U N I V E R S I D A D DEL M A R ESCUELA DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

INSEMINACIN ARTIFICIAL EN PEQUEOS ANIMALES

ITALO ANDRS VERGARA URIBE TALCA CHILE 2013.

La Inseminacin Artificial (I.A.) es una tcnica que se realiza en el tracto reproductor de la hembra y hace referencia a la introduccin de semen por cualquier mtodo sin que se lleve a cabo la cpula y eyaculacin del perro en la hembra. El primer informe sobre el uso de I.A. en animales domsticos data de 1780, insemin una perra con semen fresco. Posteriormente 1960 se insemin con semen refrigerado y en 1969 se preo una perra usando semen congelado. El ciclo estral : monoestrica estacional; es decir, presenta un nico ciclo sexual por poca de celo, en el que se produce una sola ovulacin de varios vulos. El ciclo sexual de la perra dura aproximadamente 21 das. Para realizar una buena I.A. es necesario hacer algunas pruebas para evaluar tanto a la hembra como al macho con el fin de asegurar una buena inseminacin. Existen varias tcnicas de inseminacin entre ellas tenemos: Inseminacin Artificial Vaginal que se realiza en el la vagina de la perra y la Inseminacin Artificial Intrauterina: catter noruego/escandinavo, endoscopa transcervical y/o quirrgica que se realizan en el tero .

Ovarios: produccin de vulos y la secrecin de hormonas. Oviducto: comunicacin entre el ovario y el tero, estn formados por tres porciones: Infundbulo, mpula (se realiza la fecundacin) y el Istmo. tero: Formado por cuernos, cuerpo y crvix. Es bicornual V. transporte de vulos y espermatozoides, alojamiento y anidacin de los cigotos, portador de la gestacin. Vagina: Estructura fibromuscular va desde crvix al MUE, funcin cpula, proteccin frente a microorganismos. Vestbulo: Porcin que se extiende de la vulva a la vagina, en el piso se encuentra la uretra, en la regin vagino-vestibular se encuentra cngulum lugar donde se abotona el bulbo del pene, tiene como funcin la produccin se secrecin para lubricacin. Vulva: Orificio urogenital externo de la perra, est formado por dos labios que forman una comisura dorsal y una ventral, poseen una mucosa lisa. Cltoris: Homlogo del pene en la hembra, se encuentra situado en la fosa del cltoris, su funcin es la estimulacin sexual (Pramo, n.d.)

El ciclo estral de la perra tiene caracterstica propias que la hace diferente al de otras especies. Posee una etapa ltea y por lo tanto una etapa progestacional muy prolongada, que adems se presenta independientemente de que la perra est o no gestante. Las etapas del ciclo estral se puede dividir en: Pro-estro, Estro, Diestro, Anestro. Para poder determinar el momento ptimo para se realice la monta; es decir, cuando la ovulacin esta por ocurrir; no es fcil, porque los eventos observables (aceptacin o rechazo del macho) u otros signos clnicos (presencia de secrecin serosanguinolenta e inflamacin de vulva) no necesariamente ocurren en sincrona con la ovulacin (Pramo, n.d.).

Debido a lo anterior es necesario utilizar otro tipo de herramientas que permitan determinar de forma precisa el momento de ovulacin y el xito de la inseminacin. Algunas tcnicas que se pueden realizar son: determinacin de niveles de progesterona sangunea (P4), por Radio Inmuno Ensayo (R.I.A.), por ELISA o por medio de la citologa vaginal exfoliativa (Pramo, n.d.). DETERMINACIN DE LOS NIVELES DE P4. Adems de producir estrgenos (E2), se luteiniza antes de ovular o sea que produce P4, por lo tanto a medida que va creciendo, va incrementndose la produccin de P4, lo que permite determinar ms precisa la ovulacin. Cuando la hembra posee entre 4.00 10.00 ng/mL de P4 en la sangre ocurre la ovulacin y el da ptimo para cruzar la perra es 2 das post-ovulacin.

