OBTENCIN DE POLISACRIDOS A

PARTIR DE CULTIVOS BACTERIANOS

PRODUCCIN DE XANTANO
POR XANTHOMONAS
CAMPESTRIS.
2.- MARCO TERICO

UN POLMERO: Es una gran molcula constituida por la

repeticin de pequeas unidades simples (monmeros figur
!). Existen polmeros naturales de gran significacin
comercial, como el algodn, formado por fibras de celulosa
"figur 2), la cual se encuentra en la madera y en los tallos
de muchas plantas, y se emplea en la fabricacin de telas y
papel.

L #$% es otro polmero natural muy preciado, y es una poliamida

semeante al nylon. !a lana, protena del pelo de las o"eas, es otro
eemplo. El hule de los #rboles de he"ea y de los arbustos de guayule
es tambin un polmero natural importante.

En general, los polmeros tienen una excelente resistencia mec#nica

debido a que las grandes cadenas polimricas se atraen. !as fuer$as
de atraccin intermoleculares dependen de la composicin qumica del
polmero y pueden ser de "arias clases
APLICACIONES DE LOS POLISACRIDOS
MICROBIANOS

%u aplicacin es di"ersa y empleada en multitud de campos, debido a

que la mayor parte de los polisac#ridos son solubles o pueden ser
dispersados en agua actuando como espesante. &dem#s, eercen un
efecto homogeni$ador'estabili$ador, controlan la cristali$acin,
reducen la sntesis, encapsulan y son formadores de biopeliculas.

%on capaces de interaccionar tanto con materiales de origen

biolgico como sinttico, muestran a su "e$ sinergismo con otros
polisac#ridos, tales sinergismos son el resultado de m(ltiples
propiedades, biocompatibilidad, hicrofobicidad, biodegradabilidad
e inocuidad.

!as aplicaciones de los polisac#ridos de origen microbiano

las podemos agrupar en cuatro categoras) alimentacin,
industria, farmacutica y ambiental.
APLICACIONES EN PRODUCTOS ALIMENTICIOS.

!os polisac#ridos presentan gran cantidad de propiedades (tiles para

di"ersas aplicaciones en el sector alimenticio* se emplean como
agentes estabili$antes, texturi$antes y gelificantes. %e encuentran en la
elaboracin de gelatinas, golosinas y postres de leche, salsas,
almibares y rellenos de tarta.

Estos compuestos se aaden para el control de la textura del mismo

alimento y en la pre"encin de la formacin de cristales de hielo
productos congelados, influyendo en la presentacin del producto final
comestible, algunos se emplean como sabori$antes, existiendo
especfica entre el polisac#rido presente y el sabor de un alimento.
APLICACIONES INDUSTRIALES

!os polisac#ridos microbianos compiten con otros de origen sinttico en aplicaciones industriales,
con una multitud de aplicaciones industriales.

+or eemplo en la extraccin del petrleo, los polisac#ridos microbianos se emplea en el llenado y
en el proceso de recuperacin del petrolea o actuando como "iscosificantes. %e requiere el
empleo de un fluido con compartimiento pseudopl,stico, donde la "iscosidad disminuye al
aumentar la "elocidad de ci$alla. -urante la operacin de perforacin, las soluciones deben ser lo
suficientemente fluidas para facilitar el bombeo de la me$cla, y cuando la operacin se detiene, la
"iscosidad debe aumentar para que los slidos se mantengan en suspensin y poder ser estables
bao condiciones extremas de temperatura y p..

/anto la goma xantana como el succinoglucano, se emplean como aditi"os en muchas etapas del
proceso de perforacin, produccin, transporte y procesamiento de crudo.

& EL XANTANO fue el primer biopolmero en ser aprobado

en 0121. 3#s del 24 5 de la produccin de xantano es de
grado alimentario, se emplea en infinidades de productos,
tales como en panadera, confitera, salas, comidas
enlatadas etc.
APLICACIONES E BIORREMEDIACION
MEDIAMBIENTAL

!a mayora de los biopolmeros muestran una capacidad de

biorremediacion con uniones y retencin de metales pesados.
6umerosos estudios demuestran que disoluciones de
biopolmeros pueden extraer metales pesados por quelacion,
reduccin, precipitacin, intercambio inico. !a capacidad de
extraccin de metales pesados zooglea ramigea ha sido
ampliamente estudiada. Esta, es una bacteria productora de
exopolisac#ridos y se encuentra en el tratamiento de aguas
residuales.

