ESPECTROFOTOMETRIA UV-VISVEL

Bruno L. Cortez de Souza Departamento de Engenharia Qumica DEQUI ESCOLA DE ENGENHARIA DE LORENA EEL/USP

Fundamentos da Espectrofotometria
Uma maneira boa de cutucar molculas, com radiao eletromagntica (luz)
A espectrofotometria faz parte da classe dos mtodos analticos que baseiam-se na interao da matria com a energia radiante
Boa sensibilidade Baixo custo de anlise Fcil operao Equipamentos robustos

Luz incidente

Luz emergente
Perdas: - reflexes - disperso -absoro

Luz absorvida

Fundamentos da Espectrofotometria
Propriedades da luz

Fundamentos da Espectrofotometria
Absoro de Luz

Espectro Eletromagntico

Fundamentos da Espectrofotometria
Absoro de radiao eletromagntica

Fundamentos da Espectrofotometria
Porque ocorre o fenmeno da absoro?
Molculas que apresentam eltrons que podem ser promovidos a nveis de energia mais elevados mediante a absoro de energia
TRANSIES ELETRNICAS

Nveis discretos de energia so absorvidos devido vibraes e rotaes das molculas

ROTACIONAL E VIBRACIONAL

Por este motivo no se observa uma linha de absoro ntida, mas sim uma banda de absoro
ESPECTRO UV-VISVEL

Transies Eletrnicas

Energia Rotacional e Vibracional

Espectro UV-Visvel

Fundamentos da Espectrofotometria
Dois requisitos devem ser observados para que uma determinada radiao possa ser absorvida por uma molcula: 1 - A radiao incidente deve ser de freqncia equivalente aquela rotacional ou vibracional, eletrnica ou nuclear da molcula, 2 - A molcula deve ter um dipolo permanente ou um dipolo induzido, ou seja, deve haver algum trabalho que a energia absorvida possa fazer.

Cores de Radiao Regio do Visvel

Espectros de absoro de diferentes substncias

Espectros de absoro diferentes substncias (1: bacterioclorofila; 2: clorofila a; 3: clorofila b; 4: ficoeritrobilina; 5: beta-caroteno)

Teoria da Espectrofotometria
Lei de Lambert
Io
1 cm

Lei de Beer
Io
soluo 10 g/l

IT1

IT1

Io
3 cm

IT3

Io
soluo 20 g/l

IT2

It = Io 10-Kl

It = Io 10-Kc

Lei de Beer-Lambert
A espectroscopia de absoro molecular est baseada na medida de absorbncia (A) ou transmitncia (T), que esto relacionadas atravs das equaes:

Lei de Beer-Lambert

A absorbncia muito importante porque ela diretamente proporcional concentrao, c, de espcies absorventes de luz na amostra

Desvios da Lei de Beer-Lambert

LIMITAO REAL
A Lei vlida somente para baixas concentraes Altas concentraes = Interao entre as molculas afeta a distribuio de carga, alterando o coeficiente de absortividade molar

DESVIO QUMICO
Surgem quando um analito se dissocia, se associa ou reage com um solvente para dar um produto que tem um espectro de absoro diferente

Desvios da Lei de Beer

DESVIO INSTRUMENTAL A lei s vlida para radiao monocromtica, ou seja, para um nico comprimento de onda () Como minimizar o desvio? Escolher a regio onde o constante na regio selecionada

Partes Essenciais de um Espectrofotmetro

Fontes de radiao; Monocromador; Compartimento de amostra; Detector.

Espectrofotmetros
Feixe Simples

Feixe Duplo

Espectrofotmetros com duplo feixe

Espectrofotmetros com duplo feixe

Fontes de Radiao

Sistema ptico

Celas de Medida

Detectores

Detectores

Detectores

Espectrofotmetros Portteis

Absoro Seletiva de Compostos Orgnicos e Inorgnicos

ABSORO SELETIVA
A. Compostos Inorgnicos

B. Compostos Orgnicos
Cromforos Auxcromos

Cromforos Representativos
Composto Cromforo max (nm) Log

Octeno-3
Acetileno Acetona Acetato de diazoetila Butadieno Crotonaldedo Dimetilglioxina Octatrienol Decatetraenol

C=C
C=C C=O N=N C=C-C=C C=C-C=O N=C-C=N C=C-C=C-C=C [-C=C-]4

185 , 230
173 188 , 279 252 , 371 217 217 , 321 226 265 300

3,9
3,8 2,9 , 1,2 3,9 , 1,1 4,3 4,2 , 1,3 4,2 4,7 4,8

Vitamina A
Benzeno 1,4-Benzoquinona Naftaleno

[-C=C-]5
C C

328
198 , 255 245 , 285 , 435 220 , 275 , 314

3,7
3,9 , 2,4 5,2 , 2,7 , 1,2 5,0 , 3,7 , 2,5

Difenilo

246

4,3

Anlises Quantitativas

Anlises Quantitativas

Anlises Quantitativas

Titulaes Espectrofotomtricas

Anlise Qualitativa
3,2

D
C5H11 C5H11 OH R OH

3,0

Log

2,8

R OH

A ou B

2,6

(A)

(B)

OH C5H11

2,4

C5H11
2,2

OH
2,0 240 250 260 270 280 290 300

Comprimento de onda (nm)

OH (C)

OH

(D)

OH

Espectro de absoro do canabidiol comparado com outros fenis.