Metode Uji VITAMIN LARUT AIR (B1, B2, B3, B5 dan B6)

Oleh: Mohamad Syahrul Ramdani L/O/G/O NIM.B1010081

Pengertian Vitamin
Vitamin adalah zat-zat organik kompleks yang dibutuhkan dalam jumlah sangat kecil dan pada umumnya tidak dapat dibentuk oleh tubuh. (Muchtadi) Suatu molekul organik yang sangat diperlukan tubuh untuk proses metabolisme dan pertumbuhan yang normal. (Winarno)

Klasifikasi Vitamin
Vitamin Larut Air (B,C) Vitamin Larut lemak (A,D,E,K) Perbedannya:
Vit.Larut lemak Larut dalam lemak dan pelarut lemak Dapat disimpan dalam tubuh (bila berlebih) Diekresikan kedalam asam empedu (jumlah sedikit) Gejala defisiensi lambat munculnya Diserap oleh usus dan diteruskan kedalam system limfatik Vit.Larut air Larut dalam air Disimpan dalam jumlah sedikit (tidak disimpan) Diekresikan ke dalam urine Gejala defisiensi cepat terlihat Diserap oleh usus dan diteruskan ke dalam system aliran darah

Macam-macam Vitamin B (B-kompleks)

B1 (Thiamin) B2 (Riboflavin) B3 (Niasin) B5 (Asam pantotenat) B6 (Piridoksin) B7 (Biotin) B9 (Asam Folat) B12 (Sianokobalamin)

Analisis kadar Vitamin Larut air Beberapa metode: Spektrofotometri (UV) Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) Proksimat (Vit.C) Mikrobiologi

Prinsip penetapan vitamin sama, akan tetapi metode ekstraksinya berbeda tergantung dari bahan yang dianalisis. Masalah dalam analisis vitamin bukan lagi pada metode penetapannya melainkan pada prosedur ekstraksinya.

Prinsip metode
Spektrofotometri dan HPLC Ekstraksi gugus kromofor (rangkap terkonjugasi) dlm vitamin yang diserap sinar UV. Proksimat Reaksi vitamin dengan reagent yang dititrasi dengan I2. Mikrobiologi Kecepatan pertumbuhan m.o yang diatur dengan kadar vitamin. Pertumbuhan diukur dengan turbidimeter.

Ekstraksi Vitamin Larut dalam air

Contoh dihancurkan sehalus mungkin Dilakukan ekstraksi enzimatik menggunakan enzym amylolytic dan proteolytic

Flow chart Vitamin B1,B2,B3,B5 dan B6

Sampel yg sudah dihaluskan Ditimbang 5-10 gram +50 ml HCl 0.1N Diinkubasi 1000 C ; 30 menit didinginkan Di-adjust pH 4.5 Dihimpitkan ke labu, disaring Inject HPLC

Sumber: SNI 3751:2009

 Column C18 dengan fase MeOH-H20 FG: NaHexan sulfanic acid:NaHeptan Sulfanic acid:As.Asetat:Methanol:Air Flow: 1 ml/menit Det: UV dengan =254 nm Vol inject: 20 ul

Sumber: SNI 3751:2009

Flow chart Vitamin B1,B2,B3,B5 dan B6

Ditimbang x gram +60 ml HCl 0.1N tutup alumunium Diinkubasi 1210 C ; 30 menit didinginkan +5ml 10%Takadiastase Diinkubasi 45-50 0 C;3 jam dinginkan, pindahkan ke labu Dihimpitkan ddH2O+sarin g

Inject HPLC

Sumber: ASEAN Manual of Nutrient Analysis Mahidol University, Thailand

Terima Kasih