CINTICA:

A cintica de um bioprocesso consiste na anlise da evoluo dos valores de concentrao de um ou mais componentes do sistema produtivo, em funo do tempo do bioprocesso. Entende-se como componentes, o microrganismo 9biomassa), os produtos do processo metab!litos) e os nutrientes ou substratos "ue comp#e o meio de cultura. $ - %iomassa & - &ubstrato ' - 'roduto ' t (empo

Cintica
)ase de transio )ase estacionria )ase e*ponencial )ase de m o r t e

Cintica
Biorreatores +enomina-se biorreatores, reatores bio"u,micos, reatores biol!gicos, os reatores "u,micos nos "uais ocorre uma srie derea#es "u,micas catalisadas por biocatalisadores "ue podem ser en-imas, ou clulas vivas microbianas, animais ou vegetais).

Biorreatores
I. Reatores em fase aquosa (bioprocesso submerso) I.1 Clulas en!imas li"res .eatores agitados mecanicamente .eatores agitados pneumaticamente /oluna de bol0as 1bubble column2) .eatores 1air-lift2 .eatores de flu*o pistonado 1plug-flo32) I.# Clulas en!imas imobili!a$as em suporte .eatores com leito fi*o .eatores com leito fluidi-ado 4utras concep#es I.% Clulas en!imas confina$as entre membranas .eatores com membranas planas .eatores de fibra oca 10ollo3-fiber2)

Biorreatores
II. Reatores em fase n&o'aquosa (bioprocesso semi's(li$o) .eatores estticos reatores com bande5a) .eatores com agitao tambor rotativo) .eatores com leito fi*o .eatores com leito fluidi-ado gs-s!lido

Biorreatores
Biorreatores i$eais )istura completa. *sta con$i+&o "er$a$eira para reatores $e laborat(rio e mesmo em reatores $e escala piloto, $epen$en$o $o processo. Con$i+-es em que a .ip(tese n&o po$e ser consi$era$a: crescimento $e fun/os filamentosos, $e or/anismos que pro$u!em pol0meros e1tracelulares flui$os n&o'ne2tonianos

Biorreatores
3upor )istura Completa importante porque: tais reatores permitem con$i+-es bem $efini$as para estu$os cinticos4 tais mo$elos s&o utili!a$os frequentemente com sucesso ra!o5"el mesmo quan$o as con$i+-es necess5rias n&o s&o completamente satisfeitas4 ser"e como passo inicial para o estu$o $e confi/ura+-es $e mistura n&o'i$eal.

Biorreatores

+escont,nuo /ont,nuo

+escont,nuo Alimentado

Biorreatores

/ont,nuo 6os % sistemas: Reatores 6escont0nuo s&o o #7 mais utili!a$o4 Reatores 6escont0nuo Alimenta$o s&o os mais utili!a$os para pro$u!ir pro$utos biol(/icos4 Apesar $os reatores cont0nuos serem utili!a$os raramente para pro$u+&o em lar/a escala, eles s&o "astamente utili!a$os em tratamento $e efluentes.

+escont,nuo ou %atelada

+escont,nuo Alimentado

Biorreatores

Processos em Batelada
Sobrenadante

Preparo do Inculo

Fermentao

Separao de Clulas

Recuperao do Produto
Clulas

Biorreatores
Definindo: YP/S: fator de converso de substrato em produto ou fator de rendimento do produto em relao ao substrato [g de P g de S!"
YP
S

massa de produto obtido massa de substrato consumido

YP

dP dt P P Po = = S So S dS dt

YX/S: fator de converso de substrato em clulas ou fator de rendimento de clulas em relao ao substrato [g de # g de S!"
YX
S

massa de clulas formada massa de substrato consumido

YX

X X Xo dX dt = = S So S dS dt

YP/X: fator de rendimento do produto em relao biomassa [g de P g de #!"

YP
X

massa de produto obtido massa de clulas formadas

YP

P P Po dP dt = = X X Xo dX dt Pr =

Pr: produtividade volumtrica [g de P $%!

