Anda di halaman 1dari 19

ANALSIS INSTRUMENTAL

LIC. HENRY HERNANDEZ


El desarrollo de la GC como una tcnica
analtica fue iniciado por Martin y Synge
1941; sugirieron el uso de cromatogramas de
particin gas-lquido con fines analticos.
Cuando usaron la cromatografa de reparto
lquido-lquido, predijeron que la FM no tiene
por qu ser solo un lquido, sino que puede
ser un vapor.
Su inferencia fue que separaciones muy
refinadas de sustancias voltiles en una
columna en la que se hace fluir un gas
permanentemente, sobre un gel impregnado
con un disolvente no voltil sera mucho ms
rpido, por tanto:
A. las columnas mucho ms eficiente y
B. los tiempos de separacin mucho ms
cortos.
As que el concepto de la cromatografa de
gases fue concebido a principios de los aos
cuarenta, pero lamentablemente poco se
tom nota de la sugerencia sino hasta mas
tarde.

Asi que Syngey su compaero de trabajo
James Martin llevaron el concepto a la
realidad prctica algunos aos ms tarde, en
1951, cuando publicaron su artculo que
describe el primer cromatgrafo de gases
Ellos demostraron la tcnica mediante la
separacin y determinacin cuantitativa de
los doce componentes de una mezcla de
cidos grasos de C1-C5.
La importancia de la GC fue reconocido casi
de inmediato por los laboratorios
petroqumicos, los cuales enfrentan el reto de
anlisis de mezclas complejas de
hidrocarburos.
Por el contrario de HPLC, la GC utiliza una FM
gaseosa para el transporte de componentes
de la Mx a travs de cualquiera de las
columnas empaquetadas o capilares que
contienen una FE lquida polimrica.
En la mayora de los casos, las columnas de
GC tienen un dimetro interno ms pequeo
y son ms largas que las columnas de HPLC.
GC se ha convertido en una tcnica
sofisticada desde el trabajo pionero de Martin
y James en 1951, y es capaz de separar
mezclas muy complejas de analtos voltiles.
Las muestras analizadas por GC deben ser
voltiles (tener una presin de vapor
significativa por debajo de 250 C).
La derivatizacin para incrementar la
volatilidad es posible, pero puede ser
incmodo e introduce los posibles errores
cuantitativos.
La mayora de los analtos GC estn bajo 500
Da Peso molecular para fines de volatilidad
Analtos altamente polares pueden ser menos
voltil que se sospechaba cuando se disuelve
en un disolvente polar o en presencia de otras
especies polares debido a las fuerzas
intermoleculares tales como enlaces de
hidrgeno .
HPLC
El anlisis por HPLC no tiene problemas de
volatilidad, sin embargo, el analito debe ser
soluble en la fase mvil .
HPLC puede analizar muestras en un amplio
rango de polaridad y es capaz de analizar
muestras inicos. Componentes de la fase mvil
se seleccionan para asegurar la solubilidad de la
muestra .
HPLC no tiene un lmite de peso molecular
superior real y protenas de gran tamao de
muchos miles de Daltons se puede analizar .
Por lo tanto - En qu circunstancias se opt por
GC para separar nuestros componentes de la
muestra ?

En la cromatografa de gases (GC) la FM es un gas y la
FE es o bien un slido - gas slido cromatografa
(GSC) o un lquido polimrico inmovilizado - Gas
Lquido La cromatografa (GLC). De los dos tipos de
GC, GLC es de lejos el ms comn como se ver.
La pelcula muestra un proceso de separacin tpica
de GC. Cada componente 'particiones' de muestreo
entre la fase mvil gaseosa y la fase estacionaria
lquido (a menudo revestidos sobre la pared interior
de un tubo capilar largo y delgado).
La velocidad y el grado de compartimentacin
depende de la afinidad qumica del analito para la
fase estacionaria y la presin de vapor del analito -
que se rige por la temperatura de la columna.
De la pelcula se puede ver que el componente A
tiene una menor afinidad por la fase estacionaria
y por lo tanto se mueve a travs de la columna
ms rpidamente que el componente B, que pasa
ms de su tiempo en la fase estacionaria - de
esta manera se logra la separacin.
En GC, la separacin del analito se logra
mediante la optimizacin de las diferencias en la
afinidad de la fase estacionaria y las presiones de
vapor relativas de los analtos. En la prctica,
estos parmetros son manipulados por el cambio
de la naturaleza qumica de la fase estacionaria y
la temperatura de la columna.
El 'coeficiente de distribucin' mide la tendencia
de un analito a ser atrados por la fase
estacionaria. Los grandes valores de Kc conducen
a tiempos de retencin del analito ms largos. El
valor de Kc puede ser controlada por la
naturaleza qumica de la fase estacionaria y la
temperatura de la columna.

