. Este manuscrito presenta los datos recogidos en el grupo placebo. Una encuesta de hogares se llev a cabo en la inscripcin para evaluar demogrficos, socioeconmicos y de higiene. Las enfermeras del estudio visitaron a todos los nios durante el seguimiento cuatro veces por semana para buscar los sntomas respiratorias y diarreicas. Los parmetros de crecimiento se midieron en reclutamiento y aproximadamente cada 10 semanas a partir de entonces, para un total de seis mediciones por nio. Tomaron muestras de sangre de cada nio despus de un ayuno durante la noche a la inscripcin y la salida para medir los niveles de micronutrientes. Todos los aspectos de este estudio anidado fueron aprobados por los comits de tica de la Tufts University School of Medicine de Boston y la Corporacin Ecuatoriana de Biotecnologa en Quito. Separe los consentimientos informados se obtuvieron de los padres o tutores de cada nio participante para el estudio de los padres y el estudio anidado. Restos de las muestras de suero fueron analizadas para anti-Helicobacter respuestas de IgG utilizando kits comerciales de la prueba ELISA obtenidas a partir de IBL Inmuno-laboratorios biolgicos (Hamburgo, Alemania). Estos kits incluyen una microplaca recubierta con una mezcla de protenas purificadas bacterianos que contienen antgenos CagA y VacA, secundaria horserad ISH conjugado con peroxidasa anti-humano solucin de anticuerpo, y un conjunto de normas. Los valores de densidad ptica para anti-Helicobacter respuestas de IgG fueron convertidas en concentraciones unidad arbitraria (U / ml) y dichotomized utilizando una microplaca especfico valores de corte. Al final del seguimiento (salida del estudio), los participantes de este estudio anidado tambin proporcion una diarrea no muestra fecal, que se analiz para antgeno de Helicobacter excreta con un sndwich de anticuerpos monoclonales basados en ELISA (Hp StAR , Dako A / S, Glostrup, Dinamarca). Los resultados Helicobacter fecales de ensayo se clasific en el valor de densidad ptica de 0,15 segn las instrucciones del fabricante. Todas las pruebas de laboratorio se llevaron a cabo en la Universidad Catlica del Ecuador (Pontificia Universidad Catlica del Ecuador) en Quito. Se recogieron muestras de los hogares por enfermeras del estudio, entregado al laboratorio en contenedores refrigerados, y se almacen a -20 C hasta su anlisis. Los nios fueron clasificados como infectados o no infectados sobre la base de los resultados de su prueba de antgeno de heces. Los nios infectados fueron clasificadas en base a su serologa como tener (1) infecciones crnicas (dieron un resultado positivo en la inscripcin y / o salida) o (2) nuevos o infecciones agudas de las fases (seronegativos y probado dos veces). Los datos fueron analizados con el programa SAS v 9.2 (SAS Institute, Cary, NC, EE.UU.). Factores de riesgo demogrficos y socioeconmicos de la infeccin Helicobacter-ter se analizaron mediante regresin logstica. Los datos sobre el crecimiento durante el seguimiento se analizaron mediante modelos de regresin mixtos de efectos mediante procedimiento de SAS GLIMMIX. 3. Resultados Slo los nios del grupo placebo que presentaron sus no-diarreicas muestras fecales a la salida del estudio se incluyeron en este anlisis (N = 124). De ellos, 26 nios representaron en el 2002 2003 cohorte de este estudio los padres y 98 nios representaron la cohorte 2003-2004 (20% y 71%, respectivamente, del brazo de placebo de cada cohorte). El desglose de la poblacin estudiada por gnero, los estratos del estado nutricional y el estado de la infeccin por Helicobacter se presentan en la Tabla 1. La edad al momento del reclutamiento vari de 4,6 a 35,7 meses, la media desviacin estndar de 19,0 8,5 meses. La duracin media cin de seguimiento (intervalo entre la primera y la ltima medicin antropo-mtrica) fue de 388 das, la desviacin estndar de 26 das, rango de 277-413 das. La edad media a la salida de estudio fue de 31,8 meses. Normalmente los nios desnutridos fueron, en promedio, ms joven que los nios desnutridos considerablemente, mientras que los nios que no estaban infectados y los nios que tenan infecciones de fase aguda fueron, en promedio, ms joven que los nios con infecciones en fase crnica (Tabla 1). Setenta y seis (61%) participantes en el estudio estaban infectados con H. pylori (antgeno excretado) en la salida del estudio (infecciones agudas y crnicas combinados). Un desglose detallado de la poblacin de estudio por el estado de la infeccin y la serologa se presentan en la Tabla 2. Entre los 44 nios que fueron clasificados como una infeccin crnica, 41 (93%) eran seropositivos en la salida. Entre los 48 nios que no estaban infectadas con Helicobacter, slo cuatro (8%) eran seropositivos en la salida. Las tasas de prevalencia de la infeccin por Helicobacter en la salida de estudio fue de 73% en sustancial desnutricin, el 47% de desnutricin leve, y el 67% de los nios normalmente nutridos. Aunque las probabilidades de infeccin en los nios desnutridos moderadamente fueron significativamente menores que en los controles que normalmente nutridos (p = 0,03), el patrn

