Lisis celular asociada a la pared y membranas celulares

LA PARED BACTERIANA
Las cubiertas que rodean la clula se han identificado por medio de tcnicas de tincin y tcnicas de aislamiento y caracterizacin bioqumica de los componentes celulares.

Las principales cubiertas son: cpsulas y limos la pared celular de las bacterias Gram-positivas la pared celular de las bacterias Gram-negativas la membrana plasmtica los mesosomas (invaginacin de la membrana plasmtica)

La relacin topogrfica entre la pared celular y la membrana plasmtica se observa en esta micrografa electrnica.

A. Microfotografa electrnica de la bacteria Gram positiva Micrococcus lysodeikticus mostrando la gruesa capa de peptidoglicano que conforma la pared celular (cw), por debajo de ella la membrana plasmtica (cm), un mesosoma(m), y el nucleoide (n). B. Clula bacteriana procesada mostrando la lnea de fractura entre la membrana citoplasmtica (m.i.) y la pared celular (m.e.). Barra = 1 m.

--Gram + --Gram -

Pared celular de peptidoglicanos

-Forma caracterstica -Provee proteccin mecnica

Dos grupos de bacterias carecen de pared celular: los Mycoplasma que poseen solamente membrana celular las formas L derivadas de bacterias que perdieron su habilidad de sintetizar su pared celular

LISIS
El mecanismo de lisis es el siguiente: La destruccin de la pared celular deja al protoplasma de las bacterias rodeado nicamente por la membrana celular ("protoplasto"), lo cual convierte a la bacteria en un organismo extraordinariamente sensible a las variaciones de tonicidad del medio, esta es la base del fenmeno de aclaracin que tiene lugar luego de la accin de la lisozima, cuando la solucin es hipotnica.

INTERS BIOTECNOLGICO

Extracelulares Intracelulares

Operacin untara
La lisis celular

Seleccin de lisis

Tipo de metabolito
Cuando son intracelulares

Tipos de lisis

Mtodos de lisis

Mecnicos

Qumicos

Choque osmtico Molinos de perlas Homogenizacin Enzimas Tratamiento alcalino Disolucin lipdica

Digestin enzimtica
Fundamento: Digestin de la pared celular Ejemplo:
Lisozima Rompen enlaces cido- acetimurmico y Nacetil glucosamina

Sin embargo las bacterias Gram son mas sensibles a otros mtodos de lisis como los molinos de perlas por su membrana externa.

Choque osmtico
Ruptura de la membrana

Disolucin lipdica
Que es?

Mtodo qumico por el cual se desestabiliza la pared celular por solventes orgnicos.

Fundamento

El solvente es absorbido por los lpidos de la pared celular , lo que produce la expansin y la ruptura de esta.

Tcnica

El volumen de solvente que sea agrega es aproximadamente igual al 10% de la biomasa .

METODOS MECANICOS

MOLINOS DE PERLAS
MOLIDO EN MOLINO DE PERLAS
Fundamento Las clulas son prensadas entre perlas de vidrio En donde se aplica Tratamiento de suspensiones celulares a gran escala

Homogenizador

Sistemas celulares de secrecin

Estructura de pared celular

Fundamentos para seleccin de lisis

Mtodos de rompimiento celular

permeabilizacin