El estro no siempre ocurre en forma normal, se puede alterar su longitud o intensidad. Estro dividido: se presenta el proestro con todos los signos clnicos clsico, pero a los pocos das desaparecen para reiniciarse una o dos semanas despus. Estro silencioso o falso anestro: donde los signos clnicos son tan dbiles que pueden pasar desapercibidos, dando la impresin de ausencia de ciclo, sin embargo ocurre la ovulacin. Estro prolongado: Se presenta por el sangrado de proestro que puede ser hasta 20 das y que se contina con el inicio del estro, dando como resultado sangrados de hasta 30 das (Pramo, n.d.)

La CVE se fundamenta en la influencia hormonal que se produce durante el ciclo estral, la mucosa vaginal se engrosa y a su vez las capas superficiales se desprenden o descaman. En particular es importante determinar el momento preciso, cuando se hace la inseminacin con semen congelado, ya que es un procedimiento ms costoso y por ende es ms importante que sea exitoso. La CVE, por ser de fcil acceso, simple y econmica, es muy utilizada.

Se debe realizar rutinariamente, ya que es una parte fundamental del manejo reproductivo en los caninos. Las evaluaciones reproductivas tambin dependen de que se logre recolectar el semen apropiadamente y de una precisa valoracin del mismo. Pubertad. Historia Clnica. Examen Fsico General. Examen Aparato Reproductor. Evaluacin del Libido.

Para inseminar una perra se puede usar semen fresco, refrigerado o congelado. La tcnica a usar para realizar la IA y el momento de la inseminacin, depender del tipo de semen a usar.

I.A. semen fresco: brindar resultados comparables (% de preez y tamao de la camada) con los obtenidos mediante monta natural. La tcnica se utiliza en la I. A.V I.A. con semen refrigerado: mediante el agregado de diluyentes, el semen puede ser refrigerado y de esta manera conservado y transportado. Las bajas T disminuyen las tasas metablicas del espermatozoide y prolongan su longevidad., para incrementar el xito se debe de inseminar lo ms cerca posible al da de la coleccin y la ovulacin. La tcnica se utiliza en la I.A.V. IA con semen congelado: debido a que se disminuye considerablemente la viabilidad de los espermatozoides durante el proceso congelado-descongelado, la IA debe ser realizada con un nmero de espermatozoides vivos y competentes al descongelado, suficientes para obtener una alta probabilidad de fertilizacin. La tcnica se utiliza en la I.A.U.

3 formas para realizar la coleccin de semen: masturbacin, electroeyaculacin y mtodos farmacolgicos. En el perro la recoleccin del semen se lleva a cabo por la manipulacin digital o masturbacin, ya que el mayor estimulo del perro es la presin y generalmente este manejo no causa estrs en los perros. La electroeyaculacin se utiliza generalmente en perros salvajes y se realiza bajo anestesia. La recoleccin con mtodos farmacolgicos se sigue estudiando (en un estudio utilizaron xilazina y pilocarpina).

Antes de la coleccin de semen se debe tener presente cuando se hizo la ltima coleccin o cuando se realizo la ltima monta, ya que esto puede alterar los resultados de la evaluacin de semen.

Los materiales que se utiliza para la coleccin de semen son:

Guantes (vinilo o ltex). Embudo de vidrio, copa de vidrio o cono de ltex (tratado especialmente). Tubo de ensayo (vidrio o plstico). Gel lubricante (a base de agua sin espermaticida). De preferencia el material para la recoleccin debe estar esterilizado.

