Clase Terica 12: Laboratorio Parasitolgico: Entero parsitos, Parsitos Hsticos

PARASITOLOGIA
Objetivos de la presentacin
Introduccin a las bases del diagnstico Parasitolgico. Precisar el rol del Laboratorio en el Diagnstico de las enfermedades parasitarias mas frecuentes de nuestro medio.

PARASITOLOGIA Generalidades
Distribucin universal Parsitos que producen enfermedades en el Humano:
Protozoos Helmintos

Compromiso:
Intestinal Sanguneo Tisular

PARASITOLOGIA Generalidades
Mayora son de naturaleza crnica / largos periodos de incubacin. Realizar Historia clnica correcta / sospecha diagnostica: viajes y/o exposicin. Parasitosis oportunistas: inmunodeficientes Seleccionar el anlisis: Analizar sensibilidad y especificidad de c/prueba Procedimiento adecuado de toma de muestra: segn cuadro clnico y sospecha diagnstica.

PARASITOLOGIA Mtodos de Laboratorio

Examen directo de muestras fecales: Enteroparasitosis Examen de frotis sanguneo Parasitosis tisulares Examen de Secrec. Corporales Urogenitales Esputo Aspirados Biopsias Cultivo Inmunodiagnstico Diagnostico Molecular Enteroparasitosis Parasitosis tisulares

Entero parsitos
Alta incidencia por condiciones desfavorables de higiene 34% nios entre 1 - 4 aos
Menor rendimiento escolar de nios Menor capacidad de trabajo en el adulto

Clasificacin:
HELMINTOS: PROTOZOARIOS
Nematelmintos Platelmintos

Epidemiologa : Distribucin mundial Contaminacin de alimentos

Per: Muestreo Mercado Lima

Entero Parsitos: Sndromes clnicos

Intestinales : polimorfismo de la sintomatologa Sndrome diarreico agudo: amebiasis, balantidiasis, coccidiosis Sndrome diarreico crnico: giardiasis, himenolepiasis, ascariasis, Sndrome de mal absorcin intestinal : uncinariasis, giardiasis Sndrome anmico: Uncinariasis, tricocfalo, amebiasis, balantidiasis

Entero Parsitos: Sndromes clnicos

Extra intestinal:
Sndrome Respiratorio: Ciclo de Loos
scaris lumbricoides Strongyloides stercoralis Uncinarias.

Cuadros Alrgicos: prurito anal y nasal Anorexia Alteraciones neurolgicas: Insomnio

Oxiuriasis

Diagnostico: Entero parsitos

Examen de muestras fecales
Identificacin de parsitos intestinales
Examen directo Tcnicas de concentracin Tcnicas de tincin Cultivos ( menos frecuente) Inmunodiagnostico: ELISA - inmunoblot: Ac especficos Tcnicas moleculares

Estadios mas frecuentes

Protozoos: trofozoitos quistes ooquistes Helmintos: huevos larvas parasito entero/fragmentos

Entero parsitos: Protozoarios Intestinales

Entamoeba histolytica Giardia lamblia Balantidium coli Isospora belli Cryptosporidium sp Blastocystis hominis Microspora

Entero parsitos: Helmintos

Nematelmintos
scaris lumbricoides Uncinarias Platelmintos

Cstodes
Taenia saginata Taenia solium

Enterobios vermicularis
Trichuris trichura Strongyloides stercolaris

Hymenolepis nana

Tremtodes

Fasciola heptica
Paragonimus peruvianus

Entero parsitos: Toma de muestra

La capacidad para detectar e identificar los parsitos intestinales depende de la calidad de muestra Recipiente: tapa rosca. No exmenes radiolgicos con medio de contraste. No Purgantes, Anticidos, Preparados de bario y bismuto, Antidiarreicos por lo menos 1 semana. Nmero de muestras: tres diarias o alternos. No > 10 das. No ablandadores de heces.

Enteroparsitos: Tipo de muestra

Liquidas debe ser trabajada durante los 30 minutos de su evacuacin. En estas muestras los huevos de los helmintos se reducen por el factor de dilucin. Semilquidas durante la hora de ser evacuadas. Slidas durante las 24 horas de ser evacuadas.

