Enzimas y Protenas de Inters Industrial

Enzimas
Casi todas las reacciones en clulas vivas son catalizadas y controladas por enzimas. 3.000 descritas 10.000 en la naturaleza Pocas o 1.000 o 100.00 Catalizadores biolgicos, convirtiendo sustancias en otros productos sin sufrir cambio alguno.

animales, plantas y microorganismos como fuentes de enzimas

Descubrimiento de enzimas digestivas siglo XIX. Desarrollo de mtodos para obtencin de enzimas de matanza de animales.

Pepsina del forro de estmago de cerdos y ganado, del cuajo del estmago de becerros. Ccteles de enzimas con tripsina, quimiotripsina, lipasas y amilasas del pncreas de cerdo.

animales, plantas y microorganismos como fuentes de enzimas

Plantas fuentes potenciales de enzimas a escala industrial. Granos, remojar y germinar, se convierten en malta que contiene amilasas y proteasas usadas en la produccin de cerveza y la destilacin de bebidas alcohlicas.

Siglo XIX, mtodos simples para obtencin de grandes cantidades de proteasas de la savia de plantas tropicales.

animales, plantas y microorganismos como fuentes de enzimas

Ablandadores de carne, digestin y limpieza de lentes de contacto.

Papaina y quimiopapaina del rbol de la papaya. Ficina de higueras.

Bromelaina del tallo de la planta de la pia.

animales, plantas y microorganismos como fuentes de enzimas

En Europa es difcil obtener enzimas de plantas. Suministro y concentracin de las enzimas vara con las estaciones del ao. Requerimiento de grandes cantidades de plantas como material. Procesamiento de grandes cantidades de plantas es un trabajo muy duro.

animales, plantas y microorganismos como fuentes de enzimas

Fcil manejo Alto rendimiento Estabilidad

Microorganismos como fuentes de enzimas

Produccin de grandes cantidades a bajo coste No afectada por las estaciones del ao Uso de mutantes y procesos de seleccin que aumentan la produccin Produccin de enzimas hechas a medida a travs de ingeniera gentica y diseo de protenas

Microorganismos como fuentes de enzimas

Enzimas hidrolticas simples como: proteasas, amilasas, pectinasas
Degradan polmeros naturales como protenas, almidones o pectina Enzimas extracelulares Poco especficas

Fcil extraccin Bajo coste

Microorganismos como fuentes de enzimas

Jokichi Takamine 1894
Enzima takadiastasa

A partir de hongos
Nutrientes y minerales al almidn de trigo. Inoculacin con esporas de Aspergillus orizae. Almacenamiento. Lavar con solucin de sal. Extraccin de enzimas, amilasa y proteasas, secretadas por las clulas fngicas.

Enzimas Microbianas y sus aplicaciones

Enzima
Amilasa

Fuente
Hongos Bacterias Hongos Bacterias Hongos Bacterias Bacterias

Aplicacin industrial
Pan Revestimientos amilceos Fabricacin de jarabe y glucosa Almidonado en fro de la ropa Ayuda digestiva Eliminacin de revestimientos Eliminacin de manchas; detergentes Pan Eliminacin de manchas Ablandador de la carne Limpieza de las heridas Eliminacin de revestimientos Detergente domstico Relleno de caramelos Eliminacin de glucosa y oxgeno, papeles para pruebas de la diabetes Jarabe de cereales rico en glucosa Prensado, clarificacin del vino Coagulacin de la leche Suavizante y abrillantador de tejidos; detergente Degradar la grasa Degradar la lactosa a glucosa y galactosa Replicacin del DNA por PCR

Industria
Panadera Papelera Alimentaria Almidn Farmacutica Textil Lavandera Panadera Limpieza en seco Crnica Medicina Textil Lavandera Confitera Alimentaria Farmacutica Bebidas refrescantes Zumos de frutas Quesera Lavandera Lechera, lavandera Lechera, alimentos Investigacin biolgica y forense

Proteasa

Hongos Bacterias Bacterias Bacterias Bacterias Bacterias

Invertasa Glucosa Oxidasa Glucosa Isomerasa Pectinasa Renina Celulasa Lipasa Lactasa DNA polimerasa

Levadura Hongos Bacterias Hongos Hongos Bacterias Hongos Hongos Bacterias; Archea

Aplicaciones de las Enzimas Microbianas

Enzima Amilasa Fuente Hongos Bacterias Hongos Bacterias Aplicacin industrial Pan Revestimientos amilceos Fabricacin de jarabe y glucosa Almidonado en fro de la ropa Industria Panadera Papelera Alimentaria Almidn

