Antibiticos y quimioteraputicos

Clasificacin, mecanismos de accin y pruebas.

Equipo 3

 Antimicrobiano: molcula natural (producida por un organismo vivo, hongo o bacteria), capaz de inducir la muerte o la detencin del crecimiento de bacterias, virus u hongos. Quimioteraputico: productos de la sntesis o semisntesis qumica en el laboratorio, capaces de suprimir el crecimiento y multiplicacin o provocar la lisis o destruccin de microorganismos infecciosos.
Los antibiticos constituyen un grupo heterogneo de sustancias con diferente comportamiento farmacocintico y farmacodinmico, ejercen una accin especfica sobre alguna estructura o funcin del microorganismo, tienen elevada potencia biolgica actuando a bajas concentraciones y la toxicidad es selectiva, con una mnima toxicidad para las clulas de nuestro organismo.

 Antibiosis: Un microorganismo produce y libera una sustancia, la cual inhibe la vida de otros microorganismos. Por ejemplo el gnero Penicillium produce la penicilina, la cual mata a otras bacterias. Agentes bacteriostticos: inhiben el desarrollo y multiplicacin de los microorganismos, pero no los destruyen. Para erradicar la infeccin requieren la actividad del sistema inmunolgico (actividad de macrfagos y polimorfo nucleares) ej: sulfonamidas, tetraciclinas, cloranfenicol. Agentes bactericidas: provocan la lisis y muerte de microorganismos. Ej: penicilinas, cefalosporinas, polipeptdicos.

 CIM (concentracin mnima inhibitoria): se utiliza para determinar la actividad bacteriosttica de un microorganismo. Se trata de la concentracin mas baja que inhibe el crecimiento, se lleva a cabo in vitro enfrentando una concentracin estndar de microorganismos contra una serie de diluciones de antimicrobianos.
CBM (concentracin bactericida mnima): se utiliza para determinar la actividad bactericida de un microorganismo. Se trata de la concentracin mas baja que destruye el 99.9% de la poblacin bacteriana, se lleva a cabo in vitro enfrentando una concentracin estndar de microorganismos contra una serie de diluciones de antimicrobianos.

Antibiograma: prueba de resistencia o sensibilidad de las bacterias colocadas bajo la accin de diversos antibiticos.

 Resistencia bacteriana: implica el fracaso de la teraputica , bacterias naturalmente fuertes frente a determinadas sustancias bactericidas. Resistencia natural: resistencia ofrecida por las bacterias de una misma especie o cepa frente a determinado antibitico. Resistencia adquirida: resistencia de la bacteria a uno o ms antibiticos puede lograrse en el transcurso del tiempo por dos mecanismos bsicos; mutacin de las caractersticas cromosmicas o bien por adquisicin de material gentico con ubicacin extracromosomica. Resistencia cruzada: engloba antibiticos con estructura qumica idntica, si el mecanismo de accin es similar, la bacteria resistente a uno de los integrantes del grupo, lo ser tambin a los dems

Clasificacin
Origen Estructura Accin

Origen

 Por procedimientos de sntesis qumica. - Sulfamidas, metronidazol, quinolonas

Producido por un microorganismo pero es modificado en el laboratorio. Aminobencilpenicilinas: obtenido de Penicillium chrysogenum. Aumento de cadenas laterales, mayor espectro.

Estructura

Accin

 Solo un compartimento especial frente a un nmero limitado de especies. Ej. glucopptidos

Mecanismos de accin

Inhibicin de la Pared celular

Antibiticos lactamicos
Obstaculizan la sintesis de la pared bacteriana de las Gram (+) y (-)
tipo Penicilinas naturales Penicilinas lactamasa resistentes Penicilinas de amplio aspecto Penicilinas Pemems, monobactams, fosfomicinas Otras penicilinas accion Para infecciones producidas por Gram (+) anaerobias y aerobias Son sustancias que no son destruidas por la penicilinasa Encontramos a la ampicilina, para bacterias Gram (-) De amplio aspecto contra Gram(+) y (-) Mayor estabilidad contra la enzima lactamasa .