Entero parsitos: Toma de muestra

Si no se puede respetar los tiempos: CONSERVADORES Alcohol polivinlico :PVA formol 10% Mertiolato-yodo-formol: MIF Si contaminacin con orina o agua del inodoro: destruccin de trofozoitos: Rechazar muestra

Entero parasitos: Toma de muestra

Seguimiento vara con el diagnstico:
helmintos: 1 - 2 semanas protozoarios: 3 - 4 semanas teniasis: 5 a 6 semanas.

Entero parsitos
Examen de muestras fecales
Identificacin de parsitos intestinales
Examen directo Tcnicas de concentracin Tcnicas de tincin Cultivos ( menos frecuente) Inmunodiagnostico: ELISA - inmunoblot: Ac especficos Tcnicas adicionales

Entero parsitos: Diagnostico de Laboratorio Examen Directo

Macroscpico Microscpico

Macroscpico
Consistencia: formadas, blandas, acuosas, etc Presencia: moco, sangre, larvas, gusanos adultos, progltides, etc

Entero parsitos Diagnostico de Laboratorio:

Microscpico
rpido-sencillo-econmico rendimiento:

Pobre si es una sola muestra: pequea cantidad de heces Mejora si es seriado: tres muestras

Tcnica:

Se emulsiona con las heces Se observa al microscopio

Cloruro de sodio 0,85 % Lugol Lamina y laminilla

Enteroparsitos
Examen de muestras fecales
Identificacin de parsitos intestinales
Examen directo Tcnicas de concentracin Tcnicas de tincin Cultivos ( menos frecuente) Inmunodiagnostico: ELISA - inmunoblot: Ac especficos Tcnicas adicionales

Entero parsitos
METODOS DE CONCENTRACION
Aumentan el nmero de parsitos utilizando diferentes tcnicas Detectan 40 % - 50% ms que el Mtodo Directo Separan los componentes parasitarios de los detritus fecales utilizando un liquido de densidad elevada. El mas utilizado:
FAUST: flotacin y centrifugacin : huevos y quistes

Entero parsitos
Examen de muestras fecales
Identificacin de parsitos intestinales
Examen directo Tcnicas de concentracin Tcnicas de tincin Cultivos ( menos frecuente) Inmunodiagnostico: ELISA - inmunoblot: Ac especficos Tcnicas adicionales

Enteroparsitos Tcnicas de Tincin

til para trofozotos quistes de protozoos No huevos o larvas Principales:
Ziehl Neelsen modificada: Cryptosporidium, Cyclospora e Isospora Hierro-hematoxilina Tricromica

Enteroparsitos
Examen de muestras fecales
Identificacin de parsitos intestinales
Examen directo Tcnicas de concentracin Tcnicas de tincin Cultivos ( menos frecuente) Inmunodiagnostico: ELISA - inmunoblot: Ac especficos Tcnicas adicionales

Entero parsitos Cultivos

Poco usados: laboratorios de investigacin Harada Mori: Filtro de papel Carbn vegetal Especies: Strongyloides, Uncinarias, Entamoeba histolytica

Entero parsitos
Examen de muestras fecales
Identificacin de parsitos intestinales
Examen directo Tcnicas de concentracin Tcnicas de tincin Cultivos ( menos frecuente) Inmunodiagnostico: ELISA - Inmunoblot: Ac especficos Tcnicas adicionales

Enteroparsitos
Inmunodiagnstico:

ELISA- Inmunoblot: Ac especficos

Sensibilidad y especificidad variable Solicitar cuando: Alta sospecha clnica y los test tradicionales negativos Amebiasis criptosporidium giardiasis

Enteroparsitos
Examen de muestras fecales
Identificacin de parsitos intestinales
Examen directo Tcnicas de concentracin Tcnicas de tincin Cultivos ( menos frecuente) Inmunodiagnstico: ELISA - Inmunoblot: Ac especficos Tcnicas adicionales

Tcnicas adicionales
Graham: o cinta engomada o adhesiva (scoth) Se aplica en la regin anal, luego se pega en un portaobjeto y se observa al microscopio: huevos Es necesario de 3 a 5 muestras en das seguidos. Kato Katz: Recuento de huevos de helmintos.. Baermann: Termotropismo Aprovecha la capacidad de migrar de las larvas de strongyloides estercoralis estimuladas por el calor