Hongos
Bacterias Bacterias

Ayuda digestiva
Eliminacin de revestimientos Eliminacin de manchas; detergentes

Farmacutica
Textil Lavandera

Amilasas
Amilasas Degradacin del polisacrido almidn. Almidn Compuesto de almacenamiento de energa en plantas (maz, arroz, patata, trigo). Fuente de nutricin muy importante en animales y humanos (70-80%). ltimos 20 aos las amilasas han reemplazado la hidrlisis cida. a-amilasa de Bacillus y glucoamilasa de Aspergillus. Sacarificacin genera mucha dextrosa, degradacin de almidn ms corta, sin tratamiento cido.

Amilasas Produccin de Cerveza

Reemplazo de malta por granos sin germinar de maz o arroz, prcticamente no contienen enzimas.

Se aaden enzimas, amilasas, glucanasas y proteasas, de hongos y bacterias.

Almidn a azcares que sufren fermentacin alcohlica por levaduras.

Amilasas Hornear pan

El uso de enzimas en panadera se ha vuelto popular.

Las amilasas aceleran la degradacin del almidn, y as aumenta el contenido de azcar en la masa, acelerando el proceso de fermentacin.

El volumen del pan preparado con enzimas aumenta.

Amilasas Desengomado
Desengomado. Las amilasas eliminan la goma protectora basada en almidn, para hacer la mezclilla elstica. Antes se haca con amilasas obtenidas de malta o de pncreas de animales, pero hoy en da se obtienen de bacterias. Enzimas resistentes a altas temperaturas para acelerar el proceso.

Aplicaciones de las Enzimas Microbianas

Enzima
Proteasa

Fuente
Hongos Bacterias Bacterias Bacterias Bacterias

Aplicacin industrial
Pan Eliminacin de manchas Ablandador de la carne Limpieza de las heridas Eliminacin de revestimientos

Industria
Panadera Limpieza en seco Crnica Medicina Textil

Bacterias

Detergente domstico

Lavandera

Proteasas Ablandan la carne

La papaya contiene altas concentraciones de las proteasas papaina y quimiopapaina. Degradan el tejido conectivo de la carne, como el colgeno y la elastina, hacindola ms tierna.

Proteasas Ablandan la carne

Se usan toneladas de papaina en polvo cada ao para ablandar la carne en muchos pases. Se frota la carne y se deja a temperatura ambiente varias horas. Ficina del rbol de higos y bromelaina de la planta de pia.

Proteasas Hornear pan

El gluten se degrada por proteasas obtenidas de hongos para hacer la masa ms fcil de manejar y aumenta su capacidad para retener burbujas de aire.
El gluten se une parcialmente al agua y tiene consistencia de gel. Las proteasas degradan las protenas pegajosas (gluten) en la masa.

Proteasas Suavizan el cuero

Las proteasas de microorganismos son altamente efectivas en la produccin de cuero. Despus de remover el pelo y antes de curtir, el cuero debe ser suavizado por un proceso conocido como rendido o purga. Antiguamente se sumerga en agua y estircol fermentado de perro o pjaro, que son un campo de cultivo para las bacterias que producen proteasas suavizantes de cuero.

Enzimas Microbianas y sus aplicaciones

Enzima Invertasa Glucosa Oxidasa Glucosa Isomerasa Pectinasa Renina Celulasa Fuente Levadura Hongos Bacterias Hongos Hongos Bacterias Aplicacin industrial Relleno de caramelos Eliminacin de glucosa y oxgeno, papeles para pruebas de la diabetes Jarabe de cereales rico en glucosa Prensado, clarificacin del vino Coagulacin de la leche Suavizante y abrillantador de tejidos; detergente Industria Confitera Alimentaria Farmacutica Bebidas refrescantes Zumos de frutas Quesera Lavandera

Lipasa
Lactasa DNA polimerasa

Hongos
Hongos Bacterias; Archea

Degradar la grasa
Degradar la lactosa a glucosa y galactosa Replicacin del DNA por PCR

Lechera, lavandera
Lechera, alimentos Investigacin biolgica y forense.

Pectinasas Produccin de zumo de frutas

Al prensar fruta y vegetales para la obtencin de jugo, las pectinas de alto peso molecular reducen la produccin. Pectinasas procedentes de cultivos sumergidos de Aspergillus y Rhizopus.

Se pica la fruta y se aaden pectinasas para degradar las pectinas de larga cadena.
Se reduce la viscosidad del zumo, facilitando la filtracin y se obtiene ms cantidad. Alimentacin de bebs, las pectinasas maceran las fruta y los vegetales para hacerlos ms suaves y fciles de comer.