P tf& tempo de fermentao tf

%iorreatores
6escont0nuo simples 4 principal problema desta forma de operar bioprocessos decorrente de fen6menos de inibio pelo substrato, produto, ou outros metab!litos. /oncentra#es elevadas de substrato inibem o agente biol!gico. Este efeito est relacionado, em clulas vivas, a fen6menos osm!ticos "ue resultam em plasm!lise celular. As poss,veis ra-#es para o fen6meno so a represso na s,ntese de en-imas e a desidratao dos sistemas en-imticos, devida 7 perda de gua da clula ou 7 inibio8d9 o transporte de nutrientes para o seu interior. : fato bem con0ecido "ue a clula viva polui seu ambiente com produtos do seu metabolismo at fa-er cessar o crescimento e, eventualmente, perder sua viabilidade, fen6meno con0ecido como inibio pelo produto

%iorreatores
6escont0nuo com recircula+&o $e clula ;ma alternativa ao processo batelada simples a recirculao de clulas, ou se5a, ao se encerrar a batelada efetua-se a separao das clulas por centrifugao ou mesmo sedimentao no interior do pr!prio biorreator, enviando apenas o l,"uido fermentado para a recuperao do produto.< /om isso busca evitar o preparo de um novo inoculo para cada batelada, redu-indo custos e reduo de tempo para a obteno de altas concentra#es de clula no reator. Esse processo tambm con0ecido como batelada repetida.

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/rescimento celular

d [Vr ci ] = Vr ri dt
Butao ou contaminao

9p s ou :r

dVr =' dt

Vr

dci = Vr ri dt

=
'rimeira %atelada

>

A=

A>

n8 $e reutili!a+-es

dc i = ri dt

A)

A "anta/em $a reutili!a+&o que a fase la/ elimina$a $e"i$o ao microor/anismo ;5 estar a$apta$o ao meio $e culti"o.

Biorreatores
3istema :or Cortes D

>

C Inicia a fermenta+&o no biorreator 14 C Ap(s t, parte $o mosto $e 1 transferi$o para o biorreator # e o "olume $e ambos completa$o com mosto no"o4 C Ap(s t, parte $o mosto $e # transferi$o para o biorreator % e o "olume $e ambos completa$o com mosto no"o. * assim sucessi"amente...

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6escont0nuo Alimenta$o Caracteri!am'se pela alimenta+&o (intermitente ou cont0nua) $e mosto ao fermenta$or. :or que operar $esta forma< )anter bai1os n0"eis $e nutrientes para minimi!ar a repress&o catab(lica4 A$icionar precursores para os pro$utos $ese;a$os4 A$icionar componentes re/ulat(rios, como in$utores, em al/uma etapa4 *sten$er a fase estacion5ria, pela a$i+&o $e nutrientes. 6efinin$o: =(t) "a!&o "olumtrica $a corrente $e alimenta+&o ci(t) concentra+&o $o componente i na corrente $e entra$a o balan+o para o componente i ser5:
d [Vr ci ] = Vr ri + F )t ( cif dt

>)

&e alim E meio E

d [ Vr ] = F )t ( dt
'ara cte

d [Vr ] =F )t ( dt

9 )

Biorreatores
6escont0nuo Alimenta$o

+erivando a e"uao >), e substituindo 9) em A), vem

d F )t ( [ ci ] = ri + )cif ci ( dt Vr

?)

