Mecanismos de la reaccin.
Requisitos de la emisin QL.
Factores que influyen en la emisin QL.
Principales reacciones quimiolumisncentes
en fase liquida.
Instrumentacin de Lectura.
Sensibilidad.
Aplicaciones en Inmunodiagnstico.
QUIMIOLUMINISCENCIA: la emisin de
radiacin electromagntica (normalmente en la
regin del visible o del infrarrojo cercano)
producida por una Rx qumica.
ELECTROQUIMIOLUMINISCENCIA emisin
que se produce en solucin, a partir de un estado
electrnicamente excitado producido en una Rx de
transferencia de alta energa de un e
-
.
FUNDAMENTO
RADIACION ELECTROMAGNETICA
Intensidad
de emisin
es en
funcin de
la [ ] de las
especies
qumicas
implicadas
en la
reaccin.
Rx
qumica
QUIMIOLUMINISCENCIA
El sistema ptico no requiere de una
fuente externa de excitacin
substrato
INDIRECTA
DIRECTO
SUBSTRATO
OXIDANTE
+
+
COFACTORES
CATALIZADOR
PRODUCTO
FOTON
ESTADO
ELECTRONICAMENTE
EXCITADO
INDIRECTO
PRODUCTO
ENERGIA
SUBSTRATO
FLUOROFORO
TRANSFERENCIA
FOTON
ESTADO
ELECTRONICAMENTE
EXCITADO
La Rx debe ser EXOTRMICA y producir la suficiente
energa para formar el estado electrnicamente excitado.
El CAMINO de Rx debe ser FAVORABLE a
CANALIZAR la energa hacia la formacin de un estado
electrnicamente excitado.
La emisin de un fotn debe ser un proceso de
DESACTIVACIN DEL PRODUCTO EXCITADO
favorable en relacin a otros procesos no radiantes que
pueden aparecer en pequea proporcin.
La estructura qumica del precursor quimioluminiscente.
La naturaleza y concentracin de otras sustancias que
afectan el proceso de QL.
El catalizador seleccionado.
La presencia de iones metlicos.
La temperatura
pH y fuerza inica
La hidrofobicidad del disolvente y la composicin de la
disolucin.
V. RXS QL EN FASE LIQUIDA
ACILHIDRACIDAS
IMIDAZOLES
ESTERES DE ACRIDINA
Tris(2,2-bipiridina) rutenio (III)
PEROXIOXALATOS
REACCIONES BIOLUMINISCENTES
OXIDACIONES DIRECTAS
VII. SENSIBILIDAD
Alta
Rango de los femtomoles (pmol)
Hasta 0,1 pmol
10
5
veces ms sensible que la espectrometra de
absorcin.
10
3
veces ms sensible que la fluorimetra.
Marcadores tumorales (AFP, CEA, PSA, CA 125 II, etc).
Fertilidad (LH, FSH, PROL, testosterona, etc)
Anemia ( ferritina, Ac. Folico, Vit B12)
Hepatitis (HBsAg, anti-HBs, etc)
Funcin tiroidea (TSH, T3, T4, etc)
Marcadores cardiacos (TropT STAT, CK-MB STAT , Mioglobina) .
Marcadores seos (PTH, Osteocalcina, -CrossLaps, etc).
Marcadores de enfermedades infecciosas.
Enfermedades autoinmunes.
Otros (Insulina, Cortisol, Ig E, Peptido C)
Instrumentacin bsica y muy
sencilla.
Rangos dinmicos amplios.
Alta sensibilidad.
Gran versatilidad.
Instrumentacin bsica y muy
sencilla.
Dependencia de factores AMBIENTALES.
Falta de SELECTIVIDAD.
Variacin de la EMISIN en el TIEMPO.
BIBLIOGRAFIA
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electrogenerada del luminol usando electrodos de bajo
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Volume 2006, Article ID 67571, Pages 19