EL XANTANO

Es un biopolmero de origen microbiano. En el trmino biopolmero se

incluyen un gran n(mero de molculas de ele"ado pero molecular, tales como
acido nucleicos, polisac#ridos y lpidos, producidos por una amplia "ariedad
de sistemas biolgicos. -esde un punto de "ista industrial han tenido
importancia los biopolmeros denominados 78omas9. En trminos pr#cticos o
funcionales las gomas son compuestos de ele"ado peso molecular, con
propiedades coloidales que, en un disol"ente adecuado o agente suspensor,
producen geles o suspensiones de ele"ada "iscosidad.

En la industria, tcnicamente, se emplea al trmino 78:3&9 referido a polisac#ridos

obtenidos de plantas o animales, asi como a sus deri"ados, que son dispersables en agua
fra o caliente para producir geles o disoluciones "iscosas. ;onsecuentemente, las gomas
pueden ser entendidas como polisac#ridos de cadena larga, que pueden ser poco, mucho, o
nada ramificados, pero que deben interactuar con el agua.

!a importancia de las goma, se fundamenta en dos caractersticas importantes.

!a capacidad para alterar las propiedades de fluo de agua

!a posibilidad de formar geles capaces de actuar como emulsionantes, adhesi"os, floculantes,

formadores de pelcula, lubricantes, reductores de friccin.
XANTANO
MICROOR'ANISMO PRODUCTOR: Xanthomonas campestris
+ertenece a la familia Pseudomonadaceae, se aislaron
inicialmente de hoas de plantas infectadas por la podredumbre
negra. %E aislo las cepas originales de plantas del genero
Brassica afectadas por la podredumbre negra, identific#ndolas
como agente causante de la patogenia.
%on bacilos rectos gram negati"os, normalmente de 4.<'4.= >m de
ancho y 4.='0.? >m de longitud m"iles por un flagelo polar y
aerobios obligados. %u metabolismo es de tipo quimiorganotrofo,
capaces de utili$ar gran "ariedad de carbohidratos y sales de
#cidos org#nicos. +uede degradar la lignina, incluso determinadas
cepas pueden emplear compuestos arom#ticos como el
protocatecuato, fenilalanina, sinefrina, pirogalol y #cido qunico.
Cr()$r*#)i(# %$ Xanthomonas campestris

:xidasa negati"a (depende de la cepa)

;atalasa positi"a

.@% a partir de peptona

/olerancia m#xima al cloruro sdico @'A 5

Bn flagelo polar

;recimiento mucoso en nutrientes

Esculina positi"a

/emperatura m#xima de crecimiento CA'C1 D;

Estreptomicina resistente

%on bacterias no desnitrificantes y no reducen los nitratos.

En cuanto al metabolismo de carbohidratos, oxidan la glucosa, siendo la ruta
de Entner-oudoroff la predominante en el catabolismo de la glucosa,
des"iando tan solo de un ? a un 02 5 de la glucosa a la ruta de las pentosas
fosfato.

!a especie m#s ampliamente utili$ada para la

produccin de xantano es Xanthomonas campestris.
&unque esta bacteria no es difcil de culti"ar en medio
est#ndar de laboratorio, se han obser"ado "ariaciones
en las cepas, tanto en culti"o en continuo, como en
discontinuo, que afectan a la calidad y al rendimiento
del xantano producido.
%e ha descrito tres tipos diferentes de cepas de esta bacteria.

;epa ! (large)) presenta colonias mucoides amarillas brillantes, de < a A

mm de di#metro. +roporciona buen rendimiento en xantano y con un
ni"el alto de piru"ato ( tambin influye el medio de produccin empleado)

;epa %m (%mall) ) colonias mucoides de color amarillo m#s oscuro que

la cepa ! y de unos @ mm de di#metro. +roporciona menor rendimiento
en xantano que la cepa ! y con menos contenido en piru"ato.

;epa Es (Eery %mall)) produce colonias no mucoides, de color indefinido

y de un di#metro m#ximo de 0 mm. 6o produce xantano apreciablemente
y no es muy frecuente.
+arece que las cepas %m y Es se producen por degeneracin de la cepa !
normalmente debido a un en"eecimiento del culti"o, que puede ser
acelerado por una conser"acin deficiente. +or lo tanto es necesario
mantener la bacteria como cepa ! para obtener un xantano con buenas
propiedades y con un buen rendimiento.
'+,#
!os biopolmeros denominados 8:3&% son
compuestos de alto peso molecular con
propiedades coloidales que, en un disol"ente
adecuado o agente suspensor producen geles o
suspensiones de ele"ada "iscosidad son obtenidos
de plantas o por procesamiento microbiolgico,
que al dispersarse en el agua fra o caliente,
producen soluciones o me$clas "iscosas
8:3&%
microorganismos
Eegetales
terrestre
Eegetales
marinos