El recolector se debe de colocar del lado izquierdo con el dispositivo de recoleccin. Se inicia dando un masaje sobre el pene, especialmente donde se encuentra el bulbo. El bulbo del pene se sostiene con los dedos pulgar e ndice para evitar que el prepucio regrese, se contina estimulando para que el perro complete su ereccin, se observar un movimiento de cabalgue, se ejerce una ligera presin, se pasa el miembro posterior sobre el brazo y se rota el pene 180 simulando el abotonamiento, en este momento el perro debe de estar eyaculando, se sigue presionando el bulbo del perro simulando la copula hasta que se colecte el material de inters. Antes de que se retire el perro siempre se tiene que revisar que el pene haya envainado correctamente.

La evaluacin del semen complementa el examen reproductivo. ANLISIS MACROSCPICO Volumen: depende de la talla, la edad, la frecuencia del procedimiento y la cantidad recolectada del lquido prosttico, puede ser de 1 a 80 mL. Color: el color del eyaculado debe ser de blanquecino a blanco lechoso. PH: se mide con tiras reactivas, se considera normal de 6.5 a 7.

ANLISIS MICROSCPICO. Motilidad: demuestra la capacidad funcional y estructural de un espermatozoide. Concentracin: la concentracin de espermatozoides debe ser mayor a 100 millones/mL. Morfologa: se evala el %de espermatozoides anormales en el eyaculado. Mortalidad: se evala el porcentaje de espermatozoides muertos en el eyaculado (mximo para considerar es 5%).

La I.A. consiste en depositar el semen, dentro de la vagina de la perra, por otro medio que no se directamente la monta y eyaculacin del perro dentro de la hembra. Para este fin se puede utilizar el semen fresco, refrigerado o congelado (Pramo, n.d.). El primer informe I.A. en 1780, se obtuvo cachorros despus de inseminar una perra con semen fresco, en 1960 se uso de semen canino refrigerado y en 1969 informa de la primera preez lograda en perras usando semen canino congelado. Esta biotecnologa puede ser de moderada o alta complejidad, de bajo o mediano costo, segn la tcnica y el tipo de semen utilizado. En cada caso brinda diferentes posibilidades, otorgando siempre grandes beneficios en la reproduccin canina.

Se indica cuando el macho o la hembra tienen un problema que impide el apareamiento natural. o Hembras nerviosas o con problemas de conducta. o Defectos fsicos, adquiridos o congnitos. o Machos en los cuales la ereccin del pene ocurre demasiado temprano, imposibilitando la penetracin debido al engrosamiento del glande. o Machos de menor tamao que las hembras, lo cul imposibilita la monta. o Machos con problemas psicolgicos de comportamiento sumiso o timidez, inexperiencia, desagrado por la pareja, libido disminuida o alteraciones de la ereccin. o Hembras con vagina estrecha, lo que dificulta la penetracin y origina dolor. o Para evitar el contagio de enfermedades venreas infectocontagiosas. DESVENTAJAS DE LA I.A. Se puede favorecer la transmisin de enfermedades hereditarias. Se requiere de mayor capacitacin para realizar la IA. Se puede lastimar al macho y a la hembra. Costo

Como esta tcnica se hace posible utilizar semen importado refrigerado o congelado. Evitando as tener que adquirir un semental muy costoso, o transportar el semental, hace posible obtener mejoras genticas en la progenie. Para que la I.A. sea exitosa es importante que se haya evaluado previamente el semen del macho y en la hembra, que la citologa y la determinacin de los niveles de progesterona srica indiquen la proximidad a la ovulacin. El xito de la IA en caninos est ntimamente relacionado con: Estado de salud y nutricin de los reproductores. Deteccin del momento de mayor fertilidad de la hembra. Tipo, manejo y calidad del semen utilizado. Implementacin de una tcnica adecuada de IA.

Inseminacin Artificial Vaginal (IAV). Inseminacin Artificial Intrauterina: Catter noruego/escandinavo Endoscopa transcervical y/o Endoscopa quirrgica.

La eleccin de la tcnica ser de acuerdo con el semen a utilizar ya sea fresco, refrigerado o congelado.

