Prof.

Fredson Serejo

Mtodos de estudo
da Clula
Microscopia
O microscpio um
instrumento que permite
observar objetos no
visveis a olho nu.

Isto se consegue atravs
de um sistema ptico
composto por lentes
de cristal que aumentam
a imagem do objeto.
Microscopia de Luz
Evoluo do microscpio de luz
Galileu Galilei
inventou o Telescpio no
sculo XVI duas lentes
num tubo
Microscopia de Luz
Evoluo do microscpio de luz
Leeuwenhoek,
final de 1600
Microscopia de Luz
Evoluo do microscpio de luz
Robert Hooke
Microscopia de Luz
Evoluo do microscpio de luz
objetivas variando de 4X a 100X
sculo XVII
Microscopia de Luz
Microscpio monocular do incio modelo Zeiss, incio sculo XX
Louis Pasteur = microrganismos
Microscopia de Luz
Microscopia de Luz
Microscpio ptico, Microscpio composto ou
Microscpio de Campo claro
um instrumento usado pelo estudante de
citologia, histologia e outras disciplinas
que estudam microrganismos ou objetos
com medidas micromtricas e serve
para aumentar a imagem.

Basicamente, constitudo por uma
parte mecnica e uma parte
ptica.
Parte Mecnica
Base ou p
Coluna ou brao
Tubo
Revlver
Platina
Parafuso
Macromtrico
Parafuso
Micromtrico
Parte Mecnica
Base ou p suporte
Coluna ou brao apoio paras as estruturas
Tubo pea de ligao entre a ocular e o revlver
Revlver pea giratria que contm as lentes
objetivas
Platina suporta a preparao
Parafuso Macromtrico, de passo largo, para
movimento de grande amplitude
Parafuso Micromtrico, de pequeno passo,
destinado a focar o material
Parte ptica
Condensador
Lentes
objetivas
Lentes
oculares
Parte ptica

Condensador, concentra os raios
luminosos objeto
possui um diafragma de dimetro
modificvel, proporciona uma maior ou menor
intensidade luminosa

Lentes objetivas, prximas do objeto,
projetam a imagem ampliada do objeto em
direo a ocular

Lente ocular, funciona como uma lupa,
amplia a imagem fornecida pela objetiva
Parte ptica

CONDENSADOR geralmente
negligenciado - no interfere no
aumento da imagem, mas ele influencia
em sua nitidez e riqueza de detalhes

Age no LIMITE DA RESOLUO do
sistema ptico, embora esta propriedade
dependa principalmente das lentes
objetivas
LIMITE DE RESOLUO
LR de um microscpio a
capacidade de:

Separar detalhes

Produzir imagens separadas de
partculas muito prximas

a menor distncia que deve existir
entre dois pontos para que eles
apaream separado
As objetivas trazem outras informaes

160 ou 170, indica em milmetro o comprimento do
tubo do microscpio, onde devem ser usadas as
objetivas para que dem melhores resultados.

0,17, distncia de trabalho, que significa o tamanho
da lamnula, para a qual as aberraes so corrigidas.
Cdigos de cores das lentes objetivas
Aumento Cores
4X ou 5X Vermelho
10X Amarelo
40 ou 50X Azul claro
100X
Imerso leo
Branco
Imagem real ampliada e invertida
Outros tipos de microscpios

Microscpios pticos MO
Microscpio de Contraste de Fase
Microscpio de Campo Escuro
Microscpio de Fluorescncia
Microscpio de Polarizao

Microscpio Eletrnico ME
Microscpio de contraste de fase clulas vivas
Usa as propriedades da
refrao da luz
Refrao a passagem da
luz de um meio para outro.

Microscpio de contraste
de fase transforma
diferentes fases
luminosas em diferentes
intensidade luminosa
Microscopia de luz convencional Microscopia de contraste de fase
Microscpio de campo escuro
Condensador
substitudo por um
condensador de fundo
escuro

A preparao iluminada
por raios oblquos

A clula fica com
aparncia brilhante e o
fundo escuro
CONDENSADOR
LUZ
Objetiva
Microscopia de campo escuro - clulas de sangue.
Microscpio de Polarizao
Quando um raio de luz
atravessa certas substncias
do nosso corpo acontece
uma dupla refrao

Substncias como dentes,
ossos, fibras de colgeno e
outras possuem um estado
cristalino, arranjo molecular
interno

Prisma utiliza as propriedades
de um nico raio eliminando o
outro
2 raios de luz = Raios polarizados
Microscpio de luz polarizada:
Fibras de colgeno exibem
birrefringncia (brilhantes ou
amarelas).
Microscpio de Fluorescncia
Utiliza luz fluorescente
permite detectar protenas
ou estruturas marcadas
com compostos
fluorescentes

Similar ao MO, exceto pela
luz empregada Luz
ultra-violeta e pelos 2
conjuntos de filtros que
desviam os raios do olho do
observador.
Cultivo de astrcitos. Imunofluorescncia verde contra GFAP
(protena de filamentos intermedirios) e azul (unio com DNA)
Alberts et al. Biologa Molecular de la clula. (1996) p. 856.
Microscopia Eletrnica
Microscopia Eletrnica
Inventado em 1932,
na Alemanha, Ernest
Ruska e Max Knoll
Utiliza eltrons,
comprimento de onda
muito pequeno, limite
de resoluo 1.000X
menor que
microscpio de luz
Microscopia eletrnica, msculo estriado cardaco.
Medidas
Unidade de medida Smbolo Valor
Micrmetro
m
0,001 mm
Nanmetro
nm
0,000001 mm (10
-6

mm) ou 10
-3
m
M. E. de Varredura
M. E. de Transmisso
No laboratrio...
Epitlio pavimentoso estratificado queratinizado
Epiderme, cobre o corpo.
Glndulas sudorparas
Glndulas sebceas
Glndulas
sebceas
Glndulas
sudorpara