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Anlise instrumental Espectroscopia molecular

Prof Osvaldo Kojiro Iha

Introduo
Colesterol Bom e ruim LDL (Low Density lipoprotein) Colesterol ruim; Forma placas nas artrias HDL (High-density lipoprotein) Agem para remover o excesso de colesterol no organismo e carreg-lo de volta ao fgado O desequilbrio de qualquer um dos dois causa problema cardiovascular Espectroscopia muito utilizado em laboratrio de anlises clinicas na deteco do colesterol, assim como muitas molculas de interesse para diagnsticos e o tratamento de doenas

Espectroscopia Molecular
o que espectroscopia molecular? Exame das interaes entre a luz e as molculas As molculas podem absorver, emitir e dispersar luz Ferramenta til para promover informaes qualitativa e quantitativa

Espectroscopia Molecular
Como a espectroscopia molecular usada na anlise qumica? Espectroscopia de infravermelho Anlise qualitativa Identificar substncias moleculares Espectroscopia de ultra violeta (UV-Vis) Anlises quantitativa ou em triagem Primeira tcnica Colometria O analito era combinado com um reagente que formar um produto colorido A cor do produto comparado com padres Espectroscopia serve para identificar a substncia qumica e analisar a sua estrutura

Espectroscopia de ultravioleta-visvel
Espectroscopia de ultravioleta visvel Chamado de (UV-Vis) Capacidade que um analito tem de interagir com o raio ultravioleta ou com a luz visvel por meio de absoro A propriedade que uma molcula tem de absorver luz chamada de cromforo Nas ligaes nos orbitais p, d ou f Esse tipo de absoro ocorre em muitos complexos inorgnicos O colesterol tem uma banda entre 225 e 260 nm como pode ser visto na figura

Espectroscopia de ultravioleta-visvel
Instrumentao para espectroscopia de UV-Vis Componentes de sistema comuns Espectroscopia de absorbncia O equipamento est dividido em: fonte de luz, seleo de tipo de luz para anlise, recipiente de amostra e um detector Luz utilizado Lmpada de Tugstnio Este filamento utilizado por aguentar altas temperaturas tem um comprimento de onda mximo que depende da temperatura (2.000 a 3.000 K) Comprimento de onda 320 a 2.500 nm Emite na regio do visvel Emite quase toda a radiao no infravermelho e no visvel

Espectroscopia de ultravioleta-visvel
Na maioria das vezes utilizam prismas ou uma grade que separa os diversos comprimentos de ondas Prisma a luz passa pelo prisma e por uma fenda que escolhe o comprimento de onda

Espectroscopia de ultravioleta-visvel
Na maioria das vezes utilizam prismas ou uma grade que separa os diversos comprimentos de ondas Prisma a luz passa pelo prisma e por uma fenda que escolhe o comprimento de onda Instrumento de feixe simples ou de feixe duplo Feixe simples Tem apenas um caminho que a luz percorre pelo instrumento O detector mede a intensidade de luz remanescente que passa pela amostra Absorbncia e transmitncia so definidas pela relao da luz que passa atravs da amostra dividida pela luz que est entrando na amostra

Espectroscopia de ultravioleta-visvel
Feixe duplo a luz se divide de tal forma que metade passa pela soluo de referncia e a outra passa pela amostra Ajuda a minimizar qualquer erro causado por um desvio na intensidade da lmpada ou detector. Por qu? Por que se o sinal da lmpada ou do detector for alterada afetar tanto a amostra quanto o da referncia

Espectroscopia de ultravioleta-visvel
Aplicaes de espectroscopia de UV-Vis Medies diretas Colorimetria. Mistura da amostra com reagentes que do a colorao que detectada no detector Mtodo de adio de padro Mede a concentrao do analito que foi misturado com o padro Titulaes espectrofotomtricas Utilizao de indicadores e o espectrofotmetro

Espectroscopia no infravermelho
uma energia mais baixa que o UV-Vis O UV-Vis d energia necessria para que ocorra transio eletrnica Bohr A energia absorvida causa uma mudana na vibrao ou rotao da molcula Este estudo chamado de espectroscopia no infravermelho Tipos de vibraes Alongamento entre dois tomos, que o mais simples Rotao da molcula A energia ainda menor que a do alongamento (micro-ondas) Ex: H2O

Espectroscopia no infravermelho
Os IV so representados por um grfico de transmitncia %T versus nmero de onda (cm-1) ou em comprimento de onda (nm) A diferena com o UV-Vis o nmero de picos muito estreitos devido a quantidade vibracional da molcula, diferente do UV-Vis que d bandas largas
2800 a 3000 cm-1 movimento vibracional dos grupos funcionais C-H, 1200 cm-1 movimento de vibrao C-O 3400 cm-1 O-H. 1600 cm-1 movimento de deformao de ngulo das ligaes CH2 e CH3. no h espectro da banda C-C o movimento vibracional da ligao no afeta o momento de dipolo da molcula1.

um IV de etanol H3CCH2OH Ligaes C-H, C-O, O-H, C-C

Espectroscopia no infravermelho
Instrumentao para a espectroscopia no IV A fonte de luz uma haste inerte que aquecida a uma temperatura muito mais baixa que as aplicadas a fontes do visvel No utiliza vidros e slica fundida So opacos em comprimentos de ondas superiores a 2,5 m Por isso a fonte incandescente no deve estar em bulbo de vidro Carbeto de silcio (SiC) No pode usar um prisma de vidro ou de quartzo como monocromador Devido a absorbncia de radiao IV Usa grade com espaamento de 300 ranhuras/mm para comprimento de onda de 2 a 5 m e 100 ranhuras/mm para uso com luz em comprimento de onda de 5 a 16 m Vidros e quartzo no podem ser usados como recipiente de amostra Deve utilizar sais inicos como NaCl, KBr e CsBr que so transparentes a radiao IV

Espectroscopia no infravermelho
Esses materiais no so ideais para uso como recipiente por que no podem ser modelados, alm de dissolverem em gua Usam CaF2 e AgCl Instrumento de varredura e espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier Dificuldade do IV CO2 e H2O absorvem radiao no IV e obscurecem o espectro da amostra desejada Por isso utiliza espectro de feixe duplo FTIR Utiliza todos os comprimentos de onda da radiao IV que incidido sobre a amostra Utiliza o interfermetro Acarreta interferncia positiva e negativa em comprimento de onda sequenciais enquanto o espelho em movimento altera o comprimento de onda

Espectroscopia no infravermelho

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