Durante la monta natural el macho deposita el semen dentro de la vagina, la comprensin del tejido vaginal sobre el pene promueve que la eyaculacin sea directamente en el crvix. MATERIAL y MTODO. Con la I.A.V. el semen ser depositado en la vagina craneal, el material que se utiliza, es una pipeta de inseminacin, una jeringa sin embolo y una manguera de ltex. Todo estril.

Se carga la jeringa con semen, se deja un pequeo espacio con aire, la pipeta se introduce a travs de los labios vulvares en posicin vertical a 90dirigindose hacia dorsal, hasta que se siente el fornix, se levanta la vulva y se coloca la pipeta en posicin horizontal y se dirige hacia craneal se introduce lo ms posible y se deposita el semen. Para evitar que el semen quede en la porcin anterior de la pipeta, se retira la jeringa, se llena de aire y se conecta nuevamente para propulsarlo. El semen se deposita lo ms cercano al crvix, en el fornix. Una vez retirada la pipeta de la hembra se levanta por su tren posterior en posicin de carretilla y se mantiene de 5 a 10 minutos, se debe dar un ligero masaje en el cltoris para favorecer las contracciones uterinas.

La I.A.U puede realizarse depositando el semen en el tero, a travs de la cateterizacin de crvix o depositando el semen directamente en el cuerpo o en los cuernos uterinos en forma quirrgica. Cuando la IA se realiza intrauterinamente, ya sea con semen fresco, refrigerado o congelado, se consiguen mejores resultados que con la deposicin de semen en la vagina.

Por medio del catter noruego es absolutamente esencial se aprenda a localizar el crvix por palpacin abdominal para poder depositar el semen en el lugar correcto y evitar daar a la perra. La perra debe tener el estmago y la vejiga vaca para facilitar el procedimiento. El catter tiene una longitud de 30 cm de largo adecuado para perras de raza pequea y mediana. Esta inseminacin se realiza con la perra parada sobre el piso sobre una mesa, muchas perras en estro aceptan este tipo de manejo. El catter se introduce hasta que su extremo alcanza el fornix. El crvix se fija entre los dedos pulgar e ndice. La punta del catter se empuja repetidamente contra la superficie del crvix en busca de la apertura del canal cervical, luego se fija el catter y se comienza a manipular el crvix contra el catter. La jeringa que contiene el semen se conecta al catter y el semen lentamente se deposita en el tero. El catter se saca y los miembros posteriores se elevan y la perra se mantiene en esta posicin por 5 - 10 minutos, para minimizar el reflujo de semen y para facilitar el transporte uterino de los espermatozoides hacia los oviductos. La perra debe tambin ser masajeada suavemente alrededor de la regin perineal y el cltoris ya que esto estimula las contracciones uterinas.

Tcnica alternativa al catter Noruego. Esta tcnica permite la visualizacin del crvix, usando un endoscopio rgido, y el paso de un catter plstico a travs del canal cervical. Esta tcnica es que juntos, el veterinario y el cliente, pueden observar y confirmar el depsito intrauterino del semen. El endoscopio es introducido a travs de la comisura dorsal de los labios vulvares para evitar el contacto con el cltoris y el orificio uretral. Los pliegues vaginales confirman la posicin del endoscopio en la vagina. El endoscopio se hace avanzar por el lumen de la vagina. Una vez ubicado, la punta del catter se hace avanzar dentro manipulando al endoscopio y al catter al mismo tiempo. El catter se avanza suavemente mediante movimientos rotatorios para facilitar su paso por el canal cervical. Para poder inseminar, el catter debe avanzarse lo ms posible hacia delante. El semen es depositado suavemente, hay que observar para asegurarse de que no haya reflujo. La tcnica de IET involucra una cantidad mnima de estrs para la perra y es posible inseminar repetidamente. Cuando el semen es de menor calidad, las inseminaciones repetidas permiten que se deposite ms semen durante un periodo extendido de tiempo. Cuando la IET se emplea con semen fresco o con semen refrigerado es posible conseguir mejores resultados que con la deposicin de semen en vagina (congelado).

