CULTIVO DE MICROORGANISMOS

PRESENTA: VIDAL DIONICIO VICTOR MANUEL

O Se le llama cultivo al proceso de multiplicar

microorganismos mediante las condiciones ambientales adecuadas.

O Los microorganismos en

crecimiento realizan copias de si mismos y requieren los elementos que se encuentran en su composicin qumica.
O Los factores que se debe

controlar durante el crecimiento son nutrientes , pH , temperatura, aireacin, concentracin de sales y potencial inico del medio.

REQUERIMIENTOS PARA EL CRECIMIENTO.

O La mayor parte del peso seco de los

microorganismos consiste en materia orgnica que contiene: -Carbono -hidrgeno - nitrgeno -Oxigeno -fsforo - azufre. O Adems se requieren iones inorgnicos como potasio, sodio, hierro, magnesio, calcio y cloro para facilitar la catlisis enzimtica y conservar los gradientes qumicos a travs de la membrana clular.

O Para poder crecer un microorganismo se

requieren todos los elementos contenidos en su materia orgnica y el complemento total de iones necesarios para la produccin de energa y catlisis. O Adems debe haber una fuente de energa que establezca la fuerza motriz protnica y que permita la sntesis macromolecular. O Los microorganismos varan ampliamente en cuanto a sus demandas nutricionales y sus fuentes de energa metablica.

FUENTE DE ENERGA METABOLICA

O Los tres mecanismos principales para

ganar energa metablica son fermentacin, respiracin y fotosntesis. Para poder crecer. El microorganismo debe utilizar por lo menos uno de los mecanismos.

FERMENTACIN
O La formacin de ATP durante la

fermentacin no est acoplada a la transferencia de electrones. La fermentacin se caracteriza por la fosforilacin del sustrato, proceso enzimtico en el cual un intermediario metablico fosforilado sona un enlace pirofosfato directamente al ADP (difosfato de adenosina)

RESPIRACIN
O La respiracin es anloga al acoplamiento

de un proceso dependiente de energa de una batera. La reduccin qumica de un oxidante (aceptor de electrones) a lo largo de una serie especfica de portadores de electrones en la membrana bacteriana. El agente reductor (donador de electrones) puede ser orgnico o inorgnico.

FOSFOSNTESIS
O La fotosntesis es similar a la respiracin en que la

reduccin de un oxidante por medio de una serie de portadores de electrones es lo que establece la fuerza motriz protnica. La diferencia entre ambos procesos como el oxidante se crean foto qumicamente por medio de la energa luminosa absorbida por pigmentos en la membrana: en consecuencia, la fotosntesis puede proseguir slo en tanto haya una fuente de energa lumnica. Las plastas y algunas bacterias son capaces de decidir una cantidad importante de la energa lumnica para hacer del agua un reductor del oxigeno y se produce materia orgnica.

O La respiracin que produce energa

atravz de la oxigenacin de materia orgnica mediante un aceptor de electrones como el oxgeno puede proporcionar energa a los microrganismos fotosintticos sin luz.

NUTRICIN
O Los nutrientes en el medio de cultivo

deben contener todos los elementos necesarios para la sntesis biolgica de nuevos microorganismos. En la descripcin subsecuente se clasifican segn los elementos que aportan.

TEMPERATURA
O Diferentes especies microbianas varan

ampliamente respecto de las fluctuaciones de la temperatura ptima para su desarrollo: O Las formas psicrfilas crecen mejor a temperaturas bajas (15 a 20) O Las mesfilas lo hacen mejor de 30 a 37 y la mejor parte de los termfilos crecen mejor de 50 a 60C.

O Casi todos los microorganismos son mes

filos: O 30C es la temperatura ptima para muchas de las formas de vida libre y la temperatura del husped es ptima para los simbiontes de los animales de sangre caliente. O El limite superior de temperatura tolerada por cualquier especie se correlaciona bien con la estabilidad trmica general de las protenas de dicha especie.

MTODOS DE CULTIVO
O Se consideran dos problemas: la eleccin

de un medio adecuado y el aislamiento de un microorganismo bacteriano en cultivo puro.

ESTERILIDAD DEL MEDIO

O Todos los medios de cultivo han de estar

perfectamente estriles para evitar la aparicin de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de los especmenes inoculados en dichos medios. El sistema clsico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de agua a presin como agente esterilizante)

EL MEDIO
O La tcnica usada el tipo de medio

seleccionado dependen de la naturaleza de la investigacin. En general, pueden presentarse tres situaciones: O 1).- Pueden ser necesario obtener un cultivo de clulas de una especie particular que se tiene a la mano

O 2).-Puede requerirse determinar las

cantidades y los tipos de microorgnismos presentes en un material dado.

O 3).- Aislar un tipo particular de

microrganismos de un material natural.

CRECIMIENTO CELULAR DE UNA ESPECIE DADA

O Puede ser muy difcil lograr que los

microorganismos observados al microscopio, cuando crecen en un ambiente natural, se desarrollen en cultivo puro en un medio artificial. por ejemplo, ciertas formas parsitas nunca se han podido cultiva fuera del husped , Sin embargo , por lo general se puede disear un medio adecuado en el cual se producen cuidadosamente las condiciones que el microorganismo encuentra en su medio ambiente natural.

O Como cada tipo de microorganismo

presente debe tener a oportunidad de crecer, se utilizan medos de cultivo slidos al tiempo que se evita la aglomeracin de las colonias, pues de otra manera la competencia impedir que algunos tipos las formen.

AISLAMIENTO DE UN TIPO PARTICULAR DE MICROORGANISMO

O Si se manipula de manera correcta una

pequea muestra de suelo proporcionar un tipo diferente de microorganismo por cada microambiente presente.

O Para un suelo frtil (hmedo,aireado,rico

en minerales y materia orgnica) esto significa que puede aislar cientos y aun miles de tipos.

AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS EN CULTIVO PURO

O Para estudiar las propiedades de un

microorganismo dado es necesario manejar en cultivo puro, libre de otros microorganismos. Para hacer esto, debe aislarse una sola clula de las dems y cultivarse de tal manera que su progenie tambin permanezca aislada. Para esto se dispone de varios mtodos.

SEMBRADO EN PLACA
O A diferencia de las clulas que crecen en

un medio lquido, las clulas que crecen sobre o dentro de medios slidos se encuentran inmviles: O Si algunas clulas se colocan en o sobre un medio gelificado. Cada una crece y da una colonia aislada. El gel ideal para la mayor parte de los medios microbiolgicos es el agar.

O Mtodo de vertido en placa. Para obtener

un cultivo axnico mediante este mtodo, O (a) hacer diluciones seriadas de la suspensin bacteriana hasta obtener una muestra con slo unos pocos cientos de bacterias

O b) verter la muestra en un tubo con agar a

sobrefusin, mezclar y verter el contenido en una placa Petri. (c) Despus de la incubacin, se desarrollan colonias en el agar (ms pequeas) y en su superficie (ms grandes).

DILUCIN
O Un mtodo seguro es el de dilucin por

extincin. De la suspensin se hace diluciones seriada y se siembra cada una en placa. Este mtodo no se usa a menos que por alguna razn sea imposible la siembra en placa. Una desventaja de este mtodo es que slo se puede utilizar para aislar el tipo de microorganismo predominante en una poblacin mixta.