3e ri con.eci$o as equa+-es (%) e (>) po$em ser utili!a$as para estu$ar $iferentes estrat/ias $e alimenta+&o, =(t), na performance $o reator.

d [Vr ] =F )t ( dt

Biorreatores
6escont0nuo alimenta$o (?fe$ batc.@) Fnicialmente se introdu- o inoculo, ocupando um uma frao do volume Gtil da ordem de A= a >=H, iniciando-se ento a alimentao com o meio de cultura, a uma va-o ade"uada, sem ocorrer a retirada de l,"uido processado< Essa operao prolonga-se at o preenc0imento do volume Gtil do reator, "uando ento inicia-se a retirada do caldo processado para a recuperao do produto.< 'ode-se incluir a essas opera#es o reciclo de clulas a fim de se iniciar um novo per,odo de alimentao. A alimentao pode ser constante ou intermitente, com va-#es constantes ou no. /omo tambm, podese variar a composio do meio de alimentao. 4 processo descont,nuo alimentado pode ser dividido em dois grupos, baseados no fato de a adio de substrato ser ou no controlada por um mecanismo de retroalimentao. Io modo de operao com controle por retroalimentao, o fornecimento de substrato pode ser controlado em funo da concentrao deste no meio controle direto) ou em funo de outros parJmetros controle indireto)Ktais como densidade !ptica, pL, "uociente respirat!rio, e outros.

Biorreatores
6escont0nuo alimenta$o (?fe$ batc.@) Fnicialmente se introdu- o inoculo, ocupando um uma frao do volume Gtil da ordem de A= a >=H, iniciando-se ento a alimentao com o meio de cultura, a uma va-o ade"uada, sem ocorrer a retirada de l,"uido processado< Essa operao prolonga-se at o preenc0imento do volume Gtil do reator, "uando ento inicia-se a retirada do caldo processado para a recuperao do produto.< 'ode-se incluir a essas opera#es o reciclo de clulas a fim de se iniciar um novo per,odo de alimentao. A alimentao pode ser constante ou intermitente, com va-#es constantes ou no. /omo tambm, podese variar a composio do meio de alimentao. 4 processo descont,nuo alimentado pode ser dividido em dois grupos, baseados no fato de a adio de substrato ser ou no controlada por um mecanismo de retroalimentao. Io modo de operao com controle por retroalimentao, o fornecimento de substrato pode ser controlado em funo da concentrao deste no meio controle direto) ou em funo de outros parJmetros controle indireto)Ktais como densidade !ptica, pL, "uociente respirat!rio, e outros.

%iorreatores
3emicont0nuo 4 sistema semicont,nuo diferencia-se do descont,nuo alimentado, pelo fato de se retirar o l,"uido processado e se proceder o preenc0imento do reator a uma va-o muito elevada, de forma a imaginar "ue o reator este5a sendo preenc0ido instantaneamente< Ao final do novo ciclo, procede-se novamente 7 retirada de uma dada frao do volume, 9= a 8=H e se preenc0e o reator instantaneamente< Ia prtica, para grandes volumes esse preenc0imento cont,nuo no ocorre, recaindo no reator descont,nuo alimentado< +e "ual"uer forma, trata-se de uma tcnica distinta, na "ual est embutida a idia a operao por c0o"ues de carga de substrato< Alertamos sobre a possibilidade de uso de misturas de conceito descont,nuo, cont,nuo, descont,nuo alimentado), a fim de se conseguir o m*imo de desempen0o de um dado sistema biol!gico, reforando a idia sobre a enorme fle*ibilidade "ue disp#e para a operao de um biorreator.

Biorreatores
Cont0nuo
)
Alimentao $

*f sf pf

& p

Efluente

Mr

$ & p

Aanta/ens: As clulas po$em ser manti$as em esta$o fisiol(/ico e crescimento constantes. A ta1a $e $ilui+&o po$e ser a;usta$a pela mu$an+a na "a!&o $e alimenta+&o4 Culti"o mais lon/o que a batela$a4 :equena pro$uti"i$a$e no in0cio $a fermenta+&o4 :ermite que o culti"o se;a acopla$o a outras opera+-es $a planta, otimi!an$o assim a pro$uti"i$a$e total $a planta4 Reatores e equipamentos associa$os menores, /eran$o menor custo e maior lucro4

6es"anta/ens: Nem to$os os pro$utos s&o bem pro$u!i$os em sistema cont0nuo. :. e1., para total $esen"ol"imento $e sabor, al/umas bebi$as e alimentos requerem que os pro$utos celulares se;am libera$os em $iferentes fases $o crescimento em batela$a. Como a cultura cont0nua mantm as clulas no mesmo esta$o fisiol(/ico o pro$uto resultante /eralmente $e quali$a$e inferior4 )aior risco $e contamina+&o4 B uso $e culturas cont0nuas para pro$u+&o $e pro$utos terapCuticos n&o recomen$a$o4 B processo em batela$a bem estabeleci$o e $e f5cil enten$imento. )u$ar $e batela$a para cont0nuo representa um /ran$e risco, que a maioria $os empres5rios preferem n&o assumir.

