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ADN y su papel en la herencia

Captulo 11
El principio transformador
http://profiles.nlm.nih.gov/CC/A/A/B/N/_/ccaabn.jpg
http://www.cbs.dtu.dk/staff/dave/roanoke/figure11_1ad.jpg
Los experimentos de Griffith
(1927), demostraron que algo en
las cepas virulentas S poda
transformar a cepas no
virulentas R en una forma letal,
an cuando las cepas S hubieran
muerto a causa de altas
temperaturas.
Qu poda ser ese algo?
Candidatos para ser ese algo, el
principio transformador:
Protenas
Carbohidratos
Lpidos
cidos nuclecos

Transformacin
(Avery, MacLeod y McCarty, 1930-44 )
http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/Basemol/avery.jpg
http://history.amedd.army.mil/booksdocs/itsfirst50yrs/sec1-1pic12.jpg
http://profiles.nlm.nih.gov/CC/A/A/C/C/_/ccaacc.jpg
Descubrieron que al poner en contacto a
cepas de S. pneumoniae no virulentas con
ADN de cepas virulentas, stas se
transformaban. No pasaba lo mismo con
protenas, lpidos ni carbohidratos.
No obstante, los
trabajos con bacterias
no eran confiables en
ese tiempo
Entonces, con qu trabajar?
Los virus son parsitos intracelulares obligatorios,
constituidos por protenas, cidos nucleicos y algunas
veces lpidos, eran los candidatos perfectos.
Bamford, 2003
Trabajos con
bacterifagos
Los bacterifagos son virus que atacan
bacterias. Estn constituidos por
protenas y cido nucleco.
www.vet.upenn.edu/schoolresources/communications/publications/bellwether/55/images/bacteriophage.jpg
http://osulibrary.oregonstate.edu/specialcollections/coll/pauling/dna/pictures/hersheychase1953.jpg

Los experimentos de Alfred
Hershey y Martha Chase
demostraron que el DNA, y no
la protena, es el material
gentico.

A partir de este
material: Replicacin
A partir de este
material: No
Replicacin
Estructura y
funcin del ADN
La doble hlice es esencial para la
funcin del material gentico:
Almacena informacin gentica.
Es susceptible a mutaciones.
Replicacin muy precisa.


(Watson y Crick, 1953)
E
S
T
R
U
C
T
U
R
A

D
E
L

A
D
N

DNA

ds
ss
Regla de Chargaff (1950)
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/bookres.fcgi/genomes/ch1f10.gif
3 posibles modelos para la
replicacin del ADN
Semiconservativa
Produce molculas con ADN nuevo y
original, de manera que cada molcula
contenga una cadena de ADN nuevo y
una cadena de ADN original.
Conservativa
Preserva la molcula original y
genera un molcula completamente
nueva.
Replicacin dispersa
Produce 2 molculas con ADN
original y nuevo distribuido
azarosamente en las 2 cadenas.
La replicacin del ADN es
semiconservativa
vnculo
Replicacin de ADN
Complejo de replicacin (varias enzimas)

Primasas
ADN helicasas
ADN polimerasas (varios tipos)
ADN topoisomerasas
ADN ligasas



Protenas de unin a la cadena
sencilla

Iniciadores de RNA (in vivo)

dNTPs

DNA polimerasa
Replicacin en procariotas
3 millones de pares de bases 1 sitio ori
Replicacin en eucariotas
100 millones de pares de bases. Cientos de sitio ori
Inicio de la replicacin
Requiere primers o
iniciadores de RNA
ADN polimerasa III y unin de
nucletidos
Replicacin y fragmentos de
Okazaki
Los fragmentos de Okasaki
tienen una longitud de
1000 2000 nucletidos
en la replicacin
procariota; en la
eucariota, 100 200.

La velocidad de la
replicacin en E. coli
es de 1000 pbs por
segundo, con una
rata de error de 1
en 1 milln de pb.

Velocidad de la Replicacin
Reaccin en Cadena de la
Polimerasa (PCR)
Diseada por Kary Mullis. Amplificacin enzimtica de fragmentos cortos
de ADN in vitro. Se usan iniciadores (cebadores) de DNA y una enzima
termoresistente (Taq polimerasa)
Revisin y correccin de
errores
Las clulas eucariotas tienen al menos 3 mecanismos
de reparacin:

Mecanismo de rectificacin, que corrige
errores a medida que la ADN polimerasa los
comete.
Mecanismo de reparacin de apareamientos
errneos, revisa y rectifica los apareamientos
entre bases una vez el ADN ha sido replicado.
Mecanismo de reparacin excisin,
remueve y reemplaza bases qumicamente
anormales.
Mecanismo de rectificacin
Reduce errores a 1 en 10.000 pb durante la
replicacin, corrigiendo apareamientos incorrectos
entre las bases.

Entre las protenas que ayudan en esta labor se
encuentran la ADN helicasa, ADN ligasa y otras del
complejo de replicacin.
Mecanismo de reparacin
La polimerasa revisa el ADN celular en busca de apareamientos
incorrectos, bases qumicamente modificadas, o puntos donde una
cadena tiene ms bases que la otra (loop).
Enzimas de restriccin, cortan la zona afectada y la ADN polimerasa y
ADN ligasa, sintetizan y unen los nuevos fragmentos a la cadena
original.