TOMA DE MUESTRA

Patologa clnica-Hematologa Dra.Patricia Flores Fuentes R1

CONCEPTO

CONSISTE EN ACCEDER AL TORRENTE SANGUINEO ,MEDIANTE UNA PUNCION ,PARA EXTRAER UNA MUESTRA DE SANGRE PARA DIAGNSTICO O CONTROL.

LO REALIZA PERSONAL DE SALUD CAPACITADO.

MATERIALES
Jeringas y agujas Torniquete Contenedores para muestras (o sistema de tubos al vaco):simples y con diversos anticoagulantes Formulario de peticin Torundas con alcohol isoproplico al 70% o con clorhexidinaal 0,5% Compresas de gasa o almohadillas de celulosa estriles Apsitos adhesivos Bolsas de plstico autosellantes Gradillas para mantener las muestras verticales durante el proceso de llenado (Tambin debe haber un contenedor desechable resistente a la puncin)

TUBOS AL VACIO

PROCEDIMIENTO
CONSIDERACIONES ADICIONALES: Explicar el procedimiento a ejecutar Verificar que pruebas son solicitadas (si los tubos son adecuados) Necesita alguna condicin previa antes de tomar la muestra. Condiciones fsicas y psicolgicas del paciente ( secuelas de DCV.) Verificar el sitio de puncin (fistula por IRC, infecciones en piel, venoclisis, cicatrices, etc Importante: Tener una buena relacin personal de salud-paciente.

Factores fisiolgicos que afectan los resultados de las pruebas

Postura: supina- de pie Ritmo circadiano: cortisol-ACTH Ejercicio: creatinina, CPK,LDH, Estress: AUMEN LEUCOCITOS Ayuno: 8-12 HORAS Habito fumar: AUMEN LEUCOCITOS Y CORTISOL, Y NIVELES DE HEMOGLOBINA.

PROCEDIMIENTO
LA NATIONAL COMMITTEE FOR CLINICAL LABORATORY STANDARS (NCCLS 1998)RECOMIENDA LOS SIGUIENTES PASOS:

preparar la orden de ingreso identificacin del paciente mediante confirmacin del nombre y nmero de identificacin si corresponde verificar alguna restriccin de la dieta

reunir los elementos y colocarse los guantes dar confianza al paciente posicionarlo verificar el protocolo de trabajo y seleccin de los tubos

si es necesario para localizar la vena asegurarse de que la mano del paciente este cerrado seleccionarse un sitio adecuado para la venopuncion limpiar el sitio de la venopuncion con alcohol, con crculos concntricos desde el centro a la periferia aplicar el torniquete 5 a 10 cm por encima del sitio de puncin durante no mas de 1 min

revisar la aguja y el equipo realizar la venopuncion con fijacin de la vena con el dedo pulgar 2,55 cm por debajo del sitio e insertar la aguja con el bisel hacia arriba con un ngulo de 15 entre la aguja y la piel. recolectar los tubos respetando el orden correcto con la inversin de cada tubo de inmediato despus de la recoleccin.

Se recomienda el siguiente orden de extraccin cuando se toman varias muestras. Su propsito es evitar errores en los resultados debidos a contaminacin cruzada por los aditivos de los tubos. Hemocultivos Tubo sin aditivos (tubo rojo) Tubo para coagulacin ( tapn celeste) Otros tubos con aditivos: Tubo con gel o separador de suero (tapn dorado)

 Tubo con heparina (tapn verde) Tubo con EDTA (tapn lavanda) Tubo con oxalato de potasio o fluoruro de sodio (tapn gris)

Liberacin y eliminacin del torniquete Asegurarse que la mano del paciente este abierta Colocar la gasa con suavidad sobre el sitio de puncin, sin presionar Despus de liberar el ultimo tubo de la parte de atrs de la aguja de mltiples muestras, quitar la aguja y aplicar presin directa en el sitio de la puncin. Vendar el sitio de puncin despus de verificar que el sangrado se detuvo Si se utilizo jeringa llenar los tubos

Desechar el quipo de puncin y otros residuos biopeligrosos. Rotular los tubos con los datos correctos Cumplir con otros requisitos especiales del manejo (refrigeracin o proteccin de la luz) Eliminar toda restriccin de dieta Enviar las muestras rotuladas al laboratorio.