CS - concentracin de analito en la fase
estacionaria
Cm - concentracin de analito en la fase mvil
Instrumentacin para la cromatografa de gases se ha desarrollado continuamente
desde el inicio de la tcnica en 1951 y la introduccin de los primeros sistemas
comerciales en 1954.
La mayora de los sistemas GC comerciales modernos funcionan de la siguiente
manera:
Un gas portador inerte, se suministra a partir de cilindros de gas a la GC donde se
regula la presin utilizando controles de presin manual o electrnico (neumtico)
La FM regulada se suministra a la entrada y posteriormente fluye a travs de la
columna y en el detector
La muestra se inyecta en ( por lo general ) el puerto de inyeccin calentado, donde
se volatiliza y lleva en la columna por el gas portador
La muestra se separa dentro de la columna - por lo general una larga columna de
slice con base con dimetro interno pequeo . La muestra se separa por particin,
diferencial de los analtos entre las FM y FE, sobre la base de la presin de vapor
relativa y solubilidad en la FE lquida inmovilizada
Por elucin de la columna , el gas portador y los analtos pasan al detector, que
responde a algunas de las propiedades fisicoqumicas del analito y genera una seal
electrnica de medicin de la cantidad de analito presente
El sistema de datos a continuacin, produce un cromatograma integrado
La cromatografa de gases utiliza hornos que son programables de temperatura. La
temperatura del horno del GC vara tpicamente desde 5 C a 400 C , pero puede ir
tan bajo como -25 C con enfriamiento criognico.
El cromatograma
Como los componentes eluyen de la columna
que pasan a un detector - donde algunas de
las propiedades fisicoqumicas del analito
produce una respuesta del detector. Esta
respuesta se amplifica y se represent
grficamente contra el tiempo - dando lugar
a una 'cromatograma'.
Componentes (tales como el disolvente de inyeccin) que no
son retenidas dentro de la columna de elucin en el 'tiempo
muerto' o 'soporta tiempo "t0. Hay varias maneras de medir
este parmetro con compuestos no retenidos, tales como
metano o etano.
Que son retenidos se eluyen como aproximadamente 'Gauss'
Aquellos compuestos (analtos y componentes de la muestra)
en forma de picos ms adelante en el cromatograma. Los
tiempos de retencin proporcionan el aspecto cualitativo del
cromatograma y el tiempo de retencin de un compuesto
siempre ser la misma en condiciones cromatogrficas
idnticas. La zona de la altura del pico o pico cromatogrfico
se relaciona con la cantidad de analito. Para la determinacin
de la cantidad real del compuesto, la superficie o la altura se
compara con los estndares de concentracin conocida.
GC Ventajas y desventajas
La cromatografa de gases tiene varias ventajas importantes que se enumeran contrario.
Tcnicas de GC producen anlisis rpido debido a la naturaleza altamente eficiente de
las separaciones alcanzados - esto ser estudiado ms en la Seccin Ampliacin Band.
Se puede argumentar que la GC moderna produce las separaciones ms rpidas de
todas las tcnicas cromatogrficas. Una columna se ha producido para separar 970
componentes dentro de un tiempo de anlisis razonable - demostrando que las
separaciones muy complejos pueden llevarse a cabo mediante GC.
Mediante el uso de una combinacin de temperatura del horno y la qumica de fase
estacionaria ( polaridad ) separaciones muy difciles tambin pueden llevarse a cabo -
incluyendo separaciones de ismeros de posicin quirales y otros .
GC es excelente para el anlisis cuantitativo con una gama de detectores sensibles y
lineales para elegir.
Sin embargo GC se limita al anlisis de muestras voltiles . Algunos analitos altamente
polares se pueden derivatizar para impartir un grado de volatilidad , pero este proceso
puede ser difcil y puede incurrir en errores cuantitativos .
Un lmite prctico superior de temperatura para las columnas de GC convencionales es
de alrededor de 350 a 380 oC . Rara vez los puntos de ebullicin del analito exceden
400 oC en el anlisis de GC y el peso molecular superior es generalmente alrededor de
500 Da
Ventajas
anlisis rpido
Alta eficiencia - que conduce a alta resolucin
Detectores sensibles (ppb)
No destructivos - acoplamiento permite espectrmetros de masas (MS) - un
instrumento que mide la masa de las molculas individuales que han sido
convertidos en iones, es decir, molculas que se han cobrado elctricamente
Alta precisin cuantitativa (<1% RSD tpica)
Requiere muestras pequeas (<1 ml)
Tcnicas robustas y fiables
Bien establecido con una amplia literatura y aplicaciones
Desventajas
Limitado a muestras voltiles
No es adecuado para muestras que degradan a temperaturas elevadas
(trmicamente lbil)
No es adecuado para la cromatografa preparativa
Requiere detector MS para analito elucidacin estructural (caracterizacin)
La mayora de los detectores de no-MS son destructivos
Aplicaciones tpicas GC
Desde el desarrollo de los instrumentos de GC en la primera mitad de 1950, GC ha encontrado
aplicaciones en una serie de actividades industriales, medioambientales, farmacuticas y de
biotecnologa laboratorios analticos.

