• Se combinan químicamente con el protoplasma bacteriano (matan a la célula)
• La mas usuales son sales
• Tinciones básicas: catión coloreado +
anión incoloro (ej. Cloruro– de azul de metileno +)
• Tinciones acidas: (ej. Eosinato-
de sodio +) • Los colorantes básicos (+) tiñen a las células bacterianas al combinarse con sus ácidos nucleicos (-)
• Los colorantes ácidos no las tiñen,
por eso pueden usarse para colorear el fondo con un color de contraste Tinción de Gram • La reacción a esta tinción, por parte de las bacterias, se relaciona con muchas propiedades morfológicas de estas
• Las bacterias que captan el colorante básico
son Gram (+)
• La que captan el colorante de contraste son
Gram (-) Tinción acidorresistente • Las bacterias acidorresistentes captan la carbolfucsina, aun cuando se usa decolorante
• se cubre el frotis con carbolfucsina
y se calienta en baño de vapor
• Se agrega alcohol acido
• Finalmente se aplica un colorante de contraste (azul o verde)
• Las bacterias acidorresistentes se
tiñen de rojo:
• Micobacterias • Actinomicetos Tinción negativa • Se tiñe el fondo con colorante de contraste para dejar a las células incoloras en contraste
• El colorante mas usado es nigrusina
• Sirve para observar bacterias o
estructuras difíciles de teñir con técnicas directas Tinción de Flagelos • Se logra con una suspensión coloidal inestable de sales de acido tanico
• Esto forma un precipitado denso en la
pared celular y los flagelos
• Con esto su diámetro aumenta y se tiñen
con fucsina básica, lo que los hace visibles con el microscopio óptico • En bacterias peritricas los flagelos se agrupan en forma de manojo en durante el movimiento y pueden ser suficientemente gruesos para observarse con:
• Microscopia de campo oscuro
• Contraste de fases Tinción de la capsula • Coloración negativa o una modificación de esta
• Método de Welch: solución caliente
de cristal violeta
• Lavado con sol’n de sulfato de cobre (para
remover exceso de colorante). Además imparte color al fondo • La célula y el fondo se tiñen de color azul oscuro
• La capsula aparece de color azul
claro Tinción del Núcleo
• Tinción de Feulgen
• Especifica para el DNA
Tinción de las Esporas • Se observan como cuerpos refringentes intracelulares en suspensiones sin teñir
• O como zonas incoloras dentro de células
tenidas con métodos habituales
• La pared de la espora se puede colorear si
se calienta la preparación • La impermeabilidad de su pared evita la decoloración por el alcohol