ANTICUERPOS

Experimentos de Kabat & Tiselius (1939): demostraron que la llamada fraccin G-globulnica de las protenas del suero era la responsable de la actividad anticuerpo (por eso, a los anticuerpos se les ha denominado durante mucho tiempo como

G-globulinas).
Porter y Edelman (por separado, en los aos 50 y 60) realizaron diversos experimentos usando ultracentrifugacin para separar las G-globulinas, obteniendo una fraccin que posea un coeficiente de sedimentacin de 7S, a la que llamaron IgG, con

INMUNOGLOBULINAS
Nisonoff realiz experimentos parecidos a los de Porter, pero en lugar de digerir la IgG con papana, emple pepsina. Del ulterior anlisis cromatogrfico dedujo que la pepsina haba roto cada molcula de IgG en un fragmento capaz de unir Ag pero con doble valencia [fragmento F(ab)2], y una serie de pequeos fragmentos pequeos no cristalizables, procedentes del Fc original

INMUNOGLOBULINAS
Edelman someti la IgG a un tratamiento reductor con mercaptoetanol (que provoca la rotura de los puentes disulfuro), con posterior electroforesis desnaturalizante de los pptidos resultantes. Sus resultados indicaban que la IgG estaba compuesta de dos tipos de cadenas polipeptdicas,

una pesada (cadena H) y otra ligera (cadena L).

INMUNOGLOBULINAS
Ensamblando todos estos resultados se obtena el primer modelo de la estructura de una inmunoglobulina: cada molcula de IgG est compuesta de Dos cadenas H, cada una de unos 50.000 Da. Dos cadenas L, cada una de unos 25.000 Da. Cada cadena L est unida a una H por un puente disulfuro. A su vez, las dos cadenas H est unidas entre s por puentes disulfuro.

INMUNOGLOBULINAS
Cadenas H La cadena pesada posee unos 440 aminocidos. Cada cadena pesada posee una regin aminoterminal cuya composicin es variable (VH). El resto de la cadena H muestra en humanos cinco patrones bsicos de secuencia, distinguibles entre s, que configuran cinco tipos de cadenas pesadas segn la porcin constante (CH). Cada uno de los tipos de cadena pesada recibe una denominacin a base de una letra griega, y determinan lo que se denomina clases o isotipos de inmunoglobulinas:

ANTICUERPOS
Los anticuerpos son molculas de peso molecular aproximado de 150 kDa, pertenecientes al grupo de las inmunoglobulinas (Ig). Son molculas capaces de reconocer otras molculas, LOS ANTGENOS La combinatoria de estas secuencias puede producir ms de un billn de secuencias diferentes

ANTICUERPOS
inmunogenicidad o capacidad que presenta una molcula para generar una respuesta inmune en un organismo dado Antigenicidad o particularidad del antgeno que hace que ste sea reconocido por un determinado anticuerpo Ambas propiedades pueden o no estar presentes en un determinado antgeno

ANTICUERPOS
A la regin del antgeno reconocida por un anticuerpo se le denomina eptope o determinante antignico Un antgeno puede presentar un nmero variable de eptopes de estructura nica o repetitiva La complejidad estructural de las protenas favorece que stas presenten por lo general un nmero elevado de eptopes distintos, mientras que los cidos nucleicos y los polisacridos, dada su repetitividad estructural, poseen un nmero escaso de eptopes diferentes.

ANTICUERPOS
Anticuerpos policlonales, monoclonales, recombinantes

ANTICUERPOS
Cuando se inmuniza un animal con un antgeno y se provoca una respuesta inmune aumenta notablemente en el suero del animal la cantidad de Ig especficas del antgeno empleado Esto es la consecuencia de la seleccin clonal de los limfocitos B que producen anticuerpos contra el antgeno. Como hemos visto un antgeno puede presentar diferentes eptopos, y cada uno de ellos ser reconocido por un clon de linfocitos B que producir molculas Ig con una secuencia caracterstica.

ANTICUERPOS
Por ello en el suero de un animal inmunizado se acumulan un nmero desconocido, posiblemente elevado, de diferentes molculas de Ig especficas en mayor o menor medida de nuestro antgeno. Se trata de un suero producido por la accin de sntesis de numerosos clones de linfocitos B y por ello se ha denominado policlonal Los anticuerpos monoclonales se producen 'in vitro',

ANTICUERPOS
son la consecuencia de la actividad de sntesis de un nico clon celular de linfocitos B que se ha aislado y se mantiene en cultivo en el laboratorio En la actualidad existe la tecnologa necesaria para la produccin de anticuerpos en ausencia de inmunizacin del animal. Es la denominada tecnologa de los anticuerpos recombinantes. Los recientes avances en la tecnologa gnica han facilitado en gran medida la manipulacin gentica, produccin, identificacin y conjugacin de fragmentos de anticuerpos recombinantes, obtenindose nuevos anticuerpos multivalentes y multiespecficos.

ANTICUERPOS
Isotipos y determinantes isotpicos Se denominan isotipos al conjunto de variantes de inmunoglobulinas comunes a todos los miembros sanos de una determinada especie. Los isotipos dependen de las regiones constantes tanto de cadenas pesadas como de cadenas ligeras. Los isotipos tambin reciben el nombre de clases, y en determinados casos se pueden diferenciar subclases. Como ya vimos, en humanos se distinguen cinco isotipos segn caractersticas de las porciones constantes de cadenas pesadas (IgG, IgA, IgM, IgD e IgE). Cada isotipo puede encontrarse en dos versiones distintas, segn que las cadenas ligeras sean de tipo k o l .

ANTICUERPOS

INMUNOGLOBULINAS
IgG = Gamma IgM = Mu IgA = Alfa IgE = Epsilon IgD = Delta

Las cadenas L poseen un dominio variable (VL) y un dominio constante (CL). Las cadenas H poseen un dominio variable (VH) y 3 o 4 (segn clase) dominios constantes (CH1, CH2, CH3, y en su caso, CH4).