incompatible con una mayor probabilidad de infeccin en nios desnutridos sustancial sugiere que esta asociacin observada se debi a un efecto aleatorio. Condiciones de hacinamiento (tres o ms personas por habitacin) era el nico indicador socioeconmico asociado con la infeccin por Helicobacter (examen de heces positivo) en el anlisis de regresin logstica: odds ratio 2,67 (IC del 95% intervalo de confianza (IC) del 1,04, 6,91, p = 0,04), el ajuste para los estratos del estado nutricional y la edad. Anlisis preliminar de regresin mixta efecto en la etapa de desarrollo del modelo ha demostrado que las velocidades de crecimiento ajustados durante el seguimiento fueron similares en los tres estratos del estado nutricional. Por lo tanto, los trminos de interaccin entre el estado nutricional y el tiempo no se incluyeron en el modelo final. Los episodios de diarrea o enfermedades respiratorias durante el seguimiento, as como las condiciones de hacinamiento, no se asociaron significativamente con el crecimiento de velocidad. Por lo tanto, estas variables tampoco se incluyeron en el modelo final. Altura a la inscripcin y la velocidad de crecimiento en los nios que dieron positivo, al menos una vez, pero tuvo resultado negativo de antgeno fecal en la salida (erradicar la infeccin por Helicobacter) no difiri significativamente o sustancialmente de las de los nios que tenan todas las pruebas de heces y serolgica negativa (p> 0,5 para ambas pruebas). Esto confirm que la inclusin de todas las pruebas fecales negativos-los nios en el grupo de control, independientemente de su estado serolgico era apropiado. El modelo final de efectos mixtos para el crecimiento lineal incluy los efectos aleatorios para intercepcin, la edad y edad al cuadrado. Los efectos principales se presentan en la Tabla 3. El efecto no lineal de la edad en el crecimiento lineal se model utilizando un polinomio cbico. Las variables de indicador de gnero y los estratos del estado nutricional se utiliza para modelar los efectos de estos parmetros en la altura a la inscripcin. Las nias fueron significativamente ms corto y ms ligero que los nios, los nios desnutridos sustancialmente empobrecidas y desnutridas leve fue significativamente ms corto y ms ligero que los nios normalmente nutridos. Las previsiones de la velocidad media de crecimiento lineal en nios que tenan 19 meses de edad al ingreso (promedio de edad de los participantes) y se mantuvo libre de infecciones por Helicobacter (todas las pruebas negativo) fue de 96 mm / ao. Para modelar los efectos de las infecciones por Helicobacter en la velocidad de crecimiento, el modelo de regresin contiene dos trminos de interaccin entre variables indicadoras para los nuevos y crnicas Helicobacter Bacter las infecciones y las variables continuas de tiempo de inscribirse cin. Ajustada por edad, la velocidad de crecimiento durante el seguimiento se redujo en los nios con nuevas infecciones por Helicobacter un 9,7 (IC 95% 3,8, 15,6) mm / ao, en comparacin con los controles, mientras que el efecto de las infecciones crnicas era dbil y no significativa (Tabla 3) . Un anlisis ms detallado (no se muestra en la Tabla 3) demostraron que la edad ajustada a la velocidad de crecimiento en los nios seronegativos infectados (nuevas infecciones) se redujo en un 6,4 (IC 95% 0,0, 12,9) mm / ao (p = 0,05) en comparacin con los nios infectados (seropositivos infecciones crnicas). En el anlisis de regresin estratificada, los efectos perjudiciales ajustados de nuevas infecciones por Helicobacter en la velocidad de crecimiento fue muy similar en nios y nias, 10.5 (IC 95%: -0,9; 21,9) mm / ao y 9,0 (IC 95%: 2,2, 20,1) mm / ao, respectivamente. Los efectos sobre el crecimiento de Helicobacter ponderal se analizaron mediante modelos mixtos de regresin similares efectos (excepto el efecto de la edad se model utilizando un polinomio de segundo grado). Los efectos perjudiciales de la ajustados en funcin de las nuevas infecciones por Helicobacter y crnicos en la velocidad de crecimiento ponderal eran pequeas y no significativas, 53 (IC del 95% -147, 253) g / ao (p = 0,6) y 10 (IC del 95% -173, 193) g / ao (p = 0,9), respectivamente. 