Bna goma puede ser definida en sentido amplio, como cualquier polisac#rido soluble en agua, que puede ser extrado
a partir de "egetales terrestres o marinos, o de microorganismos, que poseen la capacidad, en solucin, de
incrementar la "iscosidad o de formar geles
FB6;G:6E
%
emulsificantes
estabili$antes
gelificantes
espesantes

!a industria de procesamiento de alimentos, as como otras aplicaciones

industriales de las gomas, apro"echan de sus propiedades fsicas,
especialmente su "iscosidad y su estructura coloidal.

alginatos

goma agar

goma carragenana
'+,# $-)r*%# %$
./0)# ,ri0#

goma locuste

goma ar#bica
'+,# $-)r*%# %$
#$,i//# 1 +2)$0i%#
(+,+ $-u%%+# %$
./0)# )$rr$#)r$#

'+, -0)0

'+, g$//0
'+,# +2)$0i%#
.r)ir %$ .r+($#+#
,i(r+2i+/3gi(+#
AL'UNAS 'OMAS IMPORTANTES EN LA INDUSTRIA DE ALIMENTOS
H/&!:::::::::
Bi+#i0)$#i# %$/ -0)0+ + g+, -0)0
(+,.r$0%$ /# #igui$0)$# f#$#:

sntesis de precursores acti"ados B-+'glucosa,

B-+'glucoronico 8-+'manosa, en el citoplasma.

/ransferencia secuencial de estos a$ucares a un lquido

transportador

&dicin de grupos acetilos y piru"atos

+olimeri$acin de las unidades

/ransporte del polisac#rido hacia la superficie celular

4UNCIONES DEL XANTANO

funciones importantes para mantener el color ,olor ,sabor, textura y

la estabilidad relati"a de los alimentos

funciones como engrosamiento, suspensin, emulsificacin y

estabilidad

&umenta la textura) firme$a, brillo, cremosidad

-isminuye la sedimentacin y aumenta la homogeneidad de los

ingredientes
A./i((i+0$# %$/ -0)0+
L ./i((i30 %$ / g+, -0)0 $0 /+# /i,$0)+#

espesante y emulsionante. /ambin se utili$an en el pan,

helado,batido de leche
fr,($u)i( :

para mantener en suspensin a los antibiticos y otros

f#rmacos
i0%u#)ri gr*(+/:

meora la presencia de fungicidas, herbicidas e

insecticidas
MANTENIMIENTO DE LAS CEPAS DE
XANTHMONAS CAMPESTRIS

C+0#$r5(i30 /rg+ ./6+:

Es un tipo de conser"acin no propagati"a (la
bacteria no crece ni se reproduce).

C+0#$r5(i30 (+r)+ ./6+:

Este tipo de conser"acin es semipropagati"a (la
bacteria crece se reproduce).
PROCESOS DE EXTRACCIN
DE LOS EPS 7 BIOMASA

Bna "e$ obtenido el xantano, queda bastante

diluido en el caldo de fermentacin, y se
encuentra me$clado con una gran "ariedad de
compuestos* (sales y nutrientes)no consumidos.

+or la presencia de Iantano el medio es muy

"iscoso.
R$(u.$r(i30 %$/ EPS

!os culti"os bacterianos pre"iamente diluidos, se

aaden C "ol(menes de agua destilada por uno de
culti"o, se centrifugan a 04.444 rpm durante C4
minutos.

&l sobrenadante se le incorpora un < 5 de ;l6a,

antes de la adicin de dos "ol(menes de
Gsopropanol 125 .
PRECIPITACIN DEL XANTANO

El xantano se puede presipitar con diferentes

sol"entes organicos como) etanol, acetona e
isopropanol, etc.
ADICIN DE SALES EN LA
PRECIPITACIN DEL XANTANO

!a adicin de sales al medio reduce notablemente la cantidad de

alcohol necesaria para la precipitacin del xantano, aunque hay una
gran diferencia entre utili$ar sales mono"alentes, di"alentes o
tri"alentes, cuanto mayor es la carga del catin, menor es la cantidad
de alcohol necesaria para obtener la precipitacin del xantano.

El tipo de agente empleado depende del uso final del xantano,

generalmente el m#s empleado es el isopropanol en combinacin con
sales de cationes mono"alentes.