 Todos los tubos con ATC hay que movilizarlos suavemente hasta 4 veces. Si se hace muy fuerte puede producir una hemolisis de la muestra o si no se hace se produce coagulacin.

Extraccin sangre (NCCLS H3-A5 ESTNDAR)

1.- TUBO HEMOCULTIVO 2.- TUBO COAGULANTE 3.- TUBO SUERO: con gel/sin gel 4.-TUBO CON HEPARINA: CON GEL / SIN GEL 5.- EDTA 6.-GLUCOSA 7 TUBITOS DE OTROS TIPOS.

Problemas: durante la extraccin

Cuando la sangre es insuficiente o no sale Mover la aguja hacia adelante o hacia atrs Ajustar el ngulo del aparato Afloje el torniquete Cambiar de tubo Si la sangre deja de fluir Puede que la vena se colapse-----ajustar el torniquete Al cambiar de tubo se puede mover la aguja

Se deben evitar ciertas zonas para la puncin venosa Cicatrices de quemaduras o suturas quirrgicas En el mismo lado de una mastectoma El hematoma azulado En terapia IV No se debe extraer en el brazo de una fistula Extremidades edematosas.

CONDICIONES QUE PROVOCAN EL RECHAZO DE UNA MUESTRA

- Inadecuada identificacin de la muestra. Tubo sin rotular -no concuerda la orden de solicitud de la prueba y al identificacin del tubo - Volumen de sangre inadecuado. - Utilizacin de tubos de recoleccin inadecuados (Ej.: Ca). - Hemlisis de la muestra. - Transporte inadecuado. - Sustancias interferentes

La muestra se recolecto en un momento errneo La muestra se recolecto en tubo errneo La muestra presenta coagulo y la prueba necesita sangre entera La muestra esta contaminada con liquido intravenoso La muestra es lipemica.

Causas de hemolisis
Es el escape de hemoglobina de los glbulos rotos. Provoca que el plasma aparezca de color rosado o rojo. Mltiples causas

Anticoagulantes

Anticoagulante

Una vez extrada la sangre, sta puede conservarse coagulada o mantenida incoagulable mediante la adicin de un anticoagulante

CARACTERSTICAS BSICAS DE LOS ANTICOAGULANTES MS USADOS EN HEMATOLOGA

No alterar el tamao de los hemates.

No producir hemlisis. Evitar al mximo la agregacin plaquetaria. No alterar la morfologa de los leucocitos.

Los anticoagulantes pueden emplearse en forma slida o lquida. Los primeros estn indicados para la determinacin de los parmetros hematolgicos, ya que no producen, como los anticoagulantes lquidos, dilucin de la sangre.

ANTICOAGULANTES SLIDOS
EDTA Es la sal disdica o tripotsica del cido etilendiaminotetractico. La sal disdica (Na2EDTA) es menos soluble que la sal tripotsica (K3EDTA). Estos compuestos realizan su accin a travs de un efecto quelante sobre el calcio, al fijarlo impiden su activacin y, por ende, la coagulacin sangunea.

Ventajas: Se usa para recuentos celulares ,y permite realizar hcto y frotis sang hasta 2 horas despus de extrada la muestra.(4C) Impide la aglutinacin de las plaquetas La cantidad es 1,5-2,2 mg/ml sangre.( > cantidad de ATC /SANGRE---------retraccin celular, del hematocrito, y de la CMH. Una mayor [] EDTA provoca que las plaquetas se hinchen y se desintegren provocando un aumento plaquetario relativo.

 > SANGRE /ATC produce formacin de microgregados que pueden alterar los

resultados. extensiones sanguneas con EDTA no pueden observarse los punteados basofilos en la intoxicacin con plomo. produce leucoaglutinacion (neutrofilos y linfocitos) Responsable de la actividad de un auto anticuerpo antiplaquetario causa la adherencia de plaquetas a neutrofilos en extensiones sanguneas.