4. Discusin El principal hallazgo de este estudio fue que las nuevas infecciones por Helicobacter definido como positivo de la prueba del antgeno fecal y serologa negativa se asocia con la reduccin del crecimiento lineal en nios pequeos. El dficit estimado en la velocidad de crecimiento promedio durante un ao de seguimiento en nios con infecciones nuevas en comparacin con los controles no infectados era casi de 10 mm / ao, que se traduce en aproximadamente un 10% ms lento el crecimiento lineal. No hubo evidencia de la recuperacin del crecimiento en nios con infeccin crnica por Helicobacter. Estos resultados muestran que las infecciones por Helicobacter contribuido sustancialmente al dficit de crecimiento pronunciado en los jvenes nios y nias ecuatorianas de vecinos pobres de las ciudades campanas. El hallazgo de este estudio est de acuerdo con investigaciones anteriores en Colombia, que tambin ha demostrado el efecto perjudicial de la infeccin por Helicobacter en el crecimiento de tener la razn ms pronunciada despus de la infeccin.13 Se podra especular que la infeccin crnica se asocia con un patrn diferente de la inflamacin gstrica que se no causa un efecto perjudicial sobre el crecimiento en nios. Seroconversin de la IgG, que se produce varios meses despus de la infeccin en los nios, puede servir como un biomarcador de la transicin a la fase crnica de la infeccin. Akhiani et al.20 demostraron que el desarrollo de una respuesta de anticuerpos anti-Helicobacter se asocia con disminucin de la inflamacin gstrica, pero la colonizacin mejorada en modelos animales y especul que el anti-Helicobacter bacteriemia anticuerpos puede facilitar la persistencia de este patgeno.

El efecto perjudicial de la nueva infeccin por Helicobacter en la velocidad de crecimiento lineal en estos nios ecuatorianos fue casi el doble de 5 mm / ao efecto observado previamente en Colombia nios.11 Esta discrepancia puede explicarse por diferentes poblaciones de origen y, al menos en parte, un muestreo aleatorio efecto. El efecto sobre el crecimiento de Helicobacter ponderal en estos nios ecuatorianos era pequea y no significativa, lo cual es consistente con los resultados de investigaciones previas en Colombia.11, 13 Este estudio utiliz un anticuerpo monoclonal del antgeno fecal prueba de ELISA para la deteccin de infecciones por Helicobacter y pruebas serolgicas de ELISA IgG de clasificar las infecciones como la nueva (serologa negativa) o crnica (serologa positiva), utilizando una clasificacin de la infeccin previamente desarrollado scheme.22-24 Se ha demostrado previamente que la Hp StAR anticuerpo monoclonal prueba de ELISA para antgeno de Helicobacter fecal puede ser utilizado como un indicador fiable de la infeccin por Helicobacter en los nios, ya que se compara muy bien con pruebas diagnsticas invasivas, as como el test del aliento con urea-13C, con una sensibilidad que va desde el 94,4% al 98,2% y una especificidad del 94,7% a 98,1%, segn La tasa de prevalencia del 61% de las infecciones por Helicobacter en estos nios y nias ecuatorianas segn lo determine la StAR Hp prueba del antgeno fecal es similar a la tasa de prevalencia del 53% en nios colombianos de 2 aos de edad, segn lo determinado por la prueba del aliento con urea-13C, 5, pero superiores a la tasa de prevalencia del 23% reportado en otro grupo de nios colombianos que se encontraban, en promedio, de aproximadamente 4 aos de age.11 Una limitacin de este estudio fue la falta de pruebas de antgenos en heces Helicobacter momento de la inscripcin. Esto no permite una evaluacin ms precisa del tiempo de la infeccin por Helicobacter y la duracin de sus efectos sobre el crecimiento. Por otra parte, los episodios graves de diarrea en los participantes del estudio fueron tratados con antibiticos, alterando la historia natural del episodio. Por lo tanto, la falta de asociacin entre los episodios de diarrea y el crecimiento no pueden ser generalizables a la poblacin de origen de bajo nivel socioeconmico los nios ecuatorianos. Las fortalezas de este estudio incluyen la recopilacin de datos detallados del crecimiento y el empleo de una poblacin de origen socioeconmico homogneo. Los resultados de este estudio proporcionan una evidencia ms de perjudiciales efectos sobre el desarrollo de Helicobacter en los nios pequeos que viven en malas condiciones econmicas.