Se han empleado diversos procedimientos quirrgicos, la laparotoma o celiotoma con la perra bajo anestesia general y en decbito dorsal. La regin ventral del abdomen se rasura y despus de la preparacin quirrgica se realiza una incisin de 4 a 6 cm en el tercio medio entre el pubis y la cicatriz umbilical, se localizan los cuernos uterinos y se elevan a travs de la incisin, se tienen dos opciones; cateterizar los cuernos uterinos o el cuerpo del tero. Se carga el semen en una jeringa y se introduce dentro del lumen, el semen debe ser inyectado lentamente, se retira el catter y se aplica presin por un minuto con una gasa hmeda en el sitio de la perforacin, se regresa el tero al abdomen y la herida se cierra utilizando la metodologa habitual. Los riesgos de infeccin y los asociados con la ciruga en general, as como el nmero de I.A. quirrgicas que pueden realizarse en una perra son grandes desventajas. La laparoscopia es otra tcnica, que puede ser una alternativa ms aceptable al no ser tan invasiva, se realizan de 3 a 5 orificios pequeos de 0.5 a 1 cm en el abdomen, a travs de los cuales se introducen los instrumentos laparoscpicos que incluyen; cmara de video, telescopio e instrumentos quirrgicos. Reduce adems en gran medida el riesgo de hemorragias y otras complicaciones, porque los cortes y la manipulacin de vsceras son mnimos. Sin embargo el riesgo de la anestesia y el riesgo infecciones es un factor cuestionable.

Para lograr inseminacin artificial exitosa es necesario conocer el ciclo sexual de la hembra, el momento ptimo del estro para que se produzca la ovulacin. Para conocer el momento preciso para realizar la inseminacin artificial en la hembra se debe medir la cantidad de progesterona a nivel sanguneo y realizar una citologa vaginal exfoliativa. Con la sincronizacin de celos de las hembras se podr inseminar a todas de una sola vez, lo que permitir tambin sincronizar el nacimiento de las cras de stas. Se debe realizar una revisin sistemtica en la zona genital del macho, libre de afecciones o enfermedades que pueda transmitir. Dependiendo del estado del semen; ya sea fresco, refrigerado o congelado se va a ocupar la tcnica de inseminacin correspondiente; ya sea inseminacin artificial vaginal o inseminacin artificial intrauterina. La inseminacin artificial realizada con semen congelado es una de las ms costosas. Las caractersticas del semen utilizado en inseminacin artificial son de machos que poseen un alto nivel de fertilidad. El mtodo de inseminacin artificial se debe utilizar cuando el macho o la hembra presentan algn problema que impida apareamiento natural.

Pramo, R. M. n.d. Anatoma Reproductiva del Macho y de la Hembra Caninos: Manual de Prcticas en Manejo Reproductivo de Perros. [en lnea]. http://www.fmvz.unam.mx/fmvz/licenciatura/coepa/archivos/Manuales/52_R eproduccion_Perros.pdf .[Consulta: 10 diciembre 2013] Federacin Canfila Mexicana, A.C.: Manual de Reproduccin Canina. [en lnea]. http://www.fcm.mx/clinica/IA/Manual%20modoficado.pdf. [Consulta: 12 diciembre 2013] Snchez, A., & Rubilar, J. (2001). Obtencin de cachorros mediante inseminacin artificial con semen canino refrigerado.: Primera descripcin en Chile. [en lnea]. Archivos de medicina veterinaria, 33(1), 105-110. http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0301732X2001000100012&script=sci_arttext. [Consulta 15 diciembre 2013]. Lucas X. (2011). Centro Veterinario: Inseminacin Artificial en Perros: Estado actual de las tcnicas. [en lnea]. 46 (1). Julio Agosto 2011. http://www.amvac.es/docs/revistaCentro/CV46.pdf . [Consulta 15 diciembre 2013].