Parsitos no patgenos observados en materia fecal

Chilomastix mesnili Dientamoeba fragilis Entamoeba coli Entamoeba hartmanni Entamoeba gingivalis Entamoeba polecki Endolimax nana Enteromonas hominis Iodoamoeba butschlii Retortamonas intestinalis Trichomonas hominis

 Interpretacin:
El paciente tiene hbitos con riesgo de exposicin de contaminacin fecal oral Paciente tiene riesgo de adquirir otras parasitosis que si son patolgicas.

Indicaciones a pacientes con estas parasitosis:

Mejorar lavado de manos Ingerir alimentos bien lavados y/o preparados con adecuada higiene NO TRATAMIENTO

PARASITOLOGIA Mtodos de Laboratorio

Examen de muestras fecales: Enteroparasitosis Examen de frotis sanguneo Parasitosis Examen de Secrec. Corporales tisulares
Urogenitales Esputo Aspirados Biopsias

Cultivo Inmunodiagnstico Diagnostico Molecular

Parasitosis Intestinales Tisulares

Epidemiologa
Distribucin Mundial Asociado a factores
Ambientales Parasitarios Husped

Sndromes clnicos
Sndrome anmico: Malaria Cardiomiopatia: Enf. Chagas Sndrome ulceroso muco-cutneo: Leishmaniasis Sndrome mononucleosico: Toxoplasmosis Sndrome meningoencefalitis: amebas de vida libre Sndrome respiratorio: Hidatidosis Pulmonar paragonimiasis Sndrome Ictrico: Fasciolasis Heptica Sndrome neurolgico: Cisticercosis Sndrome drmico: Larva migrans visceral

Parasitosis tisulares
Examen de frotis sanguneo Examen de Secreciones Corporales
Urogenitales Esputo Aspirados Biopsias Requieren de muestras accesibles en su mayor parte por procedimientos invasivos

Parasitosis tisulares
Examen de frotis sanguneo

Malaria

Tripanosomiasis

Parasitosis tisulares
Examen de frotis sanguneo Examen de Secreciones Corporales:
Esputo: Paragonimus Aspirados de Quistes: Hidatidosis Biopsias: leichmaniasis - toxoplasmosis L.C.R: Cisticercosis - toxoplasmosis Tcnicas de anlisis: ELISA-InmunoblotBiologia Molecular-Inmunofluorescencia

Eosinofilia y Parasitosis
Se estima que al menos en 70% de los pacientes con eosinofilia elevada (mayor de 20%) en nuestro pas se encuentra un origen parasitario Sin embargo Los protozoarios y helmintos de localizacin exclusivamente intestinal no la generan. La generan aquellos que llevan a cabo una migracin tisular

y que al final de su ciclo biolgico pueden localizarse fuera (Trichinella spiralis) o dentro (Fasciola hepatica) del tubo digestivo

Eosinofilia y Parasitosis
Tambien la producen los parsitos de animales que accidentalmente infectan al hombre (Toxocara canis).

Toxocariosis

Diagnostico: Clnica mas serologa

Protozoarios: Amebas de vida libre

Las amebas de vida libre (AVL) son protozoos que se desarrollan en aguas temperadas que se mantienen relativamente inmviles (piscinas, lagunas, estanques). Algunas especies de AVL pertenecientes a los gneros Acanthamoeba y Naegleria han sido descritas como potencialmente patgenas para el hombre causando meningoencefalitis amebiana primaria (MAP) y otros cuadros como queratitis grave en el hombre. Son mas frecuentes en inmunocomprometidos y de elevada mortalidad (> 90%)

Protozoarios: Amebas de vida libre

Parasito Tcnica de estudio Muestra Estadio

Ancanthameba sp
Queratitis grave

Frotis y tinciones Cultivo

Raspado corneal

Trofozotos

Naegleria sp

Absceso cerebral

Exmen directo en fresco: raro Frotis y tinciones, Inmunoflures.

Lquido cefalorra qudeo Biopsia cerebral

Trofozotos