La aplicacin ms importante de las enzimas hidrolticas

+ Las manchas que contienen protenas son difciles de remover. Protenas no se disuelven fcilmente en agua. + A altas temperaturas, la protena se cuaja en las fibras textiles y es ms difcil de eliminar. + Polvo, holln y materia orgnica como grasas, protenas, carbohidratos y pigmentos. Las grasas y las protenas actan como pegamento. + Los detergentes sueltan la grasa de la tela, las protenas permanecen en el material.

Detergentes biolgicos

La aplicacin ms importante de las enzimas hidrolticas

Detergentes biolgicos

Enzimas pancreticas poco estables y muy caras.

Produccin a gran escala de detergentes biolgicos 1960. Descubrimiento de la subtilisina de Bacillus lincheniformis. Activa bajo condiciones alcalinas.

La aplicacin ms importante de las enzimas hidrolticas

Detergentes biolgicos usados ampliamente, desde mediados 1960. Proteasas 1:50, actividad ptima durante el proceso de lavado. Poca especificidad. Omnvoros. Degradan protenas pegadas en aminocidos y pptidos de cadena corta. Las protenas son desprendidas de las fibras textiles y eliminadas.

Detergentes biolgicos

La aplicacin ms importante de las enzimas hidrolticas

Actividad ptima 50-60C. No necesita hervir.
La eliminacin enzimtica de manchas: proteasas, lipasas y amilasas. Disuelven manchas vino tinto, pasto, fruta, caf y te, y mezclas de manchas ms comunes. Helado de fruta, el yogurt o la salsa de tomate no slo contiene pigmento, tambin protenas y grasas. Salsa, ketchup y comidas preparadas contienen pigmento, protenas, grasas y almidn.

Detergentes biolgicos

La aplicacin ms importante de las enzimas hidrolticas

Detergentes biolgicos

Produccin de enzimas para detergentes

10-20 horas

10.000-100.000 litros 10-50 litros

5-15% almidn predegradado 2-3% harina de soja 2% protena de leche o gelatina fosfato Enfriamiento Las Las clulas clulas 10-20 Inoculacin productoras se a horas La temperatura centrifugan Esterilizacin bacteria Secado despus conde cultivo usa por y de enzimas se el con las cultivo spray. detecta sobrenadante fuentes puro vapor se Partculas 30-60C. de en cultivan 20-30 de cepa elnitrgeno medio se de de minutos en concentra pH Bacillus 0.5-2 biorreactores la neutro proteasa disponibles mm alicheniformis 121C por y cultivo subtilisina ultrafiltracin con agitacin bien aireado

Proteasas y Amilasas
Uso en detergentes: proteasas, amilasas, lipasas, reductasas, etc. Bacillus licheniformis Detergentes: medios alcalfilos pH 9-10 Amilasas y glucoamilasas en industria alimentaria. Jarabe de cereales rico en fructosa
Reaccin de clarificacin: a-amilasa (almidn acortado) Sacarificacin: glucoamilasa (genera glucosa) Isomerizacin: glucosa isomerasa (glucosa en fructosa)

Extremoenzimas
A)Temperatura - Psicrfilos - Mesfilos - Termfilo - Hipertermfilos
B) Acidez y alcalinidad Acidfilos Alcalfilos C) Disponibilidad de agua - Sal: Halfilos y Halfilos extremos - Azcar: Osmfilos - Secos: Xerfilos

Efecto de la temperatura sobre la velocidad de crecimiento y las consecuencias moleculares para las clulas

Relacin de la temperatura y velocidad de crecimiento

Microorganismos termfilos e hipertermfilos

Crecimiento de una cianobacteria termfila en un arroyo caliente en el parque nacional de Yellowstone

Microorganismos del mar de hielo antrtico

Ncleo de agua de mar permanentemente congelada. La coloracin densa es debida a microorganismos

Microfotografa de contraste d fases de microorganismos fototrficos de la muestra anterior. (Diatomeas o algas verdes)

Alga de la nieve

Chlamydomonas nivales

Microorganismos Acidfilos y Alcalfilos

Microorganismos y Actividad del Agua

Microorganismos y Actividad del Agua

Microorganismos y Actividad del Agua

Halfilos: crecen en altas concentraciones de sal
Discretos: 1-6% NaCl Moderados: 6-15% NaCl Extremos: 15-30% NaCl

Osmfilos: crecen en altas concentraciones de azcar Xerfilos: crecen en ambientes muy secos