EDTA DIPOTASICO Mas soluble 1650g/l Los cambios son mnimos Es mucho mejor para el recuento celular, frotis, hcto (recomendado por ICSH) uso [1,50+/0,25]mg/ml Independiente de la sal todas afectan hematies, leucocitos provocando su encogimiento y cambios degenerativos. Diluye la sangre y produce encogimiento de hemates (reduccin de hcto seguido de incremento VCM TRIPOTASICO DISODICO Menos soluble 108 g/l No se recomienda por el PH elevado.

HEPARINA SODICA, HEPARINA DE LITIO ATC fisiolgico acta inhibiendo a la protrombina se convierta en trombina. Utilizado para las pruebas bioqumicas, determinaciones de urgencia y gasometras. Recomendado en situaciones que es importante reducir el mnimo la lisis despus de la extraccin. Es apropiada para las pruebas de fragilidad osmtica y es apropiada para rl inmunofenotipado.

Desventajas: Presenta el inconveniente de que si no se agita rpidamente con la sangre despus de extrada pueden formarse microcogulos, aunque no altera el volumen eritrocitario ni la morfologa de los leucocitos. No debe utilizarse para las extensiones sanguineas porque da una debil coloracion azul de fondo (romanowsky) y pseudovacuolizacion c/ La proporcin adecuada es 15-20UI (0,1-0,2 mg) de heparina / sangre

Anticoagulante liquido
Citrato trisdico
Evita la ionizacin del calcio Es de eleccin para las pruebas de hemostasia y la velocidad de sedimentacin. Acta a travs de la precipitacin del calcio. La concentracin depende de la prueba por realizar. Para pruebas de hemostasia se emplea en proporcin de 1: 9 (0,5 mL de anticoagulante para 4,5 mL de sangre total). Para la determinacin de la VSG (Velocidad de Sedimentacin Globular) es 1:4 (0,5 mL de anticoagulante para 2 mL de sangre).

Oxalato sdico
Recomendado tambin para las pruebas de hemostasia. Se emplea en proporcin de un volumen de anticoagulante para 4 vol. de sangre.

COLOR TAPA

ANTICOAGULA NTE
CITRATO DE Na

MUESTRA DE SANGRE
PLASMA

CELESTE

LILA

EDTA

SANGRE TOTAL

ACCION DEL ANTICOAGULA NTE CAPTURA EL CALCIO (EVITA SU IONIZACION) CAPTURA Ca (QUELANTE)

APLICACION

OBSERVACION

COAGULACION

HEMATOLOGIA

TAMBIEN SE USA PARA DETRMINACION DE AMONIO

VERDE NEGRO GRIS

HEPARINA OXALATO FLUORURO

PLASMA PLASMA SUERO

INHIBE TROMBINA CAPTURA EL CALCIO INHIBE ENOLASA

QUIMICA COAGULACION QUIMICA PARA DETERMINACION DE LACTATO

ROJO

SIN ANTICOAGULANTE

SUERO

QUIMICA

ROJO C/ AMARILLO

SIN ANTICOAGULANTE

SUERO

QUIMICA

INMUNO ENDOCRINO PRUEBAS SEROLOGICAS INMUNO ENCODRINOPRUEBAS SEROLOGICAS

CONTIENE GEL SEPARADOR DE SUERO ,ELEMENTOS CELULARES

Tapa
Tapa lila

ATC
EDTA

Pruebas
Hemogramas. - Rcto. Plaquetas. - Rcto. Eosinfilos. - Rcto. Reticulocitos - Rcto. Leucocitos. - Hto. y Hb. - Formula leucocitaria VSG

Tapa negra

Citrato sodio

Tapa celeste

T.T.P.A o Anticoagulante lupico. o T.P + INR o Factor VIII. o Fibringeno. o Factor Von Willebrand Antignico

Gracias.