 Proteinas de union de la penicilina (penicillin-binding proteins, PBP)

Penicilina Betalactamasa resistentes

Combinaciones de betalactamicos
Ampicilina-sulbactam Amoxicilina- ac. Clavulanico Piperacilina- tazobactam

Glucopeptidos
La vancomicina usa los precursores de la sntesis de la pared celular. La unin interfiere en la capacidad de las enzimas PBP, de incorporar los precursores en la pared celular en crecimiento.

Alteracin de las membranas celulares

Polimixina son producidas por varias cepas de Bacillus polimixa La Polimixina B es un polipeptido que ataca los fosfolipidos, es bactericida, afectan a los M.O. Gram (-)

 La cola hidrofobica de las polimixinas tiene un efecto detergente.

Daptomicina

Se une y altera la membrana celular de los cocos Gram (+) son antimicoticos, se unen al grupo esterol de la membrana y , por lo tanto, solo son activas contra los microorganismos que contienen estos compuestos en sus membranas.

Nistanina

Inhibicin de sntesis de protenas

Aminoglucosidos Se unen a receptores de protena presentes en la subunidad ribosmica 30S del microorganismo. Este proceso interrumpe varios pasos metablicos. Bacterias Gram (+) y (-), excepto las anaerobias.

antibitico Tetraciclinas

Subunidad ribosomica 30S

Mecanismo de accin Los complejos de tRNA-aminoacidos no puedan unirse al ribosoma. Bacterias Gram (+) y (-), y patgenos bacterianos intracelulares como clamidias, rickettsias . Inhibe el agregado de aminocidos nuevos a la cadena peptidica en desarrollo. Bacterias Gram (+) y (-).

Cloranfenicol

50S

Oxazolidinonas

50S

Bacterias Gram (+) incluyendo a bacterias resistentes a antimicrobianos.

1. 2. 3.

Inhibicin de la sntesis de nucletidos. Inhibicin de la sntesis de DNA. Inhibicin de la sntesis de mRNA.

Frmacos: Sulfonamidas, Trimetoprima. Quinolonas Rifampicina, Rifabutina. Metronidazol.

Inhibicin de la sntesis de cidos nucleicos. Antibitico. Accin.

Quinolonas.
Rifampicina y Rifabutina.

Unin a la subunidad de la DNA girasa.

Bloquean la transcripcin unindose al RNA-polimerasa DNAdependiente Rotura del DNA bacteriano (su metabolito citotxico) Bloquean la sntesis tetrahidroflico. del acido

Metronidazol. Sulfonamidas y Trimetoprima.

Antagonistas
Estos componentes compiten con un precursor de aminocidos, como el acido para amino benzoico o PABA y as evitan la sntesis del ac. Flico que requieren muchos microorganismos.

 Sulfonamidas
Su diana, dihidropteroato sintasa, se une para destruir la via del acido folico.

antagonistas Trimetroprim Inhibe una enzima diferente, la dihidrofolato reductasa. Contra Gram (+) y (-) Combinacion de sulfonamidas y trimetroprim, donde atacara de manera simultanea a las dos dianas (Acido para aminosalicilico), se comporta como un antimetabolico eficaz para el tratamiento de la tuberculosis Inhibe la enzima dihidropteroato sintasa. Gram (+) y (-)

Sulfametoxazol

PAS

Dapsona

PRUEBAS DE SENSIBILIDAD

Conceptos importantes
Concentracion Minima Inibhibitoria (CIM): Minima concentracion del antibiotico que inhibe el desarrollo visible de la bacteria en prueba Concentracion Minima Letal (CML): Concentracion mas baja de un antibiotico necesaria para matar a las bacterias.

Mtodos de dilucin

Macrodilucion
Se emplea caldo de Mueller Hinton con suplemento cationico (Ca y Mg), al igual que tubos esteriles que contienen concentraciones decrecientes del antibiotico a estudiar. La concentracion antibiotica maxima en esta pruba debe ser de 32 mg/L.

