TINCIONES

UNIDAD I-II
BREVE HISTORIA
Viene del Griego histos que significa tejido, telar y de
logos que quiere decir palabra aprendizaje.
Histologa significa entonces el estudio sobre el tejido
tanto vegetal como animal y fue introducido como
denominacin por Mayer en 1819.
La primeras investigaciones histolgicas se dieron en
1600.
Marcello Malpighi (1628-1694) es el fundador de la
histologa. Se nombran aqu tambin: Swamerdam y
Leewenhoek quien descubri en cortes de corcho que
el tejido vegetal esta compuesto por pequeas cmaras
a las que denomino clulas.
Bichat, a fines de 1700, introduce le concepto de tejido.
As, en 1833 Brown descubre el ncleo celular. Luego,
en 1839 Schawnn lanza la teora celular.
TRABAJO EN CUADERNO:
Investiga la biografa de Marcello Malpighi y
contesta las siguientes preguntas:
1.- Cules fueron sus principales contribuciones en
la histologa animal y vegetal?
2.-Qu cualidades crees que le permitieron a un
mdico convertirse en un cientfico y padre de la
histologa?


Kolliker en 1852, edita el primer texto sistematizado
sobre la estructura del tejido humano, en el se reducen
los 21 tejidos de Bichat a los 4 tejidos fundamentales
actuales, es decir, tejido epitelial, conectivo, muscular y
nervioso
LECTURA
Del libro Histologa de Geneser, realiza la lectura
del captulo 5, De clulas a tejido y contesta las
siguientes preguntas:
Qu es la histognesis?
De que parte del blastocisto se desarrollan las 3
capas germinativas?
Qu se entiende por parnquima?
Qu se entiende por morfognesis?
MTODOS EMPLEADOS EN HISTOLOGA
PREPARACIN GENERAL DE TEJIDOS
Varan segn el tipo de muestra y segn el microscopio en el que se desee
observar la muestra.
Tcnica histolgica tradicional: los tejidos son endurecidos substituyendo el agua
por parafina utilizando la tcnica de infiltracin y teidos para aumentar la
visibilidad de las estructuras celulares. Los cortes en esta tcnica suelen tener un
grosor entre 2 y 10 micrmetros. Esta tcnica es lenta y laboriosa, requiriendo al
menos de 15 o 16 horas para obtenerse una muestra vlida para el corte.
Crioseccin: en esta tcnica los tejidos son endurecidos por congelacin. Esta
tcnica se utiliza para los tejidos que no soportan el proceso impuesto por la
tcnica histolgica tradicional, o cuando se requiere de resultados inmediatos
(esta tcnica es mucho ms veloz que la primera, 5-10 minutos). Se usa una
variante del micrtomo denominada criostato, alojado en una cmara de
congelacin, que puede alcanzar temperaturas de hasta -35 C segn el modelo.
Se suele trabajar a temperaturas de entre -20 y -25 C.
Microscopa electrnica: los tejidos son embebidos en resina epxica y luego se
utiliza un microtomo equipado con una hoja de vidrio o diamante para cortar
secciones muy finas (tpicamente de 60 a 100 nanmetros). Las secciones se
tien y se examinan con un microscopio electrnico de transmisin. A menudo a
este instrumento se lo denomina ultramicrotomo.

Micrografa electrnica de la tincin
(orgnica) de tejido vegetal sin (arriba) y
con (abajo) OsO
4

XILENO Y ETANOL

TOMA DE LA MUESTRA
En primer lugar se toman
fragmentos de la pieza a
estudiar y se depositan
en un contenedor
perforado. El contenedor
es sometido a la accin
de agentes que
deshidratarn el
contenido y finalmente lo
incluirn en parafina
lquida. El fragmento
parafinado se deja
enfriar en un molde con
el propsito de obtener
un bloque slido.
OBTENCIN DE LOS CORTES
El bloque es reducido a finas secciones que son depositadas en un
recipiente con agua caliente. Las secciones de la muestra se
recogen en una lmina de vidrio (portaobjetos).
DESPARAFINADO

Sometemos a los "portas" a la accin de agentes que eliman la
parafina y rehidratan los cortes. Este paso hace posible la accin de los
colorantes
TINCIN
Tincin con hematoxilina-eosina y fijacin con formalina:
La tincin hematoxilina-eosina corresponde a la mezcla
de hematoxilina y eosina.
El mtodo supone la aplicacin de la tincin de hematoxilina, que
por ser catinica o bsica, tie estructuras cidas (basfilas) en
tonos azul y prpura , como por ejemplo los ncleos celulares; y
el uso de eosina que tie componentes bsicos (acidfilas) en
tonos de color rosa, gracias a su naturaleza aninica o cida,
como el citoplasma.



DESHIDRATADO DE LAS MUESTRAS

A continuacin volvemos a deshidratar los cortes para preservarlos y
hacer duraderas las muestras.
MONTAJE DE LAS MUESTRAS
Finalmente, cubrimos los "portas" con una delgada
lmina de vidrio (cubreobjetos) en la cual
colocamos una gota de medio adhesivo.
LABORATORIO
Biopsia
Parafina-microtomo-hematolixina
Criostato
PACIENTE: Manchas

REFERENCIAS
http://labbio.bligoo.com/content/view/441950/Etapa
s-en-la-preparacion-de-una-muestra-
microscopica.html

TINCIONES: EXPOSICION POR
PAREJAS
HEMATOXILINA Y EOSINA
ARGENTICA
PAS
WRIGHT/ROMANOWSKY
GRAM

Exposicin de 15 min
Historia, fundamento, procedimiento y ejemplos.
Bibliografia