Cont0nuo Io processo cont,nuo procura-se estabelecer um flu*o cont,nuo de l,"uido atravs do reator, ou reatores dispostos em srie< A operao de um sistema cont,nuo, constitu,do por vrios reatores em srie, no "ual a alimentao de um dado reator da srie o efluente do reator anterior, visa o estabelecimento de diferentes condi#es nos vrios biorreatores da srie< 4 reator cont,nuo permite o reciclo de clulas< 4 l,"uido bioprocessado, efluente de um dado biorreator, pode ser submetido a um sistema de separao dos microrganismos, os "uais podem ser retornados ao volume de reao, sendo l,"uido enviado para recuperao do produto< Em se tratando de reatores em srie, essa operao pode ser efetuada em "ual"uer reator da srie, retornando-se o microrganismo para o fermentador mais ade"uado.

Biorreatores

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Aanta/ens e $es"anta/ens $o processo cont0nuo em rela+&o ao processo $escont0nuo As principais vantagens apresentadas pelo processo cont,nuo, em relao ao descont,nuo, tradicional, so decorrentes da operao em estado estacionrio, podendo- se destacarN aumento da produtividade do processo, em virtude de uma reduo dos tempos mortos ou no produtivos< obteno de caldo bioprocessado uniforme, o "ue facilita o pro5eto das opera#es unitrias de recuperao e purificao do produto de interesse do3nstream)< manuteno das clulas em um mesmo estado fisiol!gico< possibilidade de associao com outras opera#es cont,nuas na lin0a de produo< maior facilidade no emprego de controles avanados< menor necessidade de mo de obra.

Aanta/ens e $es"anta/ens $o processo cont0nuo em rela+&o ao processo $escont0nuo Entretanto, ao lado das inGmeras vantagens apontadas, o processo cont,nuo apresenta tambm algumas desvantagens ou problemas prticos como por e*emploN maior investimento fi*o na planta< possibilidade de ocorrOncia de mutao gentica espontJnea, resultando da seleo de mutantes menos produtivos< maior possibilidade de ocorrOncia de contaminao, por se tratar de um sistema essencialmente aberto, necessitando de manuteno de condi#es de assepsia nos sistemas de alimentao e retirada de meio< dificuldade de manuteno de 0omogeneidade no reator, "uando se trabal0a com bai*as va-#es, ou "uando o caldo ad"uire comportamento pseudoplstico, como o caso do cultivo de fungos filamentosos< +ificuldade de operao em estado estacionrio em determinadas situa#es formao de espuma, crescimento do microrganismo nas paredes do reator, ou ainda nos sistemas de entra e sa,da de l,"uido.

Biorreatores

Biorreatores
A principal aplicao no tratamento de efluentes plantas de lodo ativado, digestores e tan"ues anaer!bios). &o bastante utili-ados nesta rea por"ueN A. como no 0 e*igOncia de culturas puras no e*iste problema com contaminao< >. os reatores cont,nuos tOm sido largamente utili-ados e o seu uso no considerado um risco< 9. como o volume de processamento muito grande, o uso de batelada no seria prtico.

%iorreatores
%iorreatores em sistema cont,nuo tambm pode ser operado com clulas imobili-adas ou para catlise en-imtica (ambm pode ser operado com clulas imobili-adas ou para catlise en-imtica< 4s sistemas com agentes imobili-ados tOm como principal caracter,stica o uso de algumas estruturas f,sicas de confinamento "ue obriga os agentes do bioprocesso a permanecerem em uma regio particular do biorreator< A opo entre as formas solGvel e imobili-ada de uso de uma en-ima ou clula< +epende da nature-a do processo de converso e da estabilidade operacional das duas formas.

