ADN recombinante

Esta tcnica permite aislar un gen de un organismo, para

su posterior manipulacin e insercin en otro diferente.

Se emplea normalmente para la produccin de protenas
en gran escala. A esto justamente se dedica la
biotecnologa, es decir a la utilizacin de organismos
vivos o de sus productos con fines prcticos.

El desarrollo de la tecnologa del ADN recombinante fue
posible gracias a varias lneas de investigacin

El conocimiento de las enzimas de restriccin
La replicacin y reparacin de ADN
La replicacin de virus y plsmidos
La sntesis qumica de secuencias de nucletidos.

Cuando se pretende que las factoras
biotecnolgicas (o una clula) produzca
un material especfico, debe drsele la
orden especfica
Se debe agregar a su ADN natural
un complemento gnico y esto es
posible por un vector. Los cuales
permiten obtener mltiples copias de
un trozo especfico de ADN.

El proceso de transformacin de una
porcin de ADN en un vector se
denomina clonacin.

Ejemplo de preparacin de un vector


As se consigue multiplicar un determinado
fragmento de ADN millones de veces para poder
tener una cantidad suficiente para estudiarlo.

Es de gran importancia ya que la cantidad de ADN
presente en las clulas es tan pequea, del orden de
picogramos, que se necesitara una gran cantidad de
material celular para tener una cantidad apreciable
de ADN.
Por su lado, para la amplificacin del gen, los
biotecnlogos cuentan con dos procedimientos que son
hoy en da los ms usados:
El logrado por E.M. Southern en 1975, comienza con la
separacin del ADN digerido por enzimas de restriccin6, los
fragmentos resultantes se separan por tamao mediante la
gel-electroforesis y luego se transfieren a un filtro. El ADN
adherido se desnaturaliza (sometiendo las doble cadenas de
ADN a alta temperatura lo que rompe los puentes
hidrogenados que las mantienen unidas) y se hibrida (o deja
que se ligue) exponindolo a sondas radiativas7, lo que
permitir detectar por rayos X los fragmentos de inters para
su purificacin y duplicacin en procedimientos de estudios
o manipulacin.
En 1988 estuvo disponible un nuevo mtodo la reaccin en
cadena de la polimerasa (PCR), ideada en 1983 por Kary
Mullis. ste permite mecnicamente la amplificacin de
genes en grandes cantidades a partir de muy poco ADN. El
sistema implica la adicin de un cebador corto (un
oligonucletido) en cada extremo de la secuencia elegida
de ADN, separando las dos cadenas de la doble hlice por
calentamiento y exponindolas a un ADN polimerasa8 que
reconoce a los cebadores dispuestos a cierta distancia
entre s en lados opuestos de la cadena y duplica el
nmero de cadenas de ADN en la muestra. Esta enzima es
obtenido a partir de una purificacin de una bacteria que
prospera en las elevadas temperaturas de las aguas
termales y que no se desnaturaliza por temperatura cuando
el ADN seleccionado lo es. De este modo en la PCR,
ambas cadenas de ADN se copian simultneamente y si el
procedimiento se repite unas veinte veces, se obtendrn un
milln de copias a partir de un solo fragmento original.

Biochips
Permiten conocer mutaciones genticas en los pacientes

De esta manera se concluira la primera fase del
proyecto genoma: estudiar la funcin de los genes, las
diferencias genticas individuales y su incidencia en el
desarrollo de las enfermedades.

Estos biochips son dispositivos miniaturizados en los que
se pueden depositar decenas de miles de sondas de
material gentico.




APLICACIONES DE LA
INGENIERA GENTICA
Obtencin de protenas
de inters mdico y
econmico
antibiticos
enzimas
hormonas: insulina, hormona del
crecimiento, eritropoyetina10
vacunas
protenas sanguneas: seroalbmina11,
factores de coagulacin
El mejoramiento gentico de los vegetales, se espera
conseguir:
Mayor adaptacin a diversos ambientes.
Mejores caractersticas agronmicas (resistencia, desgrane, buena
cobertura, etc.). Resistencia a plagas y enfermedades.
Resistencia a la sequa, temperaturas bajas o altas, etc.

Para incrementar la calidad de los productos se persigue:

Alto valor nutritivo (protenas y vitaminas).
Mayor coloracin, sabor y/o tamao de los frutos. Resistencia al
transporte y almacenamiento.
Reduccin de la cantidad de ciertas sustancias indeseables en los
productos, etc.
Mejora gentica de vegetales y animales
para obtener una mayor produccin y
mejor calidad nutricional
Obtencin de plantas clnicas para
cultivos
Los pasos a seguir para la obtencin de plantas
clnicas son:

Se aslan una o diversas clulas de cualquier parte
de la planta (especialmente las hojas).
Se cultivan en el laboratorio las clulas hasta que
se desarrolla una planta adulta
Obtencin de "bioinsecticidas", animales
y plantas capaces de destruir a otros
seres vivos que se alimentan de los
cultivos.
1. Muchas plantas son atacadas por insectos. Algunas bacterias
de producir sustancias toxicas para dichos insectos
2. Podemos extraer de la bacteria el gen que produce la sustancia
toxica e introducirlo en el ncleo de una clula vegetal. Utilizamos
enzimas retrictasas que funcionan como tijera