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Contar clulas

UNIVERSIDAD TECNICA DE AMBATO


FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERIA EN
ALIMENTOS
CARRERA BIOQUIMICA
DETERMINACION DE LA
CONCENTRACION DE
MICROORGANISMOS
INTEGRANTES:
GUIJARRO VIOLETA
TITUAA CARLOS
LALAEO SILVANA
VINICIO SOLIS

Contar clulas
Mtodos para contar clulas
Mtodos
para contar
clulas
Basados en la
microscopa
Hemocitmetro
Contador de Bacterias
UFC
Basados en
Colorantes
CUENTA VIABLE
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Crecimiento
Es la capacidad para multiplicarse que tienen las clulas individuales
esto es iniciar y completar una divisin celular
Involucra sntesis de estructuras celulares,cidos nucleicos,
protenas y otros componentes celulares a partir de nutrientes.
Todos los seres vivos toman nutrientes y excretan productos de
desecho.
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Biomasa
Es un trmino general que se refiere a los microorganismos
presentes en un sistema.
Se trata de una variable clara para establecer las tazas de
produccin, de consumo de nutrientes y el clculo de
los balances dems de cualquier proceso biolgico
Para determinar la biomasa es necesario calcular
el nmero de clulas en una determinada muestra.
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Determinacin de poblaciones
concentraciones de clulas
Determina la cantidad de individuos en un
medio de cultivo, (solido o liquido).
Para la determinacin de concentracin
de individuos se habla de unidad
formadora de colonias, (ufc).
Bacterias, hongos, algas, protozoos, sus
concentraciones se expresan en ufc/ml.

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Si la muestra de una solucin es muy
concentrada es imposible determinar su
numero de colonias, de 20 a 70 colonias
mayores a estos valores es difcil contar,
se realiza las diluciones de la muestra a
analizar.
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Diluciones para cuenta viable
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CUENTA VIABLE
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Cuenta viable
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CMARA DE
NEUBAUER O
HEMOCITMETRO
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El hemocitmetro o cmara de Neubauer
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(rojo)
(azul)
(verde)
(amarillo)
(gris)
1 mm
Profundidad = 0,1 mm
La cuadrcula del hemocitmetro
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Se introduce la suspensin de clulas en el hemocitmetro
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Observacin con microscopio ptico y recuento de clulas
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La regin de recuento del hemocitmetro
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Diferencias entre clulas vivas y muertas
Clula viva
Clula muerta
De las tres lneas,
la del centro es la
que corresponde al
lmite del cuadrado
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PARA SU DETERMINACION
N ESPORAS= ESPORAS
TOTALES / V
V= E(espesor) A(rea del
hemocitmetro
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La cmara de recuento del hemocitmetro
USO DE COLORANTES
Marcaje fluorescente con
naranja de acridina y
ioduro de propidio
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Naranja de acridina: atraviesa
la membrana celular y tie los
cidos nucleicos, generando una
intensa fluorescencia de color
verde a bajas concentraciones.
Ioduro de propidio: no
atraviesa la membrana de
clulas intactas, pero s la de
las clulas daadas. Se une a
los cidos nucleicos,
desplazando al naranja de
acridina y genera una intensa
fluorescencia de color rojo.
Viabilidad celular: Naranja de acridina + Ioduro de propidio
Clulas vivas
Clulas muertas
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Recuento de clulas con el hemocitmetro
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Recuento de clulas por anlisis de imagen
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UFC
(UNIDADES FORMADORAS
DE COLONIA)
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Calculo de numero de colonias
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3. Determinacin de metabolitos asociados a crecimiento
3.1 Mtodos Directos
Componentes de Pared celular
Protenas
cidos nucleicos

3.2 Mtodos Indirectos
Produccin de cidos orgnicos
Produccin de alcoholes y glcidos
Produccin de CO2
MTODOS PARA DETERMINAR EL CRECIMIENTO
MICROBIANO
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4. Determinacin de la utilizacin de algn nutriente
4.1 Mtodos Indirectos
Oxgeno
Azcares
CO2
cidos grasos
MTODOS PARA DETERMINAR EL CRECIMIENTO
MICROBIANO