%iorreatores
No caso $as clulas imobili!a$as .5 que consi$erar $ois tipos $e bioprocessos: 1. Aquele que utili!a uma ou al/umas en!imas conti$as nas clula, n&o .a"en$o necessi$a$e $e coen!imas e "ias anab(licas presentes na replica+&o celular. As clulas n&o necessitam estar "i"as quan$o imobili!a$as4 3omente $e"e estar ati"o o sistema en!im5tico en"ol"i$o na con"ers&o bioqu0mica requeri$a. #. Dtili!a clulas imobili!a$a em que se imp-e a necessi$a$e $e manter a "iabili$a$e celular, uma "e! que os pro$utos a serem forma$os requerem mEltiplos passos $e transforma+-es, re/enera+&o $e coen!imas, presen+a $e ca$eia respirat(ria, "ias metab(licas /era$oras $e interme$i5rios e outros mecanismos inerentes Fs clulas "i"as.

%iorreatores
As principais "anta/ens $a utili!a+&o $e a/entes biotecnol(/icos imobili!a$os s&o: ' possibili$a$e $e utili!a+&o $e altas concentra+-es $o a/ente no "olume reacional, implican$o em maiores "eloci$a$es $e processamento4 ' opera+&o $e sistemas cont0nuos F "a!&o espec0fica $e alimenta+&o4 ' maior prote+&o ao sistema biol(/ico em rela+&o ao estresse ambiental, ocasiona$o por ele"a$as concentra+-es $e substrato, pG e cisal.amento4 ' reuso $o a/ente $e bioprocesso4 ' re$u+&o $o in"estimento fi1o nas instala+-es4 ' re$u+&o $o custo operacional.

Biorreatores
:ARH)*TRB3 6* :RBI*TB * B:*RAJKB 6B 3TB (3TIRR*6 TANL BIBR*ACTBR)

Meometria Meralmente s&o cil0n$ricos.4 Constru0$os em $imens-es pa$r&o publica$as pela International Standards Organisation e British Standards Institution; *sses pa$r-es le"am em conta critrios $e efeti"i$a$e e estruturais.

Biorreatores

6a, $iNmetro total $o impeli$or O,P, altura e lar/ura $as p5s $o impeli$or Gt, altura $o biorreator Gl, altura m51ima $o l0qui$o *, $istNncia m$ia entre o impeli$or e a sa0$a $e /5s 6b, lar/ura $a c.icana 6t, $iNmetro $o biorreator

%iorreatorores
'or e*emplo, para um biorreator e"uipado com c0icanas e suprimento de arN
Ra*o 0ltura do l-1uido do reator e altura do reator 0ltura do reator e di8metro do tan1ue Di8metro do impelidor e di8metro do tan1ue Di8metro das c%icanas e di8metro do tan1ue 0ltura da pA do impelidor e di8metro do impelidor $argura da pA do impelidor e di8metro do impelidor Dist8ncia mdia entre o impelidor e a sa-da de gAs e altura da pA 2t 2l 2t Dt +alores ,-picos ./S

Da Dt Db Dt B Da $ Da <B

Depende do n-7el de espuma 3 '&4 5 '&6 produ*ido durante a fermentao Reatores europeus tendem a 395: ser mais altos 1ue os pro;etados nos <=0 Reatores com turb" Rus%ton so geralmente 9 > do 9>?9: di8metro do tan1ue" .s de flu@o a@ial so maiores 3'&'6 ? '&9 '&: '&:C 9

%iorreatores
Componentes B5sicos &istema de agitao< &istema de distribuio de 4>< &istema de controle de espuma< &istema de controle de temperatura< &istema de controle de pL< 'ortas de amostragem< &istema de limpe-a e esterili-ao< Pin0as para esva-iar o biorreator.