Microdilucion
Es de gran utilidad para el estudio de la CIM. Se realiza en placas de poliestireno, con micropocillos en lugar de tubos Los pocillos de la placa se llenan con 100 microlitros de caldo con el antibiotico a estudiar y de 1 a 5 microlitros del inoculo ajustado.

Interpretacion de los resultados

Los resultados de sensibilidad sern interpretados de acuerdo a las tablas y se definen tres categoras: resistente, intermedio y sensible. La CIM corresponde a la mnima concentracin de antibitico en donde no se observa desarrollo (turbidez). La CIM se expresa en g/ml.

Por que utilizar caldo de Mueller Hilton ?

De los medios disponibles se considera que tanto el agar como el caldo Mueller Hinton (MH) son los ms apropiados para las pruebas de sensibilidad de rutina dado que: muestran buena reproducibilidad entre los diferentes lotes comerciales son baratos contienen bajo nivel de inhibidores de sulfonamidas, trimetoprim y tetraciclinas son adecuados para la mayora de las bacterias patgenas en lo que a requerimientos nutricionales se refiere existen suficientes datos recopilados que avalan su uso en las pruebas de sensibilidad.

Mtodos de Difusin en Agar

Antibiograma
Se inocula un medio de cultivo solido y sobre su superficie se aplican pequenos discos de papel impregnados con el antibiotico. Se incuba a 37 ~ durante 18 horas El microorganismo crece alrededor de los discos pero forma un halo de inhibivion, que depende del antibiotico y del microorganismo estudiado.

PREPARACION DEL INOCULO

Procedimiento 1. Mtodo del medio de cultivo lquido o de Kirby-Bauer: Con un asa bacteriolgica se tocan cuatro o cinco colonias bien aisladas del mismo tipo morfolgico y se inocula en 4 a 5 ml de caldo apropiado, como caldo MH. Los cultivos de caldo se dejan incubar a 35C hasta que aparece una turbidez ligeramente visible (generalmente 2 a 5 hs). La turbidez se ajusta con suero fisiolgico estril o caldo para obtener una turbidez visualmente comparable a la de un estndar preparado previamente (llamado 0.5 de Mc Farland). Este estndar debe agitarse antes de usar y ser comparado en forma visual con el inculo preparado. Para ello se miran ambos tubos al mismo tiempo contra un fondo blanco con una lnea negra como contraste Este mtodo es recomendado cuando el cultivo tiene ms de 24 hs de incubacin.

2.- Mtodo de suspensin directa de colonias o Kirby-Bauer modificado: Se colocan entre 4 y 5 ml de suero fisiolgico estril en un tubo de ensayo. Se toma con un asa bacteriolgica tres o cuatro colonias morfolgicamente similares y se suspenden en el tubo hasta alcanzar una turbidez comparable la solucin de Mc Farland 0.5. Luego de preparado el inculo bacteriano con la cepa en estudio se deben seguir los siguientes pasos: Introducir el hisopo estril en el inculo bacteriano preparado, de manera de embeberlo completamente. Antes de retirarlo se debe escurrir sobre las paredes del tubo para retirar el exceso de lquido del mismo. Sembrar la placa de MH masivamente Dejar secar 3 a 5 minutos antes de colocar los discos. Colocar los discos. Estos deben ser colocados con dispensador o pinza estril. Luego de estar sobre el agar se debe presionar los discos levemente para que queden adheridos al mismo. Deben estar a ms de 15 mm del borde de la placa y deben distriburse de manera de que no haya superposicin de los halos de inhibicin. Luego de colocados los discos las placas deben incubarse a 37C en grupos no durante 18 hrs.

INTERPRETACION DEL RESULTADO

La lectura se realiza a travs de la medicin de los halos de inhibicin. Al igual que para las dilusiones existen tablas que segn el dimetro del halo de inhibicin de crecimiento bacteriano, definen categoras de resistencia, sensibilidad y sensibilidad intermedia.