Los bioensayos son pruebas en las que se utilizan organismos vivos
para detectar o medir la presencia y efectos de una o mas sustancias txicas, as como determinar el lmite de tolerancia de dichas sustancias. Por medio de un bioensayo con artemia salina es posible determinar la CL50 de componentes activos de extractos de un medio salino a un bajo costo ya que son fciles de cultivar y de manipular en el laboratorio. La concentracin letal 50 cuantal, es la concentracin necesaria para causar un efecto txico o letal en el 50% de la poblacin de estudio. El dicromato de potasio tiene la capacidad de entrar a la clula utilizando la va proteica de canales inicos. Al entrar a la clula el Cr(IV) interacta con agentes que lo reducen a Cr(V), Cr(IV) y Cr(III), generando fuerza oxidante capaz de producir alteraciones en el DNA. La coca cola tiene una cantidad de cafena la cual actua en receptores de adenosina siendo un estimulante metablico del SNC. OBJETIVOS. Manejar un sistema biolgico alterno a los mamferos y roedores para la determinacin de una curva concentracin- respuesta cuantal. Realizar el clculo de la CL50 mediante el anlisis Probit. HIPTESIS. El aumento de la concentracin de dicromato de potasio y de coca cola influye en el nmero de sujetos muertos. DISEO EXPERIMENTAL.
RESULTADOS
DISCUSIN DE RESULTADOS.
Con los datos obtenidos en la grfica se calcularon las CL50 para K2Cr2O7 y coca cola donde, de acuerdo con la literatura, la CL50 es la concentracin media necesaria para causar la muerte de los sujetos. En la grfica se puede observar que se necesita una cantidad menor de dicromato de potasio para causar el efecto de muerte en comparacin con la cantidad que se necesita de coca cola. El dicromato al actuar en canales inicos genera una alteracin en el ADN de la clula causando rpidamente la muerte. Si la clula esta un mayor tiempo expuesta al xenobitico en una alta concentracin las reacciones Redox que se llevan a cabo en la clula sern mayores, es por esto que se observa una mayor cantidad de sujetos muertos. La coca cola acelera el metabolismo de las clulas, por lo que se necesita mayor concentracin para acelerarlas tanto que se mueran. Los resultados obtenidos pueden verse afectados por el manejo de los sujetos ya que no sabemos exactamente la edad y sexo de las artemias, lo cual influye en su variabilidad biolgica; adems hubo equipos que contaron artemias muy chiquitas y artemias grandes por igual. CONCLUSIONES. Al aumentar la concentracin de K2Cr2O7 se observa un mayor nmero de muertes. El aumento en la concentracin de coca genera un muy leve crecimiento en el numero de muertos, para observar mejor ese aumento de muertes hay que aumentar por mucho la concentracin de coca.
REFERENCIAS. Foster, G. A quantitative struchture-activity relationship between partition coefficients and the acute toxcicity of naphtalene derivates in Artemia Salina Aquatic toxicology. Pp 245-254 Remington, J. Farmacia Volumen 1; 19 edicin, Mdica Panamericana, Argentina 1998; pp 712,713, 721 Rotular por triplicado los viales (Conc. 0, 4,6, 8, 10, 12, 16 y 20 mg/mL) y colocar una marca a un volumen de 5 mL. Colocar aproximadament e 10 Artemias en cada vial Adicionar a los viales la disolucin de K2Cr2O7 ( 0, 0.4, 0.6, 0.8, 1, 1.2, 1.6, 2 mL). Adicionar disolucin de agua de mar (VT=5mL) Contar las Artemias muertas a los 30,60 y 90 min. Grfico1: Curso temporal del promedio grupal de artemias muertas debido a la exposicin del xenobitico a diferentes concentraciones. Grfico 2: LogC vs Probit para clculo de CL50 de ambos xenobiticos. CL50 para K2Cr2O7= 13.4 mg/mL LIC=11.5 LSC=15.6 CL50 de coca= 1613.8 mg/mL LIC=1198.04 LSC= 2173.7 Concentraciones calculadas de la grfica 2. LSC y LIC calculados por mtodo de Litchfield-Wilcoxon. 0 1 2 3 4 5 6 7 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 Y i