EVALUACIN DE UN ENSAYO

COMERCIAL BASADO EN LA REACCIN EN CADENA DE LA POLIMERASA PARA

LA DETECCIN DIRECTA DE MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS EN MUESTRAS RESPIRATORIAS

MATERIAL Y MTODOS

Un total de 297 muestras respiratorias ( esputo y lavado bronquial ) de 193 pacientes que han sido evaluadas o en tratamiento para la tuberculosis en la Clnica de Neumologa del Hospital Universitario Cassiano Antnio Moraes ( Esprito Santo , Brasil ) Microscopa. El sedimento se someti a un examen de (BAAR)

Cultivo. Se inocul el sedimento en medio de Lowenstein- Jensen , se incub a 37 C durante un mximo de 6 semanas y se cultiva en BACTEC 460 mtodo radiomtrico, durante 6 semanas con el ndice de crecimiento comprobado 3 veces a la semana.

RESULTADOS

Un total de 297 muestras de 193 pacientes que estn siendo revisadas o en tratamiento para la tuberculosis fueron examinadas por microscopa , el cultivo y el ensayo LCx . De ellos, 42 ( 14 % ) fueron positivos para micobacterias , ya sea por cultivo slido o BACTEC 460 TB . El MTB Ensayo LCx dio un resultado positivo en 56 ( 18,8 %) muestras , de las cuales 38 ( 12,8 % ) fueron positivas tambin por el cultivo y 18 ( 6 % ), slo por LCx MTB , 238 ( 80,1 %) muestras fueron negativas en todos los mtodos .

Los datos de la Tabla 2 demuestran la correlacin entre LCx y una citologa. De las 42 muestras positivas , 26 fueron positivos para AFB. La sensibilidad del mtodo fue CX 100 % para las muestras de frotis positivo y 75 % para las muestras de frotis negativos .

Una definicin de caso clnico de la tuberculosis se us como el estndar de referencia para determinar la utilidad de todas las pruebas de diagnstico ( Tabla 3 ) En nuestro estudio se confirm un total de 36 ( 18,6 % ) de los pacientes como los nuevos casos de tuberculosis pulmonar

Hubo 9 resultados discrepantes entre diagnstico clnico CX y finales ( Tabla 4 ) . Cinco pacientes con otros problemas respiratorios en el momento del examen tenan sus especmenes considerados falsos positivos debido a que tanto el seguimiento resultados de la observacin y el cultivo no confirm la presencia de tuberculosis activa . Las muestras de los 4 pacientes restantes fueron considerados falsos negativos . Uno de ellos tuvo un cultivo positivo de esputo y los otros tres pacientes no tenan confirmacin bacteriolgica de la tuberculosis , pero su presentacin clnica y la respuesta al tratamiento, como resultado de un diagnstico definitivo de TB .

DISCUSION

Cuando se evala el rendimiento de un nuevo mtodo de diagnstico, la realizacin de una prueba estndar es un parmetro crtico. Para la deteccin de M. tuberculosis, ya sea de cultivo utilizando ha sido considerado como el estndar de oro. La sensibilidad y especificidad de estos mtodos a menudo se inform a ser ms alto que 90 %. Se demostr que la prueba de tincin y recuento de BAAR carece de sensibilidad en un 50-60% . Los resultados falsos negativos para 4 pacientes pueden ser explicados por ( i ) la presencia de posibles inhibidores de la amplificacin en la muestra , (ii ) una distribucin no uniforme de los microorganismos en la suspensin de ensayo , o (iii ) una baja concentracin de microorganismos en la muestra .

CONCLUSION

El estudio demostr que la PCR - MTB es un mtodo sensible y especfico para la deteccin de M. tuberculosis en muestras respiratorias. Los protocolos de ensayo eran fciles de realizar y eran adecuados para el flujo de trabajo de un laboratorio de microbiologa de rutina. LCR - MTB proporciona al mdico y el programa de control de la infeccin con informacin valiosa, rpida y clnicamente relevante para el diagnstico de la tuberculosis pulmonar. Sin embargo, el ensayo de PCR no debe ser considerado como un sustituto sino ms bien un complemento a las tcnicas tradicionales de microbiologa, con el objetivo de aumentar la sensibilidad y la rapidez del diagnstico de la tuberculosis.