Tcnicas de GC modernos son capaces de muestrear entre una amplia variedad de matrices,
incluyendo slidos, lquidos y gases permanentes.

Aplicaciones de alta temperatura utilizando columnas especialmente diseadas son capaces de
analizar las sustancias relativamente no voltiles y las tcnicas de enfriamiento-en la Columna
de inyeccin permiten la toma de muestras de materiales moderadamente termolbiles.


Tcnicas de purga y trampa y autosampling espacio de cabeza estn ahora bien establecidos y
son capaces de desorber o extraer muestras colectadas en el ms inhspito de los ambientes,
como los ventiladores de emisin de las plantas industriales.

Detector de tecnologa para GC es capaz de detectar cantidades muy pequeas de pesticidas
por ejemplo, a partir de muestras ambientales
y tcnicas de GC-MS permiten la elucidacin estructural de los analitos incluso ms complejas.
farmacutico
En el GC industria farmacutica se utiliza para analizar los disolventes residuales en ambas
materias primas ( substancia medicinal ) y productos terminados ( productos de drogas) .
Aplicaciones biofarmacuticas incluyen pantallas de drogas de orina para los barbitricos y
frmacos derivatizados y para el xido de etileno en los productos esterilizados , tales como
suturas.
Alimentos / Sabores / Fragancias
La industria alimentaria utiliza GC para una amplia variedad de aplicaciones, incluyendo
pruebas de calidad y las pruebas de disolventes . Las industrias de sabores y fragancias utilizan
GC para la prueba de la calidad y la toma de huellas dactilares de fragancias para la
caracterizacin .
petroqumico
Aplicaciones de GC incluyen el anlisis de gas natural o de las refineras , la caracterizacin de
la gasolina y la fraccin de la cuantificacin , aromticos en benceno, etc aplicaciones
geoqumicos incluyen el mapeo de las reservas de petrleo y el rastreo de los embalses , etc
Qumica / Industrial
Los usos industriales qumicos / incluyen la determinacin de contenido de los productos ,
determinacin de la pureza , de monitoreo procesos de produccin , etc GCs se utilizan para
detectar cidos orgnicos , alcoholes, aminas , steres, y solventes .
ambiental
Aplicaciones GC ambiental incluyen la deteccin de contaminantes tales como pesticidas ,
fungicidas , herbicidas, compuestos aromticos , etc purgables aplicaciones de proteccin del
medio ambiente industriales incluyen apilar y emisiones de residuos